CHINA MEDICINE AND PHARMACY Vol.11 No.7 April 202129
张晓霞 马家骅▲ 谢海霞 付 博 张琪苓 颜川岚 杨文雪 冉玉婷
西南科技大学生命科学与工程学院，四川绵阳 621010
[摘要] 目的 研究空间电势发生装置DENBA+对皮肤伤口愈合的影响。 方法 小鼠随机分为空白组、DENBA+处理8 h 组与4 h 组，每组10只，采用急性线形伤口模型，处理12 d，以伤口愈合率与皮肤形态变化、体重、饮食等为评价指标，利用方差分析考察DENBA+产生的电场对皮肤伤口愈合程度的影响。 结果 DENBA+处理后的第2天，DENBA+处理8 h 组和4 h 组小鼠皮肤愈合率高于空白组，且8 h 组的效果差异有极显著性统计学意义（P ＜0.01）；第7天与第12天情况类似，DENBA+处理8 h 组与4 h 组的愈合率高于空白组，差异有统计学意义（P ＜0.01），而DENBA+处理8 h 组与DENBA+处理4 h 组愈合率比较，差异无统计学意义（P ＞0.05），皮肤形态变化也显示DENBA+处理组较空白组愈后更好。各组小鼠的体重比较，差异无统计学意义（P ＞0.05）。实验中，DENBA+处理8 h 组和4 h 组的摄食量低于空白组，差异有统计学意义（P ＜0.01），而各组饮水量比较，差异无统计学意义（P ＞0.05）。 结
论 DENBA+处理产生的电场对皮肤急性线形伤口愈合有促进作用，本研究有望为DENBA+用于创伤的辅助提供实验依据。[关键词] DENBA+；小鼠；皮肤伤口；愈合率 [中图分类号] R641 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2021）07-0029-04
Impacts of DENBA+ on skin wound healing efficacy in mice
ZHANG Xiaoxia MA Jiahua XIE Haixia FU Bo ZHANG Qiling
现代科技成就YAN Chuanlan YANG Wenxue RAN Yuting
College of Life Sciences and Engineering, Southwest University of Science and Technology, Sichuan, Mianyang 621010, China
[Abstract] Objective To investigate the impacts of space potential generator DENBA+ on skin wound healing. Methods The mice were randomly divided into the blank group (n=10), the DENBA+ treatment for 8-hour group (n =10) and the 4-hour group (n =10). The acute linear wound model was adopted, and the wound was treated for 12 days. With the wound healing rate, skin morphological changes, body weight and diet as evaluation indexes, the impacts of electric field generated by DENBA+ on skin wound healing degree was investigated by variance analysis. Results On the 2nd
day after treatment with DENBA+, the skin healing rate of mice in the DENBA+ treatment for 8-hour group and the 4-hour group were higher than that in the blank group, and the efficacy difference in the 8-hour group was statistically significant (P ＜0.01). On the 7th and 12th day, the situation was similar to that on the 2nd day. The healing rates of the DENBA+ treatment for 8-hour and 4-hour groups were higher than that of the blank group, with statistically significant differences (P ＜0.01). However, there was no statistically significant difference between the DENBA+ treatment for 8-hour group and the DENBA+ treatment for 4-hour group (P ＞0.05). The skin morphological changes also showed that the healing rate of DENBA+ treatment group was