(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)实用新型专利
(10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201921628304.7
(22)申请日 2019.09.27
(73)专利权人 河南安必诺检测技术有限公司
地址 450001 河南省郑州市高新技术产业
开发区长椿路11号13号楼1单元7、8层
(72)发明人 赵冰琳 孙武勇 杨凯峰 高配配
付爽 王珊
(74)专利代理机构 郑州德勤知识产权代理有限
公司 41128
代理人 苏志洋
(51)Int.Cl.
G01N 33/558(2006.01)
G01N 33/531(2006.01)
(54)实用新型名称
(57)摘要
本实用新型提供一种胶体金试纸条，它包括
水纸、多层玻璃纤维膜、样品垫；多层所述玻璃纤
维膜分别上涂覆有胶体金颗粒标记抗黄曲霉毒
烯酮的单克隆抗体和胶体金颗粒标记抗呕吐毒
素的单克隆抗体；所述包被膜的上表面设有质控
线和多条检测线；所述质控线和多条所述检测线
平行设置；多条所述检测线上分别包被有黄曲霉
毒素B1-BSA偶联物、玉米赤霉烯酮-BSA偶联物和 呕吐毒素-BSA偶联物；所述质控线上包被有抗鼠
抗体。该胶体金试纸条结构简单，能同时检测出
该样品是否含有黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、
呕吐毒素，特异性好、灵敏度高、
操作简单。权利要求书1页 说明书6页 附图10页CN 211179853 U 2020.08.04
C N 211179853
U
1.一种胶体金试纸条，其特征在于：它包括PVC底板和设置在所述PVC底板上的包被膜，所述包被膜上
表面的一端设置有吸水纸，所述包被膜上表面的另一端设置有多层玻璃纤维膜，位于顶层所述玻璃纤维膜的上表面设置有样品垫；
多层所述玻璃纤维膜的一端和所述样品垫的一端自下而上向外搭接错层排布并形成台阶状；多层所述玻璃纤维膜分别上涂覆有胶体金颗粒标记抗黄曲霉毒素B1的单克隆抗体、胶体金颗粒标记抗玉米赤霉烯酮的单克隆抗体和胶体金颗粒标记抗呕吐毒素的单克隆抗体；
所述包被膜的上表面设有质控线和多条检测线；所述质控线和多条所述检测线平行设置；多条所述检测线上分别包被有黄曲霉毒素B1-BSA偶联物、玉米赤霉烯酮-BSA偶联物和呕吐毒素-BSA偶联物；所述质控线上包被有抗鼠抗体。
2.根据权利要求1所述的胶体金试纸条，其特征在于：它包括三层所述玻璃纤维膜，位于顶层的所述玻璃纤维膜上涂覆有胶体金颗粒标记抗呕吐毒素的单克隆抗体；位于中间层的所述玻璃纤维膜上涂覆有胶体金颗粒标记抗玉米赤霉烯酮的单克隆抗体；位于底层的所述玻璃纤维膜上涂覆有胶体金颗粒标记抗黄曲霉毒素B1的单克隆抗体。
3.根据权利要求2所述的胶体金试纸条，其特征在于：它包括三条所述检测线和一条所述质控线，三条所述检测线和一条所述质控线平行设置在位于所述玻璃纤维膜和所述吸水纸之间的所述包被膜上，位于中间的所述检测线上包被有玉米赤霉烯酮-BSA偶联物，与所述质控线相邻的所述检测线上包被有呕吐毒素-
BSA偶联物，与底层所述玻璃纤维膜相邻的所述检测线上包被有黄曲霉毒素B1-BSA偶联物。
4.根据权利要求3所述的胶体金试纸条，其特征在于：所述包被膜为硝酸纤维素膜。
5.根据权利要求4所述的胶体金试纸条，其特征在于：所述包被膜的长度小于所述PVC 底板的长度。
6.根据权利要求5所述的胶体金试纸条，其特征在于：所述吸水纸的外端与所述PVC底板的一端相平齐，所述样品垫的外端与所述PVC底板的另一端相平齐。
权 利 要 求 书1/1页CN 211179853 U
胶体金试纸条
技术领域
[0001]本实用新型涉及食品安全检测技术领域，特别是一种胶体金试纸条。
背景技术
[0002]黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和呕吐毒素都属于真菌毒素。真菌毒素是真菌在食品或饲料里生长所产生的代谢产物，人体食入由霉菌生长而腐败或变质食物中的真菌毒素会引起中毒。因此对食品中是
否含有黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和呕吐毒素进行检测具有非常重大的意义。
