(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010498449.0
(22)申请日 2020.06.04
(71)申请人 上海交通大学医学院
地址 200025 上海市黄浦区重庆南路280号
(72)发明人 朱亮 张可人 陈红专 雷绘敏
唐亚斌 张雨霏 沈瑛 马春爽
吕倩明
(74)专利代理机构 上海盈盛知识产权代理事务
所(普通合伙) 31294
代理人 孙佳胤
(51)Int.Cl.
A61K 45/06(2006.01)
A61K 31/4188(2006.01)
A61K 31/517(2006.01)
A61K 31/5377(2006.01)
A61K 31/426(2006.01)A61K 31/506(2006.01)A61P 35/00(2006.01)A61P 35/04(2006.01)
(54)发明名称
(57)摘要
本发明提供了AKR1B抑制剂在制备肺癌
药物中的应用，所述AKR1B抑制剂包括索比尼尔
或依帕司他。本发明首次发现AKR1B抑制剂能够
抑制肺癌细胞的增殖能力和细胞活力，联合肺癌
的靶向药物(厄洛替尼、吉非替尼或奥希替尼等)
使用均能显著抑制耐药复发现象的产生。更重要
的是，AKR1B抑制剂中依帕司他已为上市药物，临
床用于糖尿病并发症，本发明首次发现依帕
司可老药新用于肺癌以及预防耐药，将使更
多肺癌患者获益。权利要求书1页 说明书8页 附图4页CN 111671906 A 2020.09.18
C N 111671906
A
1.AKR1B抑制剂在制备肺癌药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的AKR1B抑制剂在制备肺癌药物中的应用，其特征在于，所述肺癌包括小细胞肺癌和非小细胞肺癌。
3.根据权利要求1所述的AKR1B抑制剂在制备肺癌药物中的应用，其特征在于，所述AKR1B抑制剂包括索比尼尔或依帕司他。
4.AKR1B抑制剂与肺癌靶向药物联合用药在制备肺癌药物中的应用。
5.根据权利要求4所述AKR1B抑制剂与肺癌靶向药物联合用药在制备肺癌药物中的应用，其特征在于，所述AKR1B抑制剂包括索比尼尔或依帕司他。
6.根据权利要求4所述AKR1B抑制剂与肺癌靶向药物联合用药在制备肺癌药物中的应用，其特征在于，所述肺癌靶向药物包括厄洛替尼、吉非替尼或奥希替尼。
7.一种肺癌的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括AKR1B抑制剂与肺癌靶向药物。
8.根据权利要求7所述一种肺癌的药物组合物，其特征在于，所述AKR1B抑制剂包括索比尼尔或依帕司他，所述肺癌靶向药物包括厄洛替尼、吉非替尼或奥希替尼。
权 利 要 求 书1/1页CN 111671906 A
AKR1B抑制剂在制备肺癌药物中的应用
技术领域
[0001]本发明属于医药技术领域，具体涉及AKR1B抑制剂在制备肺癌药物中的应用。
背景技术
[0002]肺癌是全球发病率和致死率占首位的恶性肿瘤。随着人们对肺癌的认识不断增加以及新的手段不断进入临床，肺癌分类也发生了巨大变化。根据肺癌的病理学特征，可以分为小细胞肺癌(Small Cell Lung Cancer,SCLC)和非小细胞肺癌(Non-Small Cell Lung Cancer,NSCLC)，NSCLC占80％以上，包括腺癌、鳞癌、大细胞癌。不同种族的肺癌驱动基因突变谱存在较大差异，亚裔人以表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)突变最为常见。肺癌驱动基因研究的同时也促进了针对这些突变基因药物的研发，以EGFR为靶点的已经应用于临床并取得了一定疗效。近十年来，以吉非替尼(Gefitinib)、厄洛替尼(Erlotinib)和奥希替尼(Osimertinib)等为代表的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(Epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)已成为EGFR突变型晚期肺癌最主要的手段，但几乎所有EGFR-TKIs有效的患者在用药10-14个月后产生耐药，最终难逃
