一种对玉米浆中黄曲霉毒素的生物降解方法[发明专利]

(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910310426.X
(22)申请日 2019.04.17
(71)申请人 海南泓缘生物科技股份有限公司
地址 570100 海南省海口市保税区七号厂
房思迈药业二楼203房
(72)发明人 张玉国 张楠楠 
(74)专利代理机构 成都熠邦鼎立专利代理有限
公司 51263
代理人 张晨光
(51)Int.Cl.
A23L  5/20(2016.01)
A23L  5/30(2016.01)
A23B  9/08(2006.01)
A23L  7/10(2016.01)
(54)发明名称一种对玉米浆中黄曲霉毒素的生物降解方法(57)摘要本发明涉及生物降解技术领域,且公开了一种对玉米浆中黄曲霉毒素的生物降解方法,包括以下步骤:在天气晴朗的天气采收玉米,选择无污染、无霉烂的新鲜玉米为原料,使用脱粒机将玉米粒和梗分离;使用紫外线灯和小太阳灯管对玉米粒进行照射,去除玉米粒内部水分,紫外线的辐射照度为80~300W/m ³,小太阳灯管发出的光波功率为4000~7500W/m ³。本发明通过紫外线降解玉米粒表面的黄曲霉毒素,通过小太阳灯管发出的光波增强紫外线的对黄曲霉毒素的降解作用,枯草芽孢杆菌对黄曲霉毒素的进行酶促降解,利用生物学方法降解玉米浆中的黄曲霉毒素,具备高效、温和、无毒安全的特点,由表及里地让玉米浆中的黄曲霉毒素降解去除,从而彻底
除去玉米浆中的黄曲霉毒素。权利要求书1页  说明书5页CN 111820364 A 2020.10.27
C N  111820364
A
1.一种对玉米浆中黄曲霉毒素的生物降解方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一:紫外线降解
1)在天气晴朗的天气采收玉米,选择无污染、无霉烂的新鲜玉米为原料,
使用脱粒机将玉米粒和梗分离;
2)使用紫外线灯和小太阳灯管对玉米粒进行照射,去除玉米粒内部水分,紫外线的辐射照度为80~300W/m ³,小太阳灯管发出的光波功率为4000~7500W/m ³;
步骤二:玉米浆制作
1)使用清水将玉米粒清洗干净,然后将玉米粒在水盆中浸泡5~10个小时;
2)将浸泡后的玉米粒从水盆中捞出,然后将玉米粒添加至搅拌机中,同时向搅拌机加入清水,搅拌机将玉米粒打成玉米浆;
3)使用过滤网将打好的玉米浆进行过滤;
步骤三:枯草芽孢杆菌的培养方法
1)对枯草芽孢杆菌进行发酵培养;培养基由如下组分组成:胰蛋白胨10g,酵母浸膏2g,葡萄糖20g,牛肉膏3g,氯化钠4g,磷酸氢二钠3g,七水硫酸镁1.0g,硫酸锰1.0g,蒸馏水1000mL,pH值为7.2;摇瓶发酵的条件为:发酵温度为30-40℃,发酵时间20-30h,pH值7.0-
7.4,转速180-220r/min;
2)发酵结束后,离心除菌体,用萃取剂提取上清液中的活性蛋白,在0℃沉淀1-24小时,然后5000r/min离心10min得到蛋白沉淀,其中,所用萃取剂为95%甲醇、95%乙醇、40%硫酸铵溶液、60%硫酸铵溶液或80%硫酸铵溶液;优选用乙醇在0℃沉淀1小时;
3)将得到的蛋白沉淀溶于PBS缓冲液,冻干浓缩即得活性;
步骤四:生物降解方法
取枯草芽孢杆菌的发酵液或活性蛋白的PBS溶液(PBS溶液浓度为0.01mol/L ),将活性蛋白溶于玉米浆溶液中得到浓度为0.01g/ml的活性蛋白PBS溶液)600-900μl,将反应体系调整至pH值为6.5-7.5,在30-40℃反应48-72h后即可去除玉米浆溶液中的黄曲霉毒素。
权 利 要 求 书1/1页CN 111820364 A
一种对玉米浆中黄曲霉毒素的生物降解方法
技术领域
[0001]本发明涉及生物降解技术领域,具体为一种对玉米浆中黄曲霉毒素的生物降解方法。
背景技术
