超声检测技术在鱼类人工繁殖的应用价值分析

超声检测在鱼类人工繁殖的
应用价值分析
荣静v,孟瑾v,宇2
(1.信阳农林学院水产学院,河南信阳464000;  2.河业生物工程技术研究中心,河南信阳464000)
摘要:本文旨在探究超声检测技术在鱼类人工繁殖的应用价值。选取黄颖鱼、黄鳍、斑点叉尾鯛、泥鍬、施氏"和南方大口#6种无鱼,,分对其性腺发育不卵径进行横向和纵向比较$:6种鱼类的卵径的超量卵子发育&在卵熟期内,可过卵径及卵子在影像中是否具有游动性这2项指标来判断是否具有件,其合率达98.90%以上。表明对于无鳞鱼或鱼类应卵巢发育,其分率和诊断符合率比,可为殖诊断卵子发育情况的首选方法,具有重要的应$关键词:;殖;黄鱼;黄;尾;泥鍬;";大#
中图分类号:S961.2文献标志码:A文章编号:0529—6005(2021)01—0083—04
Analysis of the Application Value of Ultrasonic Detection
Technology in ArhOcial Propagation of Fish
HUANG Rong-jing1,2,MENG Jin1,2,LEI Yu-jie1,2
(1.Colleae of Fisheries,Xinyang Agricultura and Forestry University,Xinyang464000,China;
2.Modern Fishei Biologicct Engineering Technology Research C6111x0of Henan,Xinyang464000,China)
Abstract:In order to explore tUe application velue of ultrasonic detection technology in artificial propaaation of fish.Six non­phosphorus parent UH,$elteobagrus julvidraco,Monopterus albus,Ictalurus punctatus,Oriental weatherfish,Acipenser schrencki and Si-lurus sMatov-eneOdiooal-s Cheo were selected,and theic e/g diameters ai different staaes of gonad developmeni were compared in transverse and longitudinal directions.The results showed that there was a positive correlation between the measured value of the e/g dcameeeiand ehedeveoopmeneofeheeggcn ecaepecceeoffceh.Ln ehemaeuiepeicod ofeheovaiy,eheuoeiaeonccdeeececon couod iudge whether the condition of induced labor by detecting the e/g diameter and the e/g had the mobiUth in the imaae.The coincidencc rate of the ultrasonic detection was over98.90%.Ultrasound used te detect overian development in sccleless fish oe rare fish with high resolution and high diagnostic accuracy.It could be used as the first choicc of artificiat reproduction te diagnose e/g development,and had important clinicat application value.
Key words:ultrasonic detection;artificiat propagation;Pelteobagrus fulviPraco;Mooopterus albus;Ictalurus punctatus;Ori­ental weathejfish;Acipenser sckreoc0i;Silurus soldatovi eneriPionalis Cher
