姓名：王静
班级：生研1004班
学号：2010001206
摘要 综述了苦丁茶中黄酮的提取方法（乙醇提取法，超声波提取法，微波提取法），纯化方法（大孔树脂吸附法）。
Abstract Extraction methods for flavonoids (solvent method with ethanol , microwave method, ultrasonic extraction method) were summarized, as well as isolation-purification method for flavonoids(macroporous resin adsorption method)
Key words Kudingcha;Flavonoids; Extraction;Purification
1前沿
苦丁茶是冬青科冬青属苦丁茶种常绿乔木，俗称茶丁、富丁茶、皋卢茶，主要分布在广东、福建等地，是我国一种传统的纯天然保健饮料佳品。苦丁茶中含有苦丁皂甙、氨基酸、维生素C、多酚类、黄酮类、、蛋白质等200多种成分。其所含主要生理活性物质为黄酮类化合物。黄酮类化合物具有抗氧化、消炎、改变体内酶活性、改善微循环、解痉、抑菌、抗肝炎病毒、抗肿瘤等多种生理保健作用。因此，苦丁茶作为一种极具开发潜力的天然产物资源而倍受人们的关注[1] 。本文对提取苦丁茶中黄酮的方法进行了综述。
2苦丁茶中黄酮的提取方法
2.1乙醇提取法
乙醇为有机溶剂,溶解性能比较好,对中草药细胞的穿透能力较强，虽易燃，但毒性小，价廉，来源方便，有一定设备即可回收反复使用，而且乙醇的提取液不易发霉变质。由于上述原因，乙醇提取是最常用的方法之一。甲醇的性质和乙醇相似，沸点较低(64 ℃) ，但有毒性，使用时应注意[2]。李建法[3]等人采用不同乙醇浓度进行提取，得出当乙醇溶液的浓度为70%~80%时，提取效果较好；罗伟强[4]等人研究了苦丁茶叶中黄酮类化合物的提取
条件，并通过正交实验确定了最佳提取工艺条件为用6倍量的70％乙醇溶液加热提取3次，每次提取时间为40 min，提取温度为70 ℃ ，总黄酮提取率为2.640％ ；毛丽娟[5]等人根据已有的资料介绍及实际情况，确定以乙醇浓度、浸提时间、乙醇用量和浸提温度四种因素进行正交试验设计，最佳工艺为乙醇浓度为70%，乙醇体积为10倍于苦丁茶质量，浸提时间为4 h，提取温度为70-75 ℃,得到的总黄酮含量最高；何翔[6]等人考虑到乙醇浓度过高，不太适合对苦丁茶中亲水性黄酮成分的提取，采用了50%乙醇和95%乙醇各回流提取一次作为苦丁茶总黄酮的提取方法，提取效果较好。
2.2超声波提取法
用超声波提取法提取黄酮类物质，是目前比较新的方法。原理是利用超声波在液体中的空化作用加速植物有效成分的浸出提取，另外，还利用其次效应，如机械振动、扩散、击碎等，使其加速被提取成分的扩散、释放。超声波提取法具有设备简单，操作方便，提取时间短，产率高，无需加热，同时有利于保护热不稳定成分，省时，节能，提取率高的优点[7]。李建法[3]等人在苦丁茶黄酮类化合物的提取与分析实验研究中发现，超声振荡可以显著提高黄酮类化合物的溶出速度，同样分3次提取，普通溶剂提取每次需要60 min，而超声
提取只需要20 min 就可以得到相近的提取率。另外，超声振荡辅助提取可以显著降低提取温度，普通溶剂提取需要在回流温度（80 ℃左右）下进行，而超声振荡只需要在40 ℃下就可以得到较好的提取效果。因此，采用超声振荡辅助提取有利于苦丁茶叶中某些对温度敏感的活性成分的保持。潘慧娟[8]等人用甲醇作提取剂，超声提取1.5 h的效果好。
2.3微波提取法
微波提取是利用不同结构的物质在微波场中吸收微波能力的差异，使基体物质中的某些区域或提取体系中的某些组分被选择性加热，从而使被提取物质从基体或体系中分离，进入介电常数较小，微波吸收能力相对差的提取剂。这种方法的优点是对提取物具有较高的选择性、提取率高、提取速度快、溶剂用量少、安全、节能、设备简单[6]。微波辅助提取法用于提取苦丁茶中黄酮类化合物既省时、高效又利于产物分离，是一种适合苦丁茶黄酮提取的新方法。冉旭[1]等人研究了苦丁茶中总黄酮的微波辅助提取工艺通过正交试验，研究发现影响苦丁茶中总黄酮得率的主要因素有微波功率、微波加热时间、液固比、乙醇浓度、提取次数。该试验结果表明，微波辅助提取苦丁茶总黄酮的最佳提取工艺条件为：微波功率法源清真寺440 W，微波加热提取时间5 min石达开之死，液固比30：1，乙醇浓度65％，提取次数2次。