[0002]黄曲霉毒素是一类主要由黄曲霉和寄生曲霉真菌产生的次级代谢产物,是至今为止发现的毒性最大的真菌毒素。它可通过多种途径污染食品和饲料,直接或间接进入人类食物链,威胁人类健康和生命安全,对人体及动物内脏器官损害严重。美国疾病控制和预防中心估计在发展中国家有45亿人通过饮食慢性暴露黄曲霉毒素。根据一项分析,每年黄曲霉毒素慢性暴露导致25200到155000例肝癌,尤其在亚洲和撒哈拉以南的非洲地区。据粗略估计,全世界每年平均至少有约2%的粮食因为污染霉菌,发生霉变而不能食用和饲用,有25%谷物受到霉菌毒素污染。黄曲霉毒素的强毒性、强致癌性、强致突变性严重威胁动物的生产性能和人类的健康,每年给食品工业、饲料工业和畜牧业造成巨大的经济损失。[0003]我国是世界上种植玉米较多的国家之一,每年都不同程度地受到黄曲霉毒素污染的影响,玉米在制作成玉米浆进行食用中,玉米浆中的黄曲霉毒素会影响人们的身体健康,目前有关采用紫外线控制黄曲霉毒素的报道,利用紫外线照射使黄曲霉毒素分解去除,但紫外线的杀菌范围只限于紫外线所能照射的部分,对玉米的内部不能杀菌,并且紫外灯的紫外线辐射强度是逐渐减弱的,因此,单纯的采用紫外线照射不能彻底除去玉米中的黄曲霉毒素。
发明内容
[0004](一)解决的技术问题
针对现有技术的不足,本发明提供了一种对玉米浆中黄曲霉毒素的生物降解方法,具备高效、温和、无毒安全的特点,采用紫外线、光波和枯草芽孢杆菌的联合作用处理,彻底除去玉米浆中的黄曲霉毒素。
[0005](二)技术方案
为实现上述安装方便和防水性好目的,本发明提供如下技术方案:一种对玉米浆中黄曲霉毒素的生物降解方法,包括以下步骤:
步骤一:紫外线降解
1)在天气晴朗的天气采收玉米,选择无污染、无霉烂的新鲜玉米为原料,
使用脱粒机将玉米粒和梗分离;
2)使用紫外线灯和小太阳灯管对玉米粒进行照射,去除玉米粒内部水分,紫外线的辐射照度为80~300W/m³,小太阳灯管发出的光波功率为4000~7500W/m³。
[0006]步骤二:玉米浆制作
1)使用清水将玉米粒清洗干净,然后将玉米粒在水盆中浸泡5~10个小时;
2)将浸泡后的玉米粒从水盆中捞出,然后将玉米粒添加至搅拌机中,同时向搅拌机加
入清水,搅拌机将玉米粒打成玉米浆;
3)使用过滤网将打好的玉米浆进行过滤。
[0007]步骤三:枯草芽孢杆菌的培养方法
1)对枯草芽孢杆菌进行发酵培养;培养基由如下组分组成:胰蛋白胨10g,酵母浸膏2g,葡萄糖20g,牛肉膏3g,氯化钠4g,磷酸氢二钠3g,七水硫酸镁1.0g,硫酸锰1.0g,蒸馏水1000mL,pH值为7.2;摇瓶发酵的条件为:发酵温度为30-40℃,发酵时间20-30h,pH值7.0-7.4,转速180-220r/min。
[0008]2)发酵结束后,离心除菌体,用萃取剂提取上清液中的活性蛋白,在0℃沉淀1-24小时,然后5000r/min离心10min得到蛋白沉淀,其中,所用萃取剂为95%甲醇、95%乙醇、40%硫酸铵溶液、60%硫酸铵溶液或80%硫酸铵溶液;优选用乙醇在0℃沉淀1小时;
3)将得到的蛋白沉淀溶于PBS缓冲液,冻干浓缩即得活性。
[0009]步骤四:生物降解方法
取枯草芽孢杆菌的发酵液或活性蛋白的PBS溶液(PBS溶液浓度为0.01mol/L),将活性蛋白溶于玉米浆溶液中得到浓度为0.01g/ml的活性蛋白PBS溶液)600-900μl,将反应体系调整至pH值为6.5-7.5,在30-40℃反应48-72h后即可去除玉米浆溶液中的黄曲霉毒素。[0010](三)有益效果
与现有技术相比,本发明提供了一种对玉米浆中黄曲霉毒素的生物降解方法,具备以下有益效果:
该对玉米浆中黄曲霉毒素的生物降解方法,通过紫外线灯和小太阳灯管对玉米粒进行照射,加快玉米粒内部水分的蒸发,使得玉米粒快速的干燥,防止玉米粒发生霉变,同时通过紫外线降解玉米粒表面的黄曲霉毒素,通过小太阳灯管发出的光波增强紫外线的对黄曲霉毒素的降解作用,在对玉米浆加热的过程中,添加的枯草芽孢杆菌对黄曲霉毒素的进行酶促降解,利用生物学方法降解玉米浆中的黄曲霉毒素,具备高效、温和、无毒安全的特点,由表及里地让玉米浆中的黄曲霉毒素降解去除,从而彻底除去玉米浆中的黄曲霉毒素。
