文章编号：1007 —4287(2020)04 —0632 —03
CD16/CD13表达模式可以有效鉴另lj粒细胞相关疾病王卉1•，王爱先、甄军毅、吴雪英\陈曼、宫美维\宋雨竹\李兰2 函件业务(1.河北燕达陆道培医院检验科，河北廊坊〇65201;2.北京旷博生物技术股份有限公司，北京100176) 一632—Chin J Lab D iagn，A p ril,2020, Vol 24，No. 4
CD16是流式细胞术检测发育阶段粒细胞常用标志，因其编码基因和抗体的复杂性，一些相关疾病 呈现相似又不同的表型，需要加以区分。CD13表 达强度随着粒细胞分化成熟而变化，所以CD16/ CD13是临床监测粒细胞发育情况的常用抗体组合。本文介绍正常对照以及几种容易误诊的粒细胞 相关疾病的CD16及CD16/CD13表达模式，以研究 其在鉴别不同疾病中的作用。 1材料与方法
1.1 仪器与试剂四FACSCalibur及八FACSCanto流式细胞仪均购自美国Becton Dickin-S〇n(BD)公司。荧光标记嗜水气单胞菌溶素（Fluorescein-labeled proaerolysin，FLAER) 为 加拿大CEDARLANE公司产品，其余单抗均为美国B D公 司产品（其中CD16为BD Pharmingen产品）。
th021.2标本选择 2011年12月到2017年12月在 北京市道培医院和河北燕达陆道培医院就诊的病例。随机选取正常对照50例；随机选取骨髓增生异 常综合征（MDS)50例；全部夜间阵发性睡眠性血红 蛋白尿（PN H)62例；全部粒细胞丢失CD16排除 MDS和P N H后，疑诊为F ey受体DI类B(F c7R[：B)基因缺失患者11例（包括1例供者）。
邮件合并1.3抗体标记及流式细胞仪获取按照陆道培医院流式细胞室常规操作[1]。粒细胞发育阶段的观察 使用CD16/CD13/CD45/C D llb抗体组合，单核细 胞的评价使用CD14/CD64/CD45/C D llc组合。髓 系原始细胞性质判断使用CD34和（或）CD117设 门，观察 CD7、CD56、CD19、HLA-DR、CD33、CD13、C D llb、CD15、CD96等标志是否存在异常表达。使 用FLAER/CD64/CD45/CD14抗体组合以及红细胞和粒细胞的CD55、CD59评价P N H克隆。
创造性思维方法
2 结果
50例正常对照，发育阶段粒细胞CD16/CD13 表达相似，均呈现“对勾”形状。其他免疫表型有：髓 系原始细胞无异常表达，红细胞和粒细胞CD55、
*通讯作者CD59，粒细胞和单核细胞CD55、CD59、FLAER均 无明显丢失。
50例M DS患者粒细胞CD16/CD13表达模式 异常。主要表现为：CD16的表达多呈现不同程度的延续
性；因为CD13和CD16抗原表达强度改变或者分布异常导致的粒细胞CD16/CD13发育模式 异常。其他伴随免疫表型有：常同时伴有粒细胞颗 粒性减低、粒细胞C D llb/CD13发育模式异常等改 变；髓系原始细胞可能会出现异常表达；原始细胞中 CD19 +B祖细胞占比减低；单核细胞异常表达；有 核红细胞比例升高、细胞变大、异常表达等。
62例P N H患者粒细胞CD16/CD13表达模式 与正常对照不同，非常有特征性：CD16不同程度部 分丢失；阴性和阳性细胞之间有明显界限；阴性部分 不是CD16完全丢失，而是呈现弱阳性。其他伴随 免疫表型有：同时出现粒细胞CD24、单核细胞CD14等G P I相关蛋白的丢失；红细胞CD55、CD59，粒细胞和单核细胞CD55、CD59、FLAER的阴性细胞比例升高。
与其他粒细胞相关疾病不同，11例疑诊为FcyRIHB基因缺失患者粒细胞CD16完全丢失（见 图1)。除此之外无异常表达，CD55、CD59、FLAER 表达无缺失。smw工法桩
3讨论
CD16抗原是人类F tryD I类受体(F cT yR D l)，由位于 lq22染体上的FcyRIDA和FcyRIBB两个基因编 码。前者主要表达于N K细胞和巨噬细胞，后者是一 个搪基化磷脂酰肌醇（GPI)膜锚蛋白，只表达于粒细 胞。所以FqR lE B基因缺失的患者、由于GPI蛋白 缺陷导致的PN H病例，粒细胞CD16表达发生改变，而NK细胞的CD16表达不受影响™。
基督教女青年会
CD16的抗体复杂，文献报道不同克隆的抗体针对不同位点：泛-FcyRO]CD16单克隆抗体主要包 括：CLBFcRgranl (mIgG2a)、3G8 (mlgGl)、DJ13〇c (mlgGl)、BW209i2 (mIgG2a)；其他大多数克隆只针对部分位点，所以根据研究目的使用不同克隆抗体。临床免疫分型检测因为需要诊断和鉴别诊断各
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