(10)申请公布号 (43)申请公布日 2014.12.03 C N 104171429
A (21)申请号 201410400403.5
(22)申请日 2014.08.14
CGMCC No.3346 2009.10.19
A23K 1/16(2006.01)
(71)申请人生合生物科技股份有限公司
地址高雄市路竹区北岭六路66号
(72)发明人李庭羽 林金生 徐添根
(74)专利代理机构南京天翼专利代理有限责任
公司 32112
代理人
李建芳
(54)发明名称
(57)摘要
本发明公开了一种植物乳杆菌LP28的用途，
系用以制备饲料添加物，该植物乳杆菌LP28寄存
于中国普通微生物保藏管理中心，其寄存编号为
CGMCC No.3346。本申请之植物乳杆菌LP28系藉
由平衡肠道环境之菌相平衡，降低肠道内有害菌
使经济动物所摄取之饲料可以有效转换为具有经
济价值之初级畜产品，进而能够达到提升经济动
物之经济价值的功效。
(83)生物保藏信息
(51)Int.Cl.
权利要求书1页 说明书8页
序列表2页 附图4页
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请
权利要求书1页 说明书8页序列表2页 附图4页(10)申请公布号CN 104171429 A
1.一种植物乳杆菌LP28的用途，其特征在于：系用以制备饲料添加物，该植物乳杆菌LP28寄存于中国普通微生物保藏管理中心，其寄存编号为CGMCC No.3346。
2.如权利要求1所述的植物乳杆菌LP28的用途，其特征在于：植物乳杆菌LP28的用量为每克饲料104～108CFU。
3.如权利要求2所述的植物乳杆菌LP28的用途，其特征在于：植物乳杆菌LP28的用量为每克饲料106CFU。
4.如权利要求1-3任意一项所述的植物乳杆菌LP28的用途，其特征在于：系用以促进IL-10、TNF-α、IL-12p40和IFN-γ细胞激素的分泌。
5.如权利要求1-3任意一项所述的植物乳杆菌LP28的用途，其特征在于：系用以抑制IL-4之分泌。
6.如权利要求1-3任意一项所述的植物乳杆菌LP28的用途，其特征在于：系用以抑制肠道之有害菌之生长。
7.如权利要求6所述的植物乳杆菌LP28的用途，其特征在于：系用以抑制大肠杆菌和肠道沙门氏菌。
8.如权利要求1-3任意一项所述的植物乳杆菌LP28的用途，其特征在于：植物乳杆菌LP28的16SrDNA序列为：
一种植物乳杆菌LP28的用途
技术领域
[0001] 本申请涉及一种植物乳杆菌LP28的用途。
背景技术
[0002] 陆生经济动物系包含家畜及家禽，如猪、牛、羊、鹿、鸡、鸭、鹅等，该陆生经济动物系可以生产肉、乳、蛋、皮毛等初级畜产品，并且经由烹饪加工，而成为食品或商品，衍生不同之经济价值。
[0003] 现有技术中，在上述陆生经济动物之饲育过程中，常会于饲料中同时混参低剂量抗生素，因为低剂量抗生素可以杀死消化道部分微生物，降低消化道内微生物数量，从而减少微生物对饲料的利用损耗，进而可以使陆生经济动物可以产出较多初级畜产品，提升陆生经济动物的经济价值。
[0004] 但抗生素之大量及不当使用，可能会导致抗生素残留于陆生经济动物体内，而影响消费者之健康，还可能会造成环境或陆生经济动物消化道中出现抗药性菌株，因此，欧盟已于2006年全面禁止此类低剂量抗生素之应用。
[0005] 植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)系为乳酸菌之一种，如台湾公告第I404540号专利案，系揭
示植物乳杆菌LP23具有抑制幽门螺旋杆菌活性，台湾公告第I371283号专利案则系揭示植物乳杆菌BB9具有排除体内胆固醇及三酸甘油酯之活性，台湾公开第201106957号专利案系揭示植物乳杆菌LP28系具有减缓过敏反应之活性。[0006] 目前尚未有相关研究指出植物乳杆菌可以作为陆生经济动物饲育时混参之饲料添加物。
发明内容
[0007] 本申请要解决的技术问题在于提供一种植物乳杆菌LP28的用途。
[0008] 为解决上述技术问题，本申请的技术方案是：
[0009] 一种植物乳杆菌LP28的用途，其特征在于：系用以制备饲料添加物，该植物乳杆菌LP28寄存于中国普通微生物保藏管理中心，其寄存编号为CGMCC No.3346。
[0010] 上述植物乳杆菌LP28可改善陆生经济动物消化道菌相，以提升动物之免疫系统状态。本申请中动物优选陆生经济动物。
[0011] 上述植物乳杆菌LP28还可提升经济动物营养获取能力，使体内营养有效转化为初级畜产品产出所需，进而提升陆生经济动物之经济价值者。
[0012] 上述植物乳杆菌LP28的用量优选为每克饲料104～108CFU。这样可进一步提升动物的经济价值。进一步优选，植物乳杆菌LP28的用量为每克饲料106CFU。
[0013] 上述植物乳杆菌LP28的用途，系用以促进IL-10、TNF-α、IL-12p40和IFN-γ细胞激素的分泌，抑制IL-4之分泌。