Correstonding author:LEI Yu-jie,E-mail:******************
超声检测技术在水产养殖中主要应用在"鱼、大%和#科鱼类等无鳞鱼,多于及:病探查,多普断技术在还需要更多基础以便更好的发展应用。本文选用黄颖鱼($elteobagrue UHPraco)、黄鳍(MonopPms al­bus)、斑点叉尾鮑(Ictalurus punctatus)、泥鍬(Oriee-
收稿日期:2020—03—10
基金项目:河南省科技攻关项目(182102110459)&信阳农林学院科技创新团队建设项目(CXTD-201803)
:黄荣静(1982-),女,讲师,,从事鱼类学研究,E-mait:happyhe@163
通信作者:雷宇杰,E-mail:leiyujiexm@163 tal weatheifish)、施氏"(Acipenser schrencki)和南方大口#(SPurus soldatovi sneridionalis Chee)共6种水动物作为对象,这6种动物都是大宗特,属于无鳞鱼("有骨板),合
件,可以探讨的适用性;本试还通过探查6种动物在殖前不中卵径大小,比殖时卵子发育的合率,为技在动物殖
中的应用提供参考。
1材料与方法
1.1试验鱼及管理试验所用试验鱼为雌性亲鱼,
其中施氏"、斑点叉尾鯛和泥鍬亲鱼来源于正阳县汇 龙水产有限公司;黄鳍和南方大口聽亲鱼来源于罗山
县小龙山良种繁育场;黄颖鱼亲鱼来源于黄石富尔水
表1试验用亲鱼生物学指标
Table  1 Biologicaf  indexes  of  parant  fish  for  experiment
鱼种
检测数量
雌鱼年龄
体长/cm
体重头
Fish  species
Numbeaoetests
Ageoeeemaeeeish
Bodyeength
Bodyweiht
黄颖鱼 Pelteobagnus  fbHoco
103
21- 8 ±0.336. 8 ±0.5
黄鳍 Monopterus  albus
10
239. 4 ±1.2
103. 7 ±1.7
斑点叉尾飆 Ictalurus  punctatus
8
4
47- 5 ±1.4
2 856.6 ±13.4
泥! Oriental  weat,aerfisP
10329- 8 ±0.6
57. 5 ±0.7
施氏"Acipenser  rchrencOi
4
12
156. 6 ±2.625 000.8 ±34.2
南方大口 # Silurus  sollatovi  mePdPnabs  Chee
54
52. 7 ±1.3
3 172.5 ±14.6
1.2主要仪器设备及工具 超声诊断仪(意大利
ESAOTE  S. P  A );鱼用超声诊断床(自制工具,授权
专利号为:ZL201621217228.7)。医用超声耦合剂 (天津市西苑寺制作所);催产药物:垂体(PG )、绒
毛膜促性腺激素(HCG )、促黄体素释放激素
(LRHA )等。
1-3超声操作方法根据鱼种卵巢发育和成熟时
期的不同,每种水生动物的采样时间并不一致,测 量卵径的时间主要集中于3~8月份。将鱼用担架
放在鱼用超声诊断床上并在合适的位置卡好,将试
验对象引入担架中,腹面朝上,控制好担架的宽度,
放置在鱼用担架上,需1-2名操作人员稳定住鱼 体。待试验鱼安静不挣扎时,在试验对象腹部涂上
耦合剂,使用矩形探头(频率为3 ~5 mHz ),紧贴鱼 体腹部从肛门开始向上探测,出卵巢位置并进行
探测,从影像中选取影像清晰的卵子,测量其直径,然
后迅速放回亲鱼池内。其中每条鱼卵母细胞测4个
重复,每个种类不同月份卵母细胞大小取其均值。
1-4人工繁殖操作方法人工繁殖技术视不同水
生动物,其催产时间、催产药物及剂量、催产效应时 间不同。当亲鱼开始排卵时,每条亲鱼收集10枚游 离的卵子于Bouin 液或中性福尔马林液中固定24 -
48 h ,再在显微镜下进行测量,每条鱼游离卵子测
4个重复,每个种类取其均值。在收集卵子过程中 一定要快而准,防止卵子干瘪,也不能放入水中因 吸水膨胀而导致测量不准确。
1.5统计分析 对于测得的卵径,采用SPSS  20. 0
分析软件和excel 对试验所得数据进行分析,试验 数据用平均值土标准差表示,对组间数据进行差异 显著性比较,$<0-05为差异显著,$>0.05为差异 不显著。
