(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910139044.5
(22)申请日 2019.02.25
(71)申请人 汉江师范学院
地址 442000 湖北省十堰市北京南路18号
(72)发明人 江爱明 柯尊伟 巩建华 潘坤
蔡高磊 纪昌武 李润龙
(74)专利代理机构 西安研创天下知识产权代理
事务所(普通合伙) 61239
代理人 杨凤娟
(51)Int.Cl.
A01H 4/00(2006.01)
(54)发明名称
(57)摘要
本发明公开了一种荆半夏离体块茎快速繁
殖的方法，它包括外植体消毒灭菌、丛生芽诱导
键在于丛生芽诱导培养和离体块茎诱导培养两
个阶段采用了两种不同的培养基。丛生芽诱导培
养基为：MS培养基+蔗糖30g/L+琼脂8.6g/L+6-BA
1.0mg/L+NAA 0.05mg/L，pH值为5.8。与现有技术
相比，本发明的优点是丛生芽的诱导最多可达
33.4个/瓶，离体块茎的直径达到0.8cm，移栽成
活达98％以上。通过该技术可解决荆半夏种质资
源短缺难题，扩大了荆半夏的种植面积，推动荆
半夏产业的迅速发展。权利要求书1页 说明书5页 附图4页CN 109699496 A 2019.05.03
C N 109699496
A
权 利 要 求 书1/1页CN 109699496 A
1.一种荆半夏离体块茎快速繁殖的方法，其特征在于方法步骤如下：(1)取荆半夏块茎作为外植体，经消
毒灭菌后接种于培养基中，培养条件：温度25±1℃，光照强度1000～2000Lx，光照时间：10～12h/d，诱导荆半夏的块茎产生大量的丛生芽。
(2)半夏丛生芽生长到2cm左右后切去周围组织，接种于含有多效唑的培养基，培养条件：温度25±1℃，光照强度2000Lx，光照时间：10～12h/d。30天后形成0.8cm离体块茎。取出离体块茎，消毒清洗后，移栽至基质培养土中。
2.根据权利要求1所述的一种荆半夏离体块茎快速繁殖的方法，其特征在于：所述培养基为MS培养基，蔗糖的添加量为30g/L，琼脂的添加量为8.6g/L，6-BA的添加量为0.4～1.0mg/L，NAA的添加量为0.05mg/L，多效唑的添加量为0.6mg/L，AC的添加量为0.05g/L，pH 值为5.8。
3.根据权利要求1所述的一种荆半夏离体块茎快速繁殖的方法，其特征在于：所述块茎标准直径为0.8cm。
4.一种根据权利要求1所述的荆半夏组织培养繁殖的方法，其特征在于：其特征在于按如下的步骤进行：
(1)以荆半夏块茎作为外植体，对荆半夏外植体的消毒灭菌；
(2)将步骤(1)的块茎切割成5mm×5mm小块，接入MS添加6-BA和NAA的培养基上，在25±1℃，1000～2000Lx光照强度下培养30天，可萌发出丛生芽；
(3)将步骤(2)中萌发出的丛生芽切成单芽，接入MS添加6-BA、多效唑和活性炭的培养基上，在25±1℃，2000Lx光照强度下培养30天，待离体块茎的直径达到0.8cm时进行大田移栽；
(4)将步骤(3)中经过倒苗的荆半夏离体块茎从培养平中取出，清洗两次，并用多菌灵浸泡10min后，移栽至基质培养土中即可。
5.根据权利要求4所述的一种荆半夏组织培养繁殖的方法，其特征在于：步骤(1)消毒灭菌具体为：先采用75％酒精处理30s，然后用无菌水冲洗3～4次，再用0.1％消毒，同时滴加3～4滴Tween-80，7分钟后用无菌水冲洗6～8次；最后用医用头孢拉定溶液浸泡5min，再用无菌水冲洗3～4次待用。
6.根据权利要求5所述的一种荆半夏组织培养繁殖的方法，其特征在于：步骤(2)中MS 培养基中6-BA的浓度为1.0mg/L，NAA的浓度为0.05mg/L，蔗糖的浓度为30g/L，琼脂的浓度为8.6g/L，光照强度为1000～2000Lx，光周期12h/d下。
7.根据权利要求6所述的一种荆半夏组织培养繁殖的方法，其特征在于：步骤(3)中MS 培养基中的6-BA浓度为为0.5mg/L，多效唑的浓度为0.6mg/L，活性炭的浓度为0.05g/L，蔗糖的浓度为30g/L，琼脂的浓度为8.6g/L，光照强度为2000Lx，光周期12h/d下。
8.根据权利要求7所述的一种荆半夏组织培养繁殖的方法，其特征在于：步骤(4)中基质培养土的基质是由珍珠岩、蛭石、腐殖土按体积比为1：1：0.5配制。
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