[0003]目前，对真菌毒素的诊断方法主要有气相谱-质谱法（GC-MS）、高效液相谱法（HPLC）等方法。但是由于气相谱-质谱法、高效液相谱法等需要的仪器价格高昂，检测过程繁琐、需要专业从事人员操作，不易于在基层的推广，因此，上述两种方法在使用中受到很大的限制。
[0004]为了解决以上存在的问题，人们一直在寻求一种理想的技术解决方案。
实用新型内容
[0005]为了实现上述目的，本实用新型所采用的技术方案是：一种胶体金试纸条，它包括PVC底板和设置在所述PVC底板上的包被膜，所述包被膜上表面的一端设置有吸水纸，所述包被膜上表面的另一端设置有多层玻璃纤维膜，位于顶层所述玻璃纤维膜的上表面设置有样品垫；
[0006]多层所述玻璃纤维膜的一端和所述样品垫的一端自下而上向外搭接错层排布并形成台阶状；多层所述玻璃纤维膜分别上涂覆有胶体金颗粒标记抗黄曲霉毒素B1的单克隆抗体、胶体金颗粒标记抗玉米赤霉烯酮的单克隆抗体和胶体金颗粒标记抗呕吐毒素的单克隆抗体；
[0007]所述包被膜的上表面设有质控线和多条检测线；所述质控线和多条所述检测线平行设置；多条所述检测线上分别包被有黄曲霉毒素B1-BSA偶联物、玉米赤霉烯酮-BSA偶联物和呕吐毒素-BSA偶联物；
所述质控线上包被有抗鼠抗体。
[0008]基于上述，所述的胶体金试纸条，它包括三层所述玻璃纤维膜，位于顶层的所述玻璃纤维膜上涂覆有胶体金颗粒标记抗呕吐毒素的单克隆抗体；位于中间层的所述玻璃纤维膜上涂覆有胶体金颗粒标记抗玉米赤霉烯酮的单克隆抗体；位于底层的所述玻璃纤维膜上涂覆有胶体金颗粒标记抗黄曲霉毒素B1的单克隆抗体。
[0009]基于上述，所述的胶体金试纸条包括三条所述检测线和一条所述质控线，三条所述检测线和一条所述质控线平行设置在位于所述玻璃纤维膜和所述吸水纸之间的所述包被膜上，位于中间的所述检测线上包被有玉米赤霉烯酮-BSA偶联物，与所述质控线相邻的所述检测线上包被有呕吐毒素-BSA偶联物，与底层所述玻璃纤维膜相邻的所述检测线上包被有黄曲霉毒素B1-BSA偶联物。
[0010]基于上述，所述包被膜为硝酸纤维素膜。
[0011]基于上述，所述包被膜的长度小于所述PVC底板的长度。
[0012]基于上述，所述吸水纸的外端与所述PVC底板的一端相平齐，所述样品垫的外端与所述PVC底板的另一端相平齐。
[0013]需要说明的是，本实用新型提供的胶体金试纸条具体检测原理如下：
[0014]当样品中仅含有任意一种待检物质时，该待检物质与相对应的金标记单克隆抗体发生反应，结合形成抗原抗体免疫复合物，从而抑制了对应检测线上的偶联物与金标记单克隆抗体的结合，该检测线上不显，其余两种检测线上的偶联物与对应的金标记单克隆抗体发生反应形成红带，检测结果为对应物质阳性。
[0015]当样品中含有任意两种待检物质时，该待检物质分别与相对应的金标记单克隆抗体发生反应，结合形成抗原抗体免疫复合物，从而分别抑制了对应检测线上的偶联物与对应的金标记单克隆抗体的结合，对应的两种检测线上不显，其余一种检测线上的偶联物与对应的金标记单克隆抗体发生反应形成红带，检测结果为两种物质阳性。
[0016]与现有技术相比，本实用新型具有实质性特点和进步，具体地说，本实用新型提供的胶体金试纸条结构简单，采用竞争性免疫层析法的原理，通过对金标记抗体pH、浓度以及包被膜上包被抗原浓度的调整，使其能够产生特异条带。同时，在对一份样品进行检测时，能同时检测出该样品是否含有黄曲霉毒素B1和/或玉米赤霉烯酮和/或呕吐毒素，其具有特异性好、灵敏度高、检测速度快等优点，且不需要使用仪器设备，操作简单，能广泛地用于农户、基层以及个人对于待检样品中黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和呕吐毒素的检测。
附图说明
[0017]图1为本实用新型提供的胶体金试纸条侧面结构示意图。
[0018]图2为本实用新型提供的胶体金试纸条俯视图。
