急性淋巴细胞白血病流式免疫分型探讨

在现实社会中,注意问题比文化素质低更为严重,ADHD大约有50%~80%病例可一直持续到青春期,有30%~50%ADHD病例可持续到成人期,因此,人们认识到ADHD不仅仅是一种儿童障碍,也是一种成人障碍,它可以使人致残。
从临床表现分析,ADHD在儿童期表现为以多动常见,而在青少年期表现为叛逆性常见。在成人期多动行为可能减少而注意力问题表现更为突出。注意缺陷会造成学习困难,将直接影响成年后的就业问题。
ADHD如不,可持续到成人期,其后果十分严重,可发展为人格障碍,其表现为冲动、反社会行为、偷窃行为、说谎行为、物质滥用等成瘾行为危害性更大,而十分困难,它将给家族和社会带来极大的危害性,必须引起精神卫生工作者的重视。因而必须及早对儿童进行矫正,培养儿童健全的人格,使他们成为国家建设的合格人材。
参考文献
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(收稿日期:2002-09-06)
吴铭孙雄飞陈晓琳
暨南大学医学院第二附属医院,广东省深圳市人民医院血液科(518020)
【摘要】目的对28例急性淋巴细胞白血病(ALL)进行流式免疫分型研究,探讨CD19,CyCD79a,CD7,CyCD3等白细胞分化抗原在急性淋巴细胞白血病临床免疫分型中的意义。方法应用双流式细胞术,对28例经细胞形态学、细胞组织化学和临床表现确诊的急性淋巴细胞白血病患者初诊骨髓或静脉血标本进行免疫分型,采用CD45/SSC设门,MPO以阳性细胞数!3%为该表型表达阳性,其他白细胞分化抗原以阳性细胞数!20%为该表型表达阳性。结果14例B细胞系列急性淋巴细胞白血病(B-ALL)
高敏感性和高特异性抗原分别为CD19(100%)和CyCD79a(93%);14例T 细胞系列急性淋巴细胞白血病(T-ALL)高敏感性和高特异性抗原分别为CD7(100%)和CyCD3(100%);CD10,CD34,HLA-DR,CD38等非系列相关性早期分化抗原在急性淋巴细胞白血病均有较高的表达频率。结论在ALL已经明确的情况下,CD19和CD79a是确定B-ALL最重要的单抗;CyCD22是B系列最特异性单抗,但敏感性过低;CD7和CyCD3是确定T-ALL最重要的单抗。
【关键词】免疫分型双流式细胞术白血病,淋巴细胞,急性
急性淋巴细胞白血病(ALL)免疫分型可以判定白血病细胞的系列来源及所处的分化阶段,对白血病的诊断、方案的选择、预后的判断都有重要意义。近年来,流式细胞仪(FCM)为白血病的分型开辟了一条新途径,尤其是FCM具有灵敏度高、信息量大等特点,能更快速、更准确地反映白血病细胞的来源和生物学特性。为进一步提高白血病的免疫分型诊断、指导和判断预后的水平,我们对28例急性淋巴细胞白血病流式细胞免疫表型特点进行研究,现报告如下。
1资料与方法
1.1病例来源28例初诊患者均经骨髓涂片、细胞组织化学染及临床表现确诊为ALL,分类按FAB诊断标准,所有病例的细胞化学过氧化酶染(POX)均阴性。其中B细胞系列ALL(B-ALL)14例,T细胞系列ALL (T-ALL)14例;男18例,女10例;年龄0.6~76岁,中位年龄22岁。
1.2标本采集取肝素抗凝骨髓液或静脉血3~5mi,
要求被检测标本中原始幼稚细胞占全部有核细胞的80%以上。
1.3仪器和试剂本研究采用COULTER EPICS(Couiter 公司)流式细胞仪,溶血剂FACS(B-D公司),透膜剂IitraPrep(Couiter公司)。荧光标记单克隆抗体(单抗)包括髓系相关的CD13-PE,CD33-PE,CD14-PE,MPO-FITC;T系列相关的CD3-FITC,CD5-FITC,CD7-FITC,CyCD3-PE;B系列相关的CD19-FITC,CD22-FITC,Cy-CD79a-PE。系列非相关性CD34-PE,CD38-FITC,HLA -DR-FITC,CD10-PE,CD45-Cy-Chrome;同型对照为IG1-FITC/IG1-PE/IG2a-FITC,上述荧光标记抗体均购自B-D公司。
1.4方法肝素抗凝骨髓或静脉血经淋巴细胞分离液分离获单个核细胞,用磷酸盐缓冲液(PBS)调整细胞浓度为(1~5)X106/L,双直接免疫荧光法标记后上机分析,其中FITC,PE,Cy-Chrome荧光分别设在PMT2,PMT3,PMT5通道上,测定前以标准荧光微球校正仪器,以CD45/SSC
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3
·Guangdong Medical Journal Mar.2003,Voi.24,No.3
设门,每测定管收集10000个细胞,测定结果采用EXPO2软件分析。结果判断:MPO以阳性细胞数!3%为该表型表达阳性,其他抗原阳性细胞!20%为阳性标准。