产苗种有限公司。各试验组亲鱼之间规格一致,年龄 一致,各组亲鱼生物学指标如表1。亲鱼管理归各苗 种繁育公司,本试验定期到各公司进行超声采样。
2结果
2.1超声技术对6种水生动物卵子不同发育阶段
的检测 超声测量主要集中在卵巢发育3~8月份, 根据鱼种卵 发育和 熟 期的不 , 种 动
物的采样时间不一致,主要测量数据见表2。
黄颖鱼卵母细胞在超声检测下,7月份的卵径
与3 ~5月份的卵径大小差异显著!$<0- 05),超声 探测可见高回声的卵粒,卵粒大小比较均匀,卵径 均值在(1. 72 ±0- 06) mm ,按压腹部,超声可见卵粒
的移动,可断定7月份的超声影像与生理学上黄颖 鱼的卵母细胞处于V 期一致[1] ;3 ~5月份超声探查 可见卵粒,但是卵粒比较致密,按压腹部,超声影像
不见卵粒游离,可断定3~5月份超声影像与黄颖鱼
第W 时相的卵母细胞发育一致。
黄鳍卵母细胞在超声检测下,3 ~5月份卵径与
6月份卵径大小差异显著($<0. 05)。在3~5月份
超声检测中,可以清晰探测到卵粒,卵粒大小不一,
且由于细胞之间的挤压,在超声检测下此时的卵母
细胞形态也不一,轻压腹部,卵子致密,超声影像检
测不到其游动,可以断定此阶段的超声探查从形态
和大小上与黄鳍第W 时相的卵母细胞发育一致; 6月份超声检测黄鳍卵巢,在超声探头的探查段,都
可检测到卵圆形的卵粒,其卵径大小为(3.35 ±
0.08) mm ,
腹 , 影 可 到卵子在卵
内的游动,可断定此阶段为成熟的第V 时相卵母 细胞⑵。
斑点叉尾鯛卵母细胞在超声检测下,7月份的
卵径大小与4 ~6月份差异显著($<0.05)。在超
,7 的 卵 细胞 为 ,可
见游离的卵圆形卵母细胞,卵径大小为(2. 63 ±
表2超声技术对不同月份下卵径大小探测
Table2Ultrasonic detection of egg diameter in different months
卵径/mm Egg diameter
Fish species345678
Maech Apeie May June Juey Augusi
黄颖鱼Pelteobagrus pUlviaraco 0-85±0.26s
1.02±0.31a  1.13±0.36a
1.66±0.08b  1.72±0.06b/
黄Monoptems albus 1.82±0.23s2-15±0-28s
2.57±0.31a
3.35±0.08b//
斑点叉尾飆
xohaUurusounohahus
*1-14±0-18s  1.24±0.17a  1.97±0.76s  2.63±0.03b/
泥!
Oriental U}eathe'^msp
0.88±0.16  1.23±0.14  1.3±0.23  1.57±0.06//
施氏"
Adpenser ecereoc0i
*  1.91±0.24s  2.35±0.22a  2.67±0.52s  3.59±0.26b  3.88±0.03b
南方大口#
Silurus soldatovi menaionalis Chee
1.12±0.14  1.34±0.21  1.45±0.13  1.53±0.14  1.79±0.04/
注:$:没有经过超声检测;/:已经催产。同一行数据上标无字母或相同字母表示差异不显著($>0.05",不同字母表示差异显著($< 0.05)
Note:*:Not passed overbirW test;/:Inducted to give birth.T he superscript of the same row of data has no letter or the same letter means that the dCferent is no-significant($>0.05)#diCerent letter indicate significant dmferences($<0.05)
0-03)mm;4~6月份超声探查,超声可见卵粒回声,卵粒大小不一致较多,挤压腹部,超声显示卵粒不具备流动性,可定4~6月份卵母细胞为第W时相的卵母细胞[3]$
泥鍬卵母细胞在超声检测下,随着卵母细胞的成熟,其3~6月份卵径大小差异不显著(P> 0.05",与泥鍬个体小、怀卵量大有很大关系。通过超声检测,3~5月份卵粒经腹部挤压,卵粒不游离; 6月份超声检测的卵粒经腹部挤压,超声影像可见卵粒的流动⑷。泥鍬的成熟卵子可通过超声影像下卵粒是否具有游动性判定$
