膜蛋白CcmB的表达载体及其表达纯化方法

(19)中华人民共和国国家知识产权局

	(12)发明专利说明书
		(10)申请公布号 CN 113136394 A (43)申请公布日 2021.07.20

(21)申请号 CN202010048422.1

(22)申请日 2020.01.16

(71)申请人南京理工大学

地址 210094 江苏省南京市孝陵卫200号

(72)发明人周敏张苑桢华铮翼卢颖洪

(74)专利代理机构 32203 南京理工大学专利中心

代理人刘海霞

(51)Int.CI

C12N15/70(20060101)

C12N15/31(20060101)

C12N15/65(20060101)

C07K14/245(20060101)

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

膜蛋白CcmB的表达载体及其表达纯化方法

(57)摘要

本发明公开了一种膜蛋白CcmB的表达载体及其表达纯化方法。所述的表达载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，包含：噬菌体T7启动子；大肠杆菌核糖体结合位点，其中包含了NcoI序列CCATGG、SEQ ID NO.1所示的大肠杆菌膜蛋白CcmB序列以及BamHI位点GGATCC；烟草蚀纹病毒半胱氨酸蛋白酶切割位点GAGAACCTGTACTTCCAATCC；NdeI酶切位点CATATG；超折叠维纳斯荧光蛋白编码序列；XhoI酶切位点CTCGAG；6个组氨酸位点以及终止密码子TAG。本发明利用分子刚性的荧光蛋白作为筛选标记以及表达进程指示剂，该荧光蛋白由于具有分子水平刚性结构可以迅速折叠，能够帮助氮端膜蛋白CcmB稳定其构象。本发明构建的表达载体能够实现膜蛋白CcmB的大量表达，可用于后续新型抗生素的高通量筛选。

法律状态