深证指数2结果
2.1急性淋巴细胞白血病系列相关性抗原表达情况
见表1。
表1急性淋巴细胞白血病系列相关性抗原表达情况例(%)
白血病类型例数
白血病细胞表面抗原单克隆抗体检出率
CD19CD22CD3CD5CD7CD13CD33
B细胞系列ALL1414(100)5(36)1(7)0(0)0(0)6(43)5(36)T细胞系列ALL141(7)0(0)9(64)12(86)14(100)2(14)3(21)
2.2急性淋巴细胞白血病胞浆内抗原表达情况见表2。
表2急性淋巴细胞白血病胞浆内抗原表达情况例(%)
白血病类型例数
白血病细胞胞浆抗原单克隆抗体检出率CyCD79a CyCD22CyCD3MPO
B细胞系列ALL1413(93)2(14)0(0)0(0)
T细胞系列ALL141(7)0(0)14(100)2(14)" "2例MPO阳性均为带有髓性标记的ALL,详见正文
2.3急性淋巴细胞白血病非系列相关性抗原表达情况
见表3。
表3急性淋巴细胞白血病非系列相关抗原表达情况例(%)
王克礼
白血病类型例数白血病细胞非系列相关抗原单克隆抗体检出率CD10HLA-DR CD14CD34CD38
B细胞系列ALL1414(100)14(100)0(0)9(64)13(93)T细胞系列ALL145(36)8(57)1(7)7(50)14(100)
3讨论
在本研究中,我们以St Jude研究医院的免疫分型方案作为选择单克隆抗体的基础[1],筛选出16种抗体,基本涵盖目前用于急性白血病免疫分型的所有抗体,这些抗体分别与CD45双标记,然后采用CD45/SSC设门,对28例ALL患者进行了双流式细胞术免疫分型。
本研究结果表明,在ALL已经明确的情况下,CD19和CD79a是确定B-ALL最重要的单抗。两者在区分ALL的系列特征时的敏感性和特异性均在90%以上(表1和表2)。现在认为CD10不是B细胞系列相关抗体[2],因为在T-ALL中CD10阳性率并不低,本研究达到36%。过去研究曾认为CyCD22是非常重要的B系列特异性单抗,本研究也证实在T-ALL没有假阳性,但是敏感性过低(14%),刘艳荣等[3]报道CD79a敏感性及特异性均高于CyCD22;而胞膜CD22也同样具有高特异性和低敏感性的特点,适用于排除T细胞肿瘤的场合(如果CyCD22和CD22阳性,是T细胞肿瘤的可能性很小)[4]。另外,CD22现认为是较晚分化阶段的急性淋巴白血病的标志,可作为急性淋巴白血病免疫分型中阶段划分的参
考[5]。
广州黄埔造船厂本研究结果表明,CD7和CyCD3是确定T-ALL最重要的单抗。在B-ALL中两者均无假阳性,但是文献已经广泛报告CD7在AML有相当的阳性率,所以在St Jude 研究医院的急性白血病免疫分型方案中,C
D7被认为是高敏感性单抗,而CyCD3是高特异性单抗[1]。近来研究发现CyCD3仅出现在胸腺中发育的早期T细胞中,而不存在于骨髓或外周血淋巴细胞中,因此有学者提出外周血或骨髓中T淋巴细胞CyCD3和TdT同时表达阳性即表明白血病细胞的存在[6]。
CD13及CD33作为急性髓细胞白血病(AML)的系列相关抗体已被广泛接受。本组病例中CD13及CD33在ALL中的表达率为20%~43%,高于国外报道,在该组病例中CD13和CD33的敏感性及特异性均不高,可初步区分AML和ALL,但需结合其他分化抗原做进一步的分型(AML资料未给出)[7];现认为MPO是AML系列特异性胞浆内抗原,本组病例中MPO在B-ALL的阳性表达频率为0,而在T-ALL中的阳性表达频率为14%,这与本组T-ALL病例中有2例髓性标志阳性的T-ALL(My+ALL)有关,其特异性是否比POX高需要更多的病例证实,本研究中这2例My+ALL的POX均阴性。
CD34,HLA-DR,CD38是造血细胞早期分化阶段的表面分化抗原,在本组病例中均有较高的表达频率。CD14为粒-单核细胞表面抗原,在本组ALL中的阳性率非常低,但在我们的AML M4和M5的患者中阳性率也很低(AML资料未给出),不能很好的区分ALL和AML。
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(收稿日期:2002-09-12)
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广东医学2003年3月第24卷第3期
急性淋巴细胞白血病流式免疫分型探讨
作者:吴铭, 孙雄飞, 陈晓琳
作者单位:暨南大学医学院第二附属医院,广东省深圳市人民医院血液科,518020
刊名:
广东医学
英文刊名:GUANGDONG MEDICAL JOURNAL
年,卷(期):2003,24(3)
被引用次数:3次
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