[0019]图3为黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和呕吐毒素均阳性的胶体金试纸条显示意图（即包被膜2表面的质控线11显而检测线I 8、检测线II 9和检测线III 10均不显）。[0020]图4为黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮阳性，呕吐毒素阴性的胶体金试纸条显示意图（即包被膜2表面的检测线III 10和质控线11显而检测线I 8和检测线II 9不显）。[0021]图5为黄曲霉毒素B1和呕吐毒素阳性，玉米赤霉烯酮阴性的胶体金试纸条显示意图（即包被膜2表面的检测线II 9和质控线11显而检测线I 8和检测线III 10不显）。[0022]图6为玉米赤霉烯酮和呕吐毒素阳性，黄曲霉毒素B1阴性的胶体金试纸条显示意图（即包被膜2表面的检测线I 8和质控线11显而检测线II 9和检测线III 10不显）。[0023]图7为黄曲霉毒素B1阳性，玉米赤霉烯酮和呕吐毒素阴性的胶体金试纸条显示意图（即包被膜2表面的检测线II 9、检测线III 10和质控线11显而检测线I 8不显）。[0024]图8为玉米赤霉烯酮阳性，黄曲霉毒素B1和呕吐毒素阴性的胶体金试纸条显示意图（即包被膜2表面的检测线I 8、检测线III 10和质控线11显而检测线II 9不显）。[0025]图9为呕吐毒素阳性，黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮阴性的胶体金试纸条显示意图（即包被膜2表面的检测线I 8、检测线II 9和质控线11显而检测线III 10不显）。[0026]图10为本检测结果均为阴性的胶体金试纸条显示意图（即包被膜2表面的检测线I 8、检测线II 9、检测线III 10和质控线11均显）。
[0027]图11为胶体金试纸条检测结果无效的示意图（即包被膜2表面的检测线I 8、检测
线II 9、检测线III 10和质控线11均不显）。
[0028]图中：1：PVC底板；2：包被膜；3：玻璃纤维膜I；4：玻璃纤维膜II；5：玻璃纤维膜III；6：为样品垫；7：吸水纸； 8：检测线I；9：检测线II；10：检测线III；11：质控线。
具体实施方式
[0029]实施例1
[0030]本实施例提供一种胶体金试纸条，如图1和2所示，该试纸条包括PVC底板1、样品垫6、玻璃纤维膜I 3、玻璃纤维膜II 4、玻璃纤维膜III 5、包被膜2和吸水纸7。
[0031]其中，所述包被膜2的底面粘贴在所述PVC底板1的上表面，所述包被膜上表面的另一端自下而上依次设置有玻璃纤维膜I 3、玻璃纤维膜II 4和玻璃纤维膜III 5，所述玻璃纤维膜III 5的上表面设置有所述样品垫6。
[0032]所述玻璃纤维膜I 3的一端、所述玻璃纤维膜II 4的一端、所述玻璃纤维膜III 5的一端与所述样品垫的一端自下而上向外搭接错层排布并形成台阶状。
[0033]其中，所述玻璃纤维膜I 3上涂覆有胶体金颗粒标记抗黄曲霉毒素B1的单克隆抗体。
[0034]所述玻璃纤维膜II 4上涂覆有胶体金颗粒标记抗玉米赤霉烯酮的单克隆抗体。[0035]所述玻璃纤维膜III 5上涂覆有胶体金颗粒标记抗呕吐毒素的单克隆抗体。[0036]在所述玻璃纤维膜I 3和所述吸水纸7之间的包被膜2的上面设有检测线I 8、检测线II 9、检测线III 10和质控线11。
[0037]优选地，包被膜2为硝酸纤维素膜。
[0038]需要说明的是：
[0039]所述检测线I 8上包被黄曲霉毒素B1-BSA偶联物。
[0040]所述检测线II 9上包被玉米赤霉烯酮-BSA偶联物。
[0041]所述检测线III 10上包被呕吐毒素-BSA偶联物。
[0042]所述质控线11上包被抗鼠抗体。
[0043]黄曲霉毒素B1-BSA偶联物、玉米赤霉烯酮-BSA偶联物、呕吐毒素-BSA偶联物及抗鼠抗体分别固定于所述包被膜2上并呈四条线平行排列，形成所述的检测线I 8、检测线II 9、检测线III 10和质控线11。通过检测线I 8、检测线II 9、检测线III 10和质控线11的显来进行定性。
[0044]本实用新型所述试纸条采用四条带显的胶体金层析法制备，显带颜为红线条，具体制备工艺如下：
[0045]（1）胶体金溶液的制备：
[0046]将双蒸水置磁力搅拌器上搅拌加热至沸腾，按终浓度为万分之一的量迅速加入质量浓度为10%的氯金酸溶液，煮沸5分钟；再按所加入氯金酸溶液2.0倍的体积量加入质量浓度为12%的柠檬酸三钠溶液，煮沸5分钟后，冷却至室温，用双蒸水定容至氯金酸终浓度为万分之一，常温避光保存备用。
[0047]（2）金标抗体玻璃纤维膜I 3的制备：
[0048]用5mol/L碳酸钾调节胶体金溶液pH值至8.0，按12µg抗体/毫升胶体金溶液的比例浓度加入抗黄曲霉毒素B1的单克隆抗体，混匀，静置5分钟；再按1%体积量加入浓度为10%的
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