在最佳提取工艺条件下，苦丁茶黄酮得率为2．289％。吴耀辉[9]等人研究苦丁茶中黄酮类化合物的微波萃取技术，提高提取率。通过单因素实验和正交实验研究了微波法萃取苦丁茶中黄酮类化合物的影响因素及最佳提取条件。微波法提取苦丁茶中黄酮类化合物的影响因素顺序为：溶剂浓度> 提取温度> 料液比> 提取时间，微波法的最佳提取条件是:溶剂为80 %乙醇，料液比1∶20，微波萃取5 min ，提取温度为80 ℃。验证实验结果表明：微波法提取黄酮的平均含量为34. 8 mg/ g，相对标准偏差RSD = 0. 878 %( n = 3) 。对比实验结果表明：微波法的提取率是常规浸提法的1. 49 倍。微波法提取苦丁茶中黄酮类化合物的工艺稳定可行，与常规浸提法相比有明显优势。
3苦丁茶中黄酮的纯化方法
大孔吸附树脂具有吸附快、吸附容量大、吸附选择性好、解吸条件温和、洗脱率高、物化稳定性高、不受无机物存在的影响、再生简单、使用周期长、易于构成闭路循环、节省费用等优点, 适宜工业化生产。大孔吸附树脂为吸附和筛选相结合的分离材料，在确定分离条件时，首先根据被分离化合物分子体积的大小选用适当的树脂孔径，其次要根据分子中是否含有酚羟基、羧基或碱性氮原子来确定树脂的型号和分离条件。毛莉娟[5]等人通过正交
襄樊电影
试验，采用ADS-17树脂，研究了硅藻土用量为2.0 g，洗脱乙醇浓度为90% ，洗脱乙醇体积为250 ml时，黄酮的精制效果最好。刘志祥，曾超珍[11]通过测定7种大孔树脂对苦丁茶总黄酮的吸附特征，确定HP-20为最佳的吸附剂，它不仅具有吸附快、解吸率高等特点，而且具有吸附容量较大，洗脱率高，树脂再生简单等优点，在苦丁茶富集总黄酮工艺中具有一定的应用价值。采用HP-20大孔树脂进行苦丁茶总黄酮分离纯化5 h，收集精制液，60℃下旋转蒸发，浓缩液在60 ℃下真空干燥，测定经树脂纯化后中黄酮纯度达到42．8％(粗提物中黄酮纯度为8．28％)。
4结论及展望
乙醇提取苦丁茶中的黄酮类化合物，是一种常用的提取方法，研究的也比较透彻。微波提取和超声波提取是两种新方法，较乙醇提取，提取速度快，溶剂量少，提取率高，温度较低且能保护黄酮类化合物中的热敏成分。
在相关文献中，报道的黄酮类化合物的提取方法，除了上述方法外还有碱性水或碱性烯醇提取，酶提取法，半仿生提取法，双水相提取法等，我们也可以尝试用这些方法来提取苦丁茶中的黄酮，或者把几种方法结合起来进行提取。
在苦丁茶中黄酮的纯化方法中，介绍了大孔吸附树脂纯化法，这也是一种应用的比较多的纯化方法，黄酮类化合物的纯化方法还有柱层析法，纸层析法，超临界流体萃取法等，运用这些方法已分离出了不同的黄酮化合物。
黄酮类化合物普遍存在于多种植物中，因其具有多种药理活性及保健功能，这几年对其的提取方法，含量测定，纯化方法，结构分析，药理活性的研究已经成为热点，研究者还从银杏、化无梗五加果、野菊花等植物中提取出黄酮。苦丁茶中黄酮的提取和纯化方法总的来说还是比较少，还需进一步完善。
参考文献
[1]冉旭,刘学文,王文贤,陈畅.苦丁茶中总黄酮的微波辅助提取工艺研究[J].安徽农业科学,2008,36(21):9133-9134
[2]王鑫.黄酮类化合物提取方法的应用[J].天津药学,2007,19(5):61-66
[3]李建法,胡六江,吕金红,唐晶晶,苦丁茶黄酮类化合物的提取与分析[J].浙江林业科技，2005,25(1):31-33
[4]罗伟强,黄润均,李小梅,黄增尉,白丽娟.苦丁茶叶中黄酮类化合物提取条件研究[J].应用化工,2003,32():24-25
[5]毛莉娟,刘学文,冉旭.苦丁茶中黄酮的提取工艺[J].食品科技,2002,11
菲律宾国旗[6]何翔,黄荣增,范彦博,余尚工,方念伯.苦丁茶总黄酮不同提取方法的比较[J].湖北中医杂志,2010,32(4):74-75
[7]钱俊臻.黄酮类化合物提取方法的研究进展.化工文摘,2008,6
[8]潘慧娟,应奇才.苦丁茶中黄酮类化合物的提取、鉴定和含量分析.杭州医学高等专科学校学报,2003,24(2)
[9]吴耀辉, 曾超珍, 刘志祥.微波提取苦丁茶中的黄酮类物质的研究[J].地质剖面图安徽农业科学, 2007 ,35(30) :9706 - 9707 ,9713 注册资金
[10]郭雪峰,岳永德.黄酮类化合物的提取·分离纯化和含量测定方法的研究进展[J].安徽农业科学 , 2007, 35(26) : 8083-8086
[11]刘志祥,曾超珍.大孔树脂法纯化苦丁茶总黄酮的研究[J].时珍国医国药2009,20(9):2183-2184
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
关于我们
投诉建议