疾病复发进展的厄运，这成为临床的巨大瓶颈。目前已知的EGFR-TKI获得性耐药机制，在分子层面主要包括EGFR编码基因继发耐药突变如第20外显子的T790M，突变以及促癌信号转换如Met基因扩增和PI3K-Akt信号通路活性增强；在细胞和组织可塑性层面主要包括肿瘤细胞转分化如发生上皮间质转化(Epithelial-mechanchymal transition,EMT)、增强肿瘤干细胞(Cancer stem cell,CSC)特性、向小细胞肺癌或鳞癌分化等，理解这些机制，并开展联合疗法对改善至关重要。
[0003]索比尼尔(Sorbinil)，其主要成分为(S)-6-氟-2,3-二氢螺[4H-1-苯并吡喃-4,4-咪唑烷]-2,5-二酮(1)，分子式为C11H9FN2O3，分子量为236.20。索比尼尔是醛酮还原酶AKR1B 抑制剂，在糖尿病和糖尿病并发症方面发挥作用。
[0004]依帕司他(Epalrestat)，其主要成分为5-[(1Z，2E)-2-甲基-3-苯基-2-丙烯亚基]-4-氧代-2-硫代-噻唑烷乙酸，分子式为C15H13NO3S2，分子量为319.40。依帕司他是一种可逆性的醛酮还原酶(AKR1B)非竞争性抑制剂，临床用于糖尿病神经病变，用药安全低毒副作用且未见致癌作用。
发明内容
[0005]本发明的第一个目的在于，提供AKR1B抑制剂在制备肺癌药物中的应用。AKR1B抑制剂能够显著抑制肺癌细胞的转移，可用于制备肺癌的药物。
[0006]本发明的第二个目的在于，提供AKR1B抑制剂与肺癌靶向药物联合用药在制备肺癌药物中的应用。
[0007]本发明的第三个目的在于，提供一种肺癌的药物组合物。
[0008]为了实现上述第一个目的，本发明提供了AKR1B抑制剂在制备肺癌药物中的
应用。
[0009]作为一个优选方案，所述肺癌包括小细胞肺癌和非小细胞肺癌。
[0010]作为一个优选方案，所述AKR1B抑制剂包括索比尼尔或依帕司他。
[0011]为了实现上述第二个目的，本发明提供了AKR1B抑制剂与肺癌靶向药物联合用药在制备肺癌药物中的应用。
[0012]作为一个优选方案，所述AKR1B抑制剂包括索比尼尔或依帕司他。
[0013]作为一个优选方案，所述肺癌靶向药物包括厄洛替尼、吉非替尼或奥希替尼。[0014]为了实现上述第三个目的，本发明提供了一种肺癌的药物组合物，所述药物组合物包括AKR1B抑制剂与肺癌靶向药物。
[0015]作为一个优选方案，所述AKR1B抑制剂包括索比尼尔或依帕司他，所述肺癌靶向药物包括厄洛替尼、吉非替尼或奥希替尼。
[0016]本发明中A K R1B抑制剂包括但不限于索比尼尔(S o r b i n i l)、依帕司他(Epalrestat)，及其可药用盐；肺癌靶向药物包括但不限于厄洛替尼(Erlotinib)、吉非替尼(Gefitinib)或奥希替尼(Osimertinib)，及其可药用盐。
[0017]根据本发明的可药用盐是药物学技术领域技术人员熟知的生理上可接受的碱和/或酸形成的盐。与生理上可接受的碱形成的适当的盐包括，例如碱金属和碱土金属盐，如钠、钾、钙和镁盐，铵盐，以及与适当有机碱形成的盐，如甲胺，二甲胺，三甲胺，，吗啉和三乙醇胺。与生理上可接受的酸形成的适当的盐包括，例如与无机酸形成的盐，如氢卤酸(特别是盐酸盐或氢溴酸盐)，硫酸盐和磷酸盐，以及与有机酸形成的盐。
[0018]本发明的肺癌的药物组合物，包括索比尼尔或其可药用盐和厄洛替尼或其可药用盐，及其药学上可接受的载体；
[0019]包括索比尼尔或其可药用盐和吉非替尼或其可药用盐，及其药学上可接受的载体；
[0020]包括索比尼尔或其可药用盐和奥希替尼或其可药用盐，及其药学上可接受的载体；
[0021]包括依帕司他或其可药用盐和厄洛替尼或其可药用盐，及其药学上可接受的载体；
[0022]包括依帕司他或其可药用盐和吉非替尼或其可药用盐，及其药学上可接受的载体；