better than that of the blank group. There was no statistically significant difference in the weight of mice in each group (P ＞0.05). In the experiment, the food consumptions of the DENBA+ treatment for 8-hour and 4-hour groups were lower than that of the blank group, with statistically significant differences (P ＜0.01), while there was no statistically significant difference in water consumption in each group (P ＞0.05). Conclusion The electric field generated by DENBA+ treatment can promote the healing rate of acute linear skin wound. This research is expected to provide experimental basis for the application of DENBA+ in the adjuvant treatment of wound.[Key words] DENBA+; Mice; Skin wound; Healing rate
皮肤由于总暴露在外部环境中，创伤等受伤概率较大[1-2]，尤其因人口老龄化，以及肥胖和糖尿病
等发病率不断上升，更多的人可能会受皮肤创伤的困扰[3-5]，因此，加速皮肤创伤愈合对身体健康至关重要。目前促进创伤愈合的活性物质主要包括生长因子、生物材料、中药等，尽管显示出较好的效果，但起效相对较慢，有些存在安全隐患，长期使
[基金项目]四川爱创科技有限公司校企协作项目（19zh0376）
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通讯作者
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用成本较高，为患者带来沉重的负担[6-8]，亟需探寻更加安全有效的手段。
目前市面上有一种空间电势发生装置，即DENBA+技术装置，通过产生高压低频交变电场实现保鲜，其主要原理是其产生的电场进入商品的水分子细胞中，发生共振，使水分子保持活性，不流失，由此
达到保鲜的效果[9-10]。同理，若DENBA+产生的电场能使伤口处的肉芽组织等活性组织保持活性，则有可能促进细胞生长增殖，达到促进伤口愈合的效果。为此，进行了DENBA+对小鼠皮肤线形伤口愈合程度的影响研究。现报道如下。1 材料与方法1.1 实验动物
小鼠，昆明种，SPF 级，购于成都达硕实验动物有限公司，雌雄各半，体重18～22 g，许可证号SCXK（川）2015-030。1.2 仪器设备与试剂
DENBA +电毯，由四川长虹器件科技有限公司提供；硫化钠九水合物为分析纯（上海易恩化学技术有限公司，批号：C00000055），水为纯净水。1.3 实验方法
1.3.1 小鼠皮肤线形伤口模型的制备与分组 小鼠30只，随机分为三组，每组10只，分别为DENBA+处理8 h 组、DENBA+处理4 h 组和空白组。用医用棉签少量多次沾取8%硫化钠溶液对小鼠背部进行脱毛，10 min 后观察背部毛是否脱干净，若未脱干净，重复上述步骤，观察24 h，确认脱毛未损伤背部肌肤后，进行造模。依据小鼠体重按5 ml/kg 分别腹腔注射10%水合氯醛溶液，待小鼠完全处于麻醉状态后，在背部脱毛区域划一长度为1 cm 的线形伤口[11-12]，避免划破筋膜层。对于DENBA+ 8 h 组与DENBA+4 h 组，分别将小鼠笼置于电压为2200 V 的DENBA+电毯上处理8 h 和4 h，而空白组不作处理。
1.3.2 指标观察 每天观察并记录小鼠的活跃程度和毛等体征变化情况，记录摄食量与饮水量，最
后一天称重，同时在造模后的第2、7、12天分别
量取小鼠伤口长度，按下式计算愈合率。
愈合率=（第1天伤口长度-第n 天伤口长度）/第1天伤口长度×100%
1.3.3 病理组织检测 在造模后的第12天，将小鼠麻醉，取创面边缘至创面中心宽约1 cm×2 cm 的皮肤组织，将取下的皮肤用4%多聚甲醛固定，常规脱水，石蜡包埋切片，苏木精和伊红（hematoxylin and eosin，HE）染，用显微镜观察小鼠皮肤组织病理改变。1.4 统计学方法
采用SSPS 26.0统计学软件进行统计学处理，计量资料用（x ±s ）表示。多组资料比较采用单因素方差分析，组间比较用LSD 检验，P ＜0.05为差异有统计学意义。2 结果
2.1 DENBA+对小鼠体重、摄食、饮水及体征的影响
各组小鼠的体重比较，差异无统计学意义（P ＞0.05），提示DENBA+处理与否对小鼠的体重影响不大。经DENBA+处理后，DENBA+处理8 h 组和4 h 组的摄食量低于空白组，差异有统计学意义（P ＜0.01），且DENBA+处理8 h 组摄入量低于4 h 组，差异有统计学意义（P ＜0.01），而各组饮水量比较，差异无统计学意义（P ＞0.05）。根据每日对小鼠整体状态的观察，发现在整个实验期间，各组小鼠表现活跃，毛均匀，皮毛顺滑，无明显差异。见表1。