[0014] 上述植物乳杆菌LP28的用途，系用以抑制肠道之有害菌之生长。
[0015] 上述有害菌包括动物体内的任何有害菌，优选，大肠杆菌和肠道沙门氏菌。
[0016] 上述植物乳杆菌LP28的16SrDNA序列为：
[0017]
[0018]
[0019] 申请人经研究发现：本申请之植物乳杆菌LP28系能够耐受胃酸及胆盐，完整通过胃部，长时间存活于肠道之中，并可以吸附于肠道上皮细胞，同时产生并释放乳酸，降低肠道环境酸硷值，抑制有害菌之生长，以促使肠道环境达到菌相平衡，且促进IL-10、TNF-α、IL-12p40及IFN-γ等细胞激素的分泌、抑制IL-4之分泌，以调节与上述细胞激素相关之免疫反应，进而达到提升经济动物免疫及抗病能力之功效，因此，该屎肠球菌EF08系可以单独或混合其他成份，以形成一饲料添加物，混参于陆生经济动物之饲料中，以供给陆生经济动物，从而有效提升该陆生经济动物之免疫及抗病能力。
[0020] 本申请饲料添加物可以为药剂或其它等各种形式。
[0021] 本申请未特别说明的技术均可参照现有技术。
[0022] 本申请之植物乳杆菌LP28系藉由平衡肠道环境之菌相平衡，降低肠道内之有害菌过度消耗饲料，可以提升经济动物之饲料转换率，使经济动物所摄取之饲料可以有效转换为具有经济价值之初级畜产品，进而能够达到提升经济动物之经济价值的功效，同时有效提升经济动物之免疫及抗病能力。
附图说明
[0023] 图1系本申请植物乳杆菌LP28之耐酸性试验测试结果。
[0024] 图2系本申请植物乳杆菌LP28之耐胆盐试验测试结果。
[0025] 图3a系本申请植物乳杆菌LP28之促进人类周边血液细胞的IL-4分泌活性。[0026] 图3b系本申请植物乳杆菌LP28之促进人类周边血液细胞的IL-10分泌活性。[0027] 图3c系本申请植物乳杆菌LP28之促进人类周边血液细胞的IL-12p40分泌活性。[0028] 图3d系本申请植物乳杆菌LP28之促进人类周边血液细胞的IFN-γ分泌活性。[0029] 图3e系本申请植物乳杆菌LP28之促进人类周边血液细胞的TNF-α分泌活性。[0030] 图4系本申请植物乳杆菌LP28之促进鸡只周边血液细胞的IFN-γ分泌活性。[0031] 图5系本申请植物乳杆菌LP28之抑制肠道有害菌的测试结果。
具体实施方式
[0032] 为让本申请之上述及其他目的、特征及优点能更明显易懂，下文特举本申请之较佳实施例，并配合所附图式，作详细说明如下：
[0033] 本申请之植物乳杆菌LP28(Lactobacillus plantarum)，系选殖获得自豆干中；该植物乳杆菌LP28系具有降低肠道pH值、改善肠道菌相及促进周边血液细胞分泌多种细胞激素之能力。
[0034] 本申请之植物乳杆菌LP28系为如台湾公开第201106957号专利案系揭示植物乳杆菌LP28，该植物乳杆菌LP28系经由顺序相接的以下各步骤处理而获得，A、筛选步骤；B、鉴定步骤；C、保存步骤，各步骤具体如下：
[0035] A、筛选步骤：该筛选步骤系分离购自传统市场之豆干中所含有之乳酸杆菌进行培养，系将豆干接种于10％之脱脂奶粉液态培养基(配方系如第1表所载)，于37℃进行增殖培养(enrichment culture)16～20小时，并筛选产生凝乳现象之乳酸菌菌株；[0036] 表1、10％之脱脂奶粉液态培养基配方(1L)
[0037]
配方成分含量(g)
脱脂奶粉(Skim Milk Powder)10
酵母菌萃取物(Yeast Extract)1
以水将体积补至1L
[0038] 续将上述产生凝乳现象之乳酸菌菌株进行序列稀释及平板划线培养，并于37℃厌氧条件下培养2～3天，以挑选出不同菌相之单一菌落；
[0039] B、鉴定步骤：该鉴定步骤系将上述单一菌落分别进行革兰氏染、触酶反应及16S rDNA之分子鉴定，该乳酸菌菌株系为革兰氏阳性菌，触酶反应系呈阴性，且其16S rDNA部分序列系如SEQ ID No:1所示，该16S rDNA部分序列系于美国国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology；简称NCBI)之序列比对数据库(BLAST)进行比对，并依照上述鉴定结果确定本申请之乳酸菌系为一植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)，寄存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，寄存编号为CGMCC No.3346，命名为植物乳杆菌LP28，保藏日期是2009年10月19日，保藏地址是北京市朝阳区大屯路；
[0040] C、保存步骤：该保存步骤系使该植物乳杆菌LP28可以稳定于低温环境下长久存放，以便后续使用；将本申请之植物乳杆菌LP28接种至该固态MRS培养基(系为如表2
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