[0023]包括依帕司他或其可药用盐和奥希替尼或其可药用盐，及其药学上可接受的载体。
[0024]本发明发现肺癌细胞中AKR1B表达水平明显升高。通过进一步干预实验发现，AKR1B通过促进肺癌转移等从而诱导其耐药复发，而使用AKR1B抑制剂可显著抑制肺癌耐药现象的产生。本发明以肺癌细胞(HCC827和H1975细胞株及其耐药株)为细胞模型，使用AKR1B抑制剂索比尼尔和依帕司他进行体外细胞实验，实验结果表明，索比尼尔和依帕司他均能显著抑制肺癌细胞株增强的迁移能力和干性特征，抑制肺癌细胞株的增殖能力和细胞活力，联合肺癌的靶向药物协同使用均能显著抑制耐药现象的产生。
[0025]本发明的优点在于，本发明使用AKR1B抑制剂进行了以小鼠皮下瘤模型和尾静脉转移模型的体内实验，实验结果表明，依帕司他和索比尼尔能抑制肺癌细胞的成瘤能力，联
合肺癌的靶向药物厄洛替尼、吉非替尼或奥希替尼协同使用则能显著抑制肺癌细胞的成瘤能力，延缓耐药现象的产生。此外，依帕司他还能显著抑制肺癌耐药细胞增强的转移能力，包括脑转移和肺转移能力。
附图说明
[0026]图1为肺癌细胞中AKR1B转录水平表达情况。
[0027]图2为肺癌细胞中AKR1B蛋白水平表达情况。
[0028]图3为AKR1B抑制剂(索比尼尔和依帕司他)抑制肺癌细胞迁移能力的情况。[0029]图4为AKR1B抑制剂(索比尼尔和依帕司他)抑制肺癌细胞增殖能力的情况。[0030]图5为AKR1B抑制剂(索比尼尔和依帕司他)联用肺癌的靶向药物厄洛替尼、吉非替尼和奥希替尼抑制肺癌细胞活力的情况。
[0031]图6为AKR1B抑制剂依帕司他抑制肺癌细胞在小鼠体内转移能力的情况。[0032]图7为AKR1B抑制剂依帕司他单用及联合肺癌的靶向药物吉非替尼抑制肺癌细胞在体内成瘤能力的情况。
[0033]图8为AKR1B抑制剂依帕司他单用及联合肺癌的靶向药物吉非替尼对裸鼠体重的影响。
具体实施方式
[0034]以下，结合具体实施方式对本发明的技术进行详细描述。应当知道的是，以下具体实施方式仅用于帮助本领域技术人员理解本发明，而非对本发明的限制。
[0035]实施例1.肺癌细胞中AKR1B转录水平表达
[0036]为了检测AKR1B转录水平的表达情况，实验选取肺癌药物敏感细胞和耐药细胞为模型，提取目的细胞的RNA后逆转录，最后计算AKR1B mRNA水平。
[0037]选取培养状态良好的肺癌敏感株和耐药株，制成单细胞悬液，接种于标准的6孔板中，细胞密度为2-3×105/孔，贴壁培养待细胞生长至汇合度为80-90％时，吸弃原培养板中的培养基，每孔加入2mL PBS洗涤1次以去除残留的培养液，弃PBS洗涤液，准备提取目的细胞中的RNA。RNA的具体提取步骤如下：
[0038](1)准备提取RNA前需先配置好裂解液，裂解液需现配现用，1mL Buffer RL中需要加入20μL 50×DTT，混匀后向6孔板中每孔加入300μL现配的裂解液，上下轻晃培养板以确保裂解液均匀覆盖于细胞表面，室温裂解2-5min后沿壁吹打细胞至其充分裂解。
[0039](2)将试剂盒中的gDNA Eraser Spin Column放置于2mL Collection Tube中。[0040](3)把充分裂解的细胞悬液转移至gDNA Eraser Spin Column中，12000rpm，室温离心2min。
[0041](4)弃去上室gDNA Eraser Spin Column，保留2mL Collection Tube中的滤液。[0042](5)向滤液中加入300μL相同体积的70％乙醇溶液，用移液轻柔吹打使其混合均匀(可能会出现沉淀)。
[0043](6)迅速地将混合均匀的液体转移至试剂盒中配套的RNA Spin Column中，12000rpm，室温离心1min，弃去滤液。
[0044](7)在RNA Spin Column中加入500μL的Buffer RWA溶液，12000rpm，室温离心30s,
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
关于我们
投诉建议