施氏"卵母细胞在超声检测下,7~8月份卵径大小与4~6月份差异显著(P<0-05)$在超声检测下,8月份施氏"双侧卵巢中,卵粒在超声卵径为(3.88±0.03)mm,且超声下按压腹部,卵母细胞具有游动性;7月份卵
径虽与8月份差异不显著,但是此期的卵母细胞尚未完全成熟,按压腹部时超声显示卵粒之间无游动性;4~6月份超声检测下,卵粒之间无游动,卵粒大小不一®*$
南方大口#卵母细胞在超声检测下,7月份排卵前可测卵径为(1-79±0.04)m叫挤压腹部,超声影像显示卵母细胞在卵巢腔内的游动,其他月份卵径大可,但影不其动,卵细胞尚未发育成熟,卵粒致密,黏附性大[8]$2.2催产前卵子超声检测与催产排卵后卵子显微镜检测对比把6种水产动物催产前超声检测卵子的大小与催产排卵后卵子大小进行比较,见表3$由表3可知,催产前后其测得的卵径均值相近,对比每种鱼的2组数据,黄颖鱼超声检测卵径的符合率在99-42%,黄鳍超声检测卵径符合率在99-11%,斑点叉尾鯛超声检测卵径的符合率在99.62%,泥鍬超声检测卵径符合率在99-36%,施氏"超声检测卵径的符合率在99.48%,南方大口#超声检测卵径的符合率在98.90%$6种鱼类
排卵卵径的大的合率在98.9%以上$
3讨论
在人类医学上,超声检测技术因具有检测效率高,检测过程无痛苦,检测结果精确等优点被广泛应用;在畜牧上,随着集约化、规模化养殖的发展,为提高检测效率,减少动物痛苦,超声诊断技术在畜禽动物的应用越来越多;超声技术在水产应用有其一定的局限性,主要原因是声波具有较特殊的物理性质,在检测时鱼类鳞片会吸收部分超声波,这就对超声成像造成了直接的影响,易形成伪像。超断技在养殖
的少,主应
在鱼的心脏超声成像研究⑼、无鳞鱼的脏器超声成
表3催产前卵子超声检测与催产排卵后卵子显微镜检测Table3Ultrasound examination of eggs before and after ovulation
鱼种Fish species
催产前超声测量卵径/m m
Measueemenioeeggdiameiee
byueieasound beeoeepaeiueiiion
排卵后显微镜测量卵径/mm
Measueemenioeeggdiameiee
bymiceoscopeaeieeoeueaiion
符合率/%
Coincidenceeaie
黄鱼
Pelteobagrus pUlviaraco
1.72±0.06  1.73±0.0599.42
Monopterm albus
3.35±0.08  3.38±0.0699.11
Ictalurus puoctatus
2.63±0.03  2.64±0.0899.62
泥!
Oriental U}eathe'^msp
1.57±0.06  1.58±0.0599.36
施氏"
AApenser ecereoc0i
3.88±0.03  3.90±0.0799.48
南方大口#
Silurus solUatovi menPionalia Chee
1.79±0.04  1.81±0.0698.90
像研究)10R1*、利用超声鉴别雌雄鱼[12]以及利用超声技术诊断疾病[13*等方面。亲鱼人工繁殖是水产养殖行业极其重要的一个领域,决定了水产行业持续发展,对亲鱼进行保护和随期诊断如同对孕妇进行周期检查一样重要,很多繁育场对亲鱼卵子的诊断多采用挖卵器取卵,对鱼体会造成一定伤害,超声技术作为不伤害鱼体的直接检测,对亲鱼随期诊断极其重要$
本试验利用超声检测技术,旨在探究其是否可以作为辅助鱼类人工繁殖卵子发育情况的检测工具。在试验之初,仅考虑通过卵径大小作为评判发育成熟的一种指标,但在试验过程中,通过不同月份的超声观察,卵粒在超声影像中是否具有游动性也可作为评判卵子成熟和是否达到催产的一种指标,通过这2个指标再结合繁殖生理期反应,为亲鱼人工繁殖提供可靠的技术支撑。通过不同期对,6种鱼的卵子熟期卵径大小,其中黄颖鱼成熟期卵径为(1.72±0-06)mm,黄鳍成熟期卵径为(3-35±0-08)mm,斑点叉尾鯛成熟期卵径为(2.63±0-03)mm,泥鍬成熟期卵径为(1.57±0.06)mm,施氏鲂成熟期卵径为(3.88±0-03)mm,南方大口聽成熟期卵径为(1.-9±0.04)mm;通过排卵检测,超声检测与实际排卵卵径符合率均达到98.90%以上,超声检测卵径科学、精确。综上所述:对于无鳞鱼或珍稀鱼类应用超声检测卵巢发育,其分辨率和诊断符合率比较高,可作为人工繁殖诊断卵子发育情况的首选方法,具有重要的临床应用价值。参考文献:
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