具体实施方式
[0011]下面将结合本发明的实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
[0012]实施例一
一种对玉米浆中黄曲霉毒素的生物降解方法,包括以下步骤:
步骤一:紫外线降解
1)在天气晴朗的天气采收玉米,选择无污染、无霉烂的新鲜玉米为原料,
使用脱粒机将玉米粒和梗分离;
2)使用紫外线灯和小太阳灯管对玉米粒进行照射,去除玉米粒内部水分,紫外线的辐射照度为80~300W/m³,小太阳灯管发出的光波功率为4000~7500W/m³。
[0013]步骤二:玉米浆制作
1)使用清水将玉米粒清洗干净,然后将玉米粒在水盆中浸泡5~10个小时;
2)将浸泡后的玉米粒从水盆中捞出,然后将玉米粒添加至搅拌机中,同时向搅拌机加入清水,搅拌机将玉米粒打成玉米浆;
3)使用过滤网将打好的玉米浆进行过滤。
[0014]通过紫外线灯和小太阳灯管对玉米粒进行照射,加快玉米粒内部水分的蒸发,使得玉米粒快速的干燥,防止玉米粒发生霉变,同时通过紫外线降解玉米粒表面的黄曲霉毒素,通过小太阳灯管发出的光波增强紫外线的对黄曲霉毒素的降解作用
实施例二
一种对玉米浆中黄曲霉毒素的生物降解方法,包括以下步骤:
步骤一:玉米浆制作
1)在天气晴朗的天气采收玉米,选择无污染、无霉烂的新鲜玉米为原料,
使用脱粒机将玉米粒和梗分离;
2)使用清水将玉米粒清洗干净,然后将玉米粒在水盆中浸泡5~10个小时;
3)将浸泡后的玉米粒从水盆中捞出,然后将玉米粒添加至搅拌机中,同时向搅拌机加入清水,搅拌机将玉米粒打成玉米浆;
4)使用过滤网将打好的玉米浆进行过滤。
[0015]步步骤二:枯草芽孢杆菌的培养方法
1)对枯草芽孢杆菌进行发酵培养;培养基由如下组分组成:胰蛋白胨10g,酵母浸膏2g,葡萄糖20g,牛肉膏3g,氯化钠4g,磷酸氢二钠3g,七水硫酸镁1.0g,硫酸锰1.0g,蒸馏水1000mL,pH值为7.2;摇瓶发酵的条件为:发酵温度为30-40℃,发酵时间20-30h,pH值7.0-7.4,转速180-220r/min。
[0016]2)发酵结束后,离心除菌体,用萃取剂提取上清液中的活性蛋白,在0℃沉淀1-24小时,然后50
00r/min离心10min得到蛋白沉淀,其中,所用萃取剂为95%甲醇、95%乙醇、40%硫酸铵溶液、60%硫酸铵溶液或80%硫酸铵溶液;优选用乙醇在0℃沉淀1小时;
3)将得到的蛋白沉淀溶于PBS缓冲液,冻干浓缩即得活性。
[0017]步骤三:生物降解方法
取枯草芽孢杆菌的发酵液或活性蛋白的PBS溶液(PBS溶液浓度为0.01mol/L),将活性蛋白溶于玉米浆溶液中得到浓度为0.01g/ml的活性蛋白PBS溶液)600-900μl,将反应体系调整至pH值为6.5-7.5,在30-40℃反应48-72h后即可去除玉米浆溶液中的黄曲霉毒素。[0018]枯草芽孢杆菌降解黄曲霉毒素的效率高,特异性强,对黄曲霉毒素的降解率较高,作用效果温和,不会破坏玉米浆中的营养成分。
[0019]实施例三
一种对玉米浆中黄曲霉毒素的生物降解方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一:紫外线降解
1)在天气晴朗的天气采收玉米,选择无污染、无霉烂的新鲜玉米为原料,
使用脱粒机将玉米粒和梗分离;
2)使用紫外线灯和小太阳灯管对玉米粒进行照射,去除玉米粒内部水分,紫外线的辐射照度为80~300W/m³,小太阳灯管发出的光波功率为4000~7500W/m³。
[0020]步骤二:玉米浆制作
1)使用清水将玉米粒清洗干净,然后将玉米粒在水盆中浸泡5~10个小时;

本文发布于:2024-09-20 12:33:37,感谢您对本站的认可!

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