EBV实验室检测方法之面面观(一)

EBV实验室检测方法之面面观(一)武士道精神
EBV
(Epstein-BarrVirus),
是一种嗜人B淋巴细胞的双链DNA 病毒,属于疱疹病毒科。
人是EB病毒的感染宿主,病毒主要通过唾液传播,也可通过输血途径传播。EBV感染呈全球性分布,90%以上的成人血清EBV抗体阳性,感染者终身携带病毒。在我国,EBV主要感染体为学龄前儿童。
EBV作为儿童感染性疾病常见的病原体,几乎可以危害所有脏器和组织,甚至发展为一些危及生命的疾病,常见的有传染性单核细胞增多症(IM)、慢性活动性EBV感染(CAEBV)以及EBV相关噬血组织细胞增生症(HLH)。该病毒还被认为是多种恶性肿瘤的病因之一,如鼻咽癌、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、胃癌等,每年EBV相关肿瘤死亡病例达15-20万。此外,还有多种儿科疾病中也查到EBV感染,如与免疫功能受损相关的平滑肌肉瘤、川崎病、肾小球肾炎、病毒性心肌炎、心包炎、急性特发性血小板减少性紫癜、病毒性脑炎、呼吸系统感染等疾病。
EBV感染的主要临床症状包括发热、全身淋巴结肿大、肝脾肿大以及皮肤黏膜疹等,多数并不典型。因此EBV的确诊需要依靠实验室诊断,目前主要的实验室诊断方法包括:嗜异凝集抗体检测、外周血异型淋巴细胞比例检测、EBV特异性抗体检测、EBV核酸检测以及EBERS原位杂交等,国内以EBV特异性抗体检测应用最为广泛。舌骨
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嗜异凝集抗体检测
嗜异性抗体的检测方法主要为试管法和血凝反应板法。在成人和青少年有85%-90%的EBV感染者会出现嗜异凝集抗体,一般在2-5周达到高峰,然后迅速下降。但是在2-5岁的儿童EBV感染者中,嗜异性抗体阳性率仅有50%,在1-2岁的儿童中为10%-30%。此外,该方法特异性欠佳,因此在儿童EBV感染诊断中应用有限。
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外周血异型淋巴细胞比例
通常将外周血异型淋巴细胞比例≥10%作为单独的诊断指标,而学龄前儿童异型淋巴细胞比例很低,因此对该年龄段诊断意义不大。
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荧光定量PCR检测EBV核酸
RT-PCR是目前监测EBV载量最主要的方法。外周血单个核细胞中,EBV核酸阳性可持续6个月,单纯EBV-DNA检测只能提示机体存在活动性EBV感染以及病毒活动性复制,不能确天下收藏2011
定原发性感染或既往感染、再激活,因而在IM中诊断价值有限。在免疫缺陷患者EBV原发感染诊断以及抗体检测结果难以解释时可能有所帮助,另外该方法可用于指导和判断疗效。
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EBERS原位杂交
EBV潜伏感染的细胞中含有大量的EBERS,因此能够定位EBV感染的细胞。活检组织样本中(包括肿瘤)的EBERS阳性是诊断疾病是否与EBV有关的金标准。
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EBV特异性抗体检测
EBV感染不同时期,机体会产生针对不同抗原的特异性抗体。依据EBV特异性抗体谱,可分为原发感染、既往感染和再激活3种类型。感染时期的确定对相关疾病的诊断具有非常重要的临床意义。但是由于机体对病毒的免疫反应十分复杂,必须要联合多项抗体检测以及IgG亲合力检测,才能准确判断感染阶段,辅助临床诊断和。
综上所述,嗜异凝集抗体检测和外周血异型淋巴细胞检测在成人和青少年感染EBV的患者中具有较高的诊断价值,且操作简单,但应用于儿童体具有很大的局限性,不适合我国儿童为主要发病体的现状,国内未被广泛使用。EBV核酸检测法敏感性高,特异性强,但无法区分EBV的感染时期,加之检测环境要求高、操作复杂等因素,目前主要应用于疾病监测以及疗效评估等方面,尚未广泛用于诊断。EBERS原位杂交检测能够定位感染细胞,尤其是诊断肿瘤是否与EBV相关的金标准,但该方法获取样本困难,且检测周期长、操作复杂,对操作者的熟练和规范程度要求高,不适合EBV感染的筛查。目前特异性抗体检测是临床应用中最广泛的方法,但由于血清学反应的复杂、多样性,需要联合多项抗体检测以及IgG亲合力检测,才能够准确判断感染阶段,辅助临床诊断和。
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本文发布于:2024-09-24 06:22:14,感谢您对本站的认可!

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