基因位点定点插入基因条件性过表达模型构建方法

(19)中华人民共和国国家知识产权局

	(12)发明专利说明书
		(10)申请公布号 CN 113493807 A (43)申请公布日 2021.10.12

(21)申请号 CN202110693413.2

(22)申请日 2021.06.22

(71)申请人青岛大学

地址 266071 山东省青岛市市南区宁夏路308号青岛大学

(72)发明人王斌王志飞张现娟王雅硕王韵阳

(74)专利代理机构 11678 北京云嘉湃富知识产权代理有限公司

代理人卞永如

(51)Int.CI

C12N15/90(20060101)

A01K67/027(20060101)

C12N15/12(20060101)

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

基因位点定点插入基因条件性过表达模型构建方法

(57)摘要

本发明属于动物模型构建技术领域，公开了一种基因位点定点插入基因条件性过表达模型(Rosa26‑LSL‑IE2)构建方法，通过体外转录的方式，获得Cas9mRNA和gRNA；通过In‑Fusion cloning的方法构建同源重组载体donor vector；将Cas9mRNA、gRNA和donor vector显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中，获得F0代小鼠；PCR扩增及测序鉴定阳性的F0代小鼠与C57BL/6J小鼠交配获得阳性F1代小鼠。本发明IE2转基因鼠的建模成功克服种属特异性，构建了能稳定持续表达ie2的机体环境。

法律状态

法律状态公告日	法律状态信息	法律状态
2021-12-10	专利申请权的转移	专利申请权的转移
2021-10-12	公开	公开
2022-02-08	实质审查的生效IPC(主分类):C12N15/90专利申请号:2021106934132申请日:20210622	实质审查的生效