(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910395083.1
(22)申请日 2019.05.13
(71)申请人 江苏春之雨生物科技发展有限公司
地址 222062 江苏省连云港市海州区郁洲
南路与瀛洲路交叉口南200米路东
(72)发明人 朱娜 粟燕玉 李玲玉
(74)专利代理机构 长沙新裕知识产权代理有限
公司 43210
代理人 赵登高
(51)Int.Cl.
C12N 1/14(2006.01)
C12N 1/04(2006.01)
C12R 1/645(2006.01)
(54)发明名称
(57)摘要
本发明公开了一种香菇菌种保藏培养基，由
下列原料组成：酵母浸粉、蛋白胨、杨木屑、氯化
钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、葡萄籽提取物、L -脯氨
酸、硒代半胱氨酸、甜菜碱、调环酸钙、水杨酸、果
糖-1，6-二磷酸、海藻糖、醇类，余量为纯净水。同
时本发明还公开了一种香菇菌种保藏方法，将待
保藏的香菇菌种培养出菌丝体后，打孔接入菌种
保藏培养基中，密封后置于冰箱低温保藏。本发
明能够实现香菇菌种的稳定保存，菌种变异或退
化程度极小，存活率高，保藏效果好。本发明操作
简便，无需定期移植，降低了污染的风险；对保藏
设备要求不高，节约了生产成本，具有很高的实
用价值。权利要求书1页 说明书9页CN 110004068 A 2019.07.12
C N 110004068
A
1.一种香菇菌种保藏培养基，其特征在于，该培养基是由下列重量配比的原料组成：酵母浸粉0.8-1.2g/L，蛋白胨4.0-5.0g/L，杨木屑3.5-4.5g/L，氯化钠0.8-1.2g/L，磷酸二氢钾3.0-3.8g/L，硫酸镁1.0-1.5g/L，葡萄籽提取物6-10mg/L，L-脯氨酸90-110mg/L，硒代半胱氨酸45-55mg/L，甜菜碱22-30mg/L，调环酸钙17-23mg/L，水杨酸5-8mg/L，果糖-1，6-二磷酸28-40mg/L，海藻糖40-50g/L，醇类150-200ml/L，余量为纯净水。
2.根据权利要求1所述的一种香菇菌种保藏培养基，其特征在于，所述杨木屑使用前需经40目筛网过筛处理，然后在室温下于纯净水中浸泡4-5h。
3.根据权利要求1所述的一种香菇菌种保藏培养基，其特征在于，所述醇类是指丙三醇、异丙醇、丙二醇中的一种或几种经60℃鼓风干燥过夜后得到的无水醇，优选为丙三醇。
4.一种香菇菌种保藏方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
1） 将待保藏的香菇菌种接种到改良PDA培养基平板上，置于23-27℃培养箱中培养7-10d，使菌丝体充分生长；
2）将灭菌后的菌种保藏培养基分装于保藏容器中，然后将生长健壮一致的菌丝体用5mm打孔器打孔，挑取3-4个菌丝块接入菌种保藏培养基中，迅速密封好保藏容器；
3）将保藏容器置于冰箱中低温保藏，保藏温度为-20℃
~4℃。
5.根据权利要求4所述的一种香菇菌种保藏方法，其特征在于，所述改良PDA培养基的配方为：马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，蛋白胨1g/L，琼脂15g/L，磷酸二氢钾3g/L，硫酸镁1.5g/L，硫酸锰10mg/L，维生素B1 0.1mg/L，维生素B6 0.5mg/L，NAA1.2mg/L，pH调至
6.5。
6.根据权利要求4所述的一种香菇菌种保藏方法，其特征在于，所述菌种保藏培养基的灭菌方法为：121℃高压蒸汽灭菌15-20min，其中果糖-1，6-二磷酸需用0.22μm滤膜过滤除菌，再加入其它灭菌的培养基原料中。
7.根据权利要求4所述的一种香菇菌种保藏方法，其特征在于，所述保藏容器为冻存管或带密封螺旋帽的安瓿瓶，规格为3-5mL。
权 利 要 求 书1/1页
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