2.2 DENBA+对小鼠皮肤伤口愈合程度的影响
DENBA+对小鼠皮肤伤口愈合程度的影响见图1、表2。由图1可见，与第1天比较，在第3天时，伤口的开合程度较大，表明伤口正在经历炎症期，之后慢慢地随着肉芽组织的生长，伤口的愈合也加速。与空白组比较，DENBA+处理8 h 组在第11天伤口已经表皮愈合完全，只留下一道很细的缝。由表2可知，DENBA+处理的第2天，与空白组比较，小鼠伤口愈合情况较好，且随着处理时间的加长，愈合率也提高，其中DENBA+处理8 h 组高于空白组，差异有极显著性统计学
表1 DENBA+对小鼠体重与饮食的影响（x ± s ）
组别
n 体重（g）摄食量[g/（只·d）]饮水量[g/（只·d）]
DENBA+处理8 h 组1035.716±1.981 9.613±0.541**##11.014±0.594DENBA+处理4 h 组1037.072±1.956 12.648±0.486**10.976±0.630空白组10
35.734±1.464
14.577±0.61610.947±0.473
F 值 1.834123.9540.021P 值
0.179
0.000
0.979
注：与空白组比较**P ＜0.01；与DENBA+处理4 h 组比较##P ＜0.01
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意义（P ＜0.01）；第7天与第12天情况类似，DENBA+处理8 h 组与4 h 组的愈合率高于空白组，差异有统计学意义（P ＜0.01），而DENBA+处理8 h 组与4 h 组的效果比较，差异无统计学意义（P ＞0.05），提示DENBA+产生的电场对线形伤口愈合有促进作用。
2.3 DENBA+对小鼠皮肤伤口病理组织的影响
DENBA+对小鼠皮肤伤口病理组织的影响见图2。由图2可知，各组表皮连续，细胞排列整齐，已经明显处于伤口愈合的最后阶段，但DENBA+处理组较空白组细胞排列紧密，表明DENBA+产生的电场对线形伤口的愈合有促进作用，但处理8 h 与4 h
无明显差异。
DENBA+处理8h 组 DENBA+处理4h 组 空白组图2 DENBA+对小鼠皮肤伤口影响的病理切片结果 ( HE, ×100 )
3 讨论
创伤愈合是一个包括炎症期、增殖期和组织再塑期的有序过程[13]，实验中，小鼠的急性线形伤口在
第2～3天时开口较大，主要是因为此时正处于炎症期，伤口局部有不同程度的组织坏死和血管断裂出血，会出现炎症反应，表现为充血、
浆液渗出及
DENBA+处理8 h 组
DENBA+处理4 h
组
空白组
第1天 第3天 第5天 第7天 第11天
图1 DENBA+处理对小鼠伤口的影响
表2 DENBA+对皮肤伤口愈合程度的影响（x ± s ，%）
组别
动物数（只）
中国女性人体
第2天愈合率 第7天愈合率第12天愈合率DENBA+处理8 h 组10 33.792±3.265** 48.855±4.783** 89.852±3.713**DENBA+处理4 h 组1031.605±2.953 47.073±3.526** 89.018±2.023**空白组10
29.962±2.617
39.620±2.355
81.555±2.242
F 值 4.22317.62227.343P 值
0.025
0.000
0.000
注：与空白组比较**P ＜0.01
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32白细胞游出，故局部红肿。虽然皮肤伤口在第2天开口很大，但长度缩小较快，之后随着细胞浆液的渗出与凝集成块，创口渐渐开始结痂，愈合较前期变慢，在第10天左右，有的小鼠皮肤痂皮已经脱落，只留下一丝伤口痕迹，该愈合过程与文献报道基本一致[14]。
本研究结果提示，DENBA+处理的伤口愈合情况较空白组好，可能是DENBA+技术装置产生的高压低频交变电场，通过共振效应使人体的水分子活化，激活和修复机体受损细胞，减少炎症渗出，控制炎症，并通过改善创面局部微循环瘀滞状态，加速创面新陈代谢，促进毛细血管再生和胶原沉积，从而促进肉芽组织增生，达到加速伤口愈合的效果[15-16]，与韩燕等[17]报道的外源性脉冲电磁场刺激促进糖尿病皮肤创伤愈合的机制类似，但其效应可能与电场强度、处理时间、动物模型等有关[18]，
还需要后期进一步探讨。同时，DENBA+对皮肤愈合相关的血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）、成纤维细胞生长因子（fibroblast growth factor，FGF）、转化生长因子（transforming growth factor-β，TGF-β）、炎症释放因子（inflammatory release factor-1β，IL-1β）、血管增生等的影响也有待研究[19]，后期将在此基础上取皮肤组织制片，通过免疫组化来检测上述指标，进一步揭示DENBA+促进伤口愈合的机制。
综上所述，DENBA+产生的电场对皮肤伤口愈合有促进作用，但会使小鼠摄食减小，饮水略有增加，
为DENBA+在临床方面的应用提供了理论依据与实验支撑。
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（收稿日期：2020-11-23）
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