苯酚硫酸法测多糖含量资料

苯酚硫酸法测多糖含
一、硫酸苯酚法测多糖含量
1、试剂配制
1.浓硫酸:分析纯,95.5%
2.5%苯酚:取苯酚5g,置100ml容量瓶中,加蒸储水至刻度,摇匀后,置棕试剂瓶中,冰箱中冷藏储存备用。
3.标准葡聚糖(Dextran,瑞典Pharmacia)或分析纯葡萄糖。准确称取20mg经105c干燥至恒重的葡萄糖标准品于500ml容量瓶中,蒸储水溶解定容。
2、制作标准曲线
准确称取标准葡聚糖(或葡萄糖)10mgT250ml容量瓶中,加水至刻度,分别吸取0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8及0.9ml,各以蒸储水补至1.0ml,然后加入5啾酚1ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却,室温放教育与社会的关系
置20min以后于490nm测光密度,以1.0ml水按同样显操作为空白,横坐标为多糖微克数,纵坐标为光密度值,得标准曲线。
123456780标准葡锢糖溶液0.20.30.40.50.60.70.80.90 (mD
蒸储水(mD0.80.70.60.50.40.30.20.1  1.0 5啾酚(mD0.50.50.50.50.50.50.50.50.5浓硫酸(mD  2.5  2.5  2.5  2.5  2.5  2.5  2.5  2.5  2.5
0.0020.0030.0040.0050.006
《怪兽大学》葡萄糖标准曲线
3注意事项
(1)此法简单、快速、灵敏、重复性好,对每种糖仅制作一条标准曲线,颜
持久。
(2)制作标准线宜用相应的标准多糖,如用葡萄糖,应以校正系数0.9校正
八数。
(3)对杂多糖,分析结果可根据各单糖的组成比及主要组分单糖的标准曲
线的校正系数加以校正计算
经络诊断仪(4)测定时根据光密度值确定取样的量。光密度值最好在0.1——0.3之
问。比如:小于0.1之下可以考虑取样品时取2克,仍取0.2ml 样品液,如大 于0.3可以减半取0.1ml 的样品液测定。
(5)正常的反应溶液是深棕。糖越多颜越深。注意硫酸的纯度。空白的颜
南京副教授很深,说明你的空白中的苯酚被氧化了深红是酿(苯酚氧化生成)的颜颜
过深的话说明你的酚的难度过大,一般是5%且是没遇到你说的那么严重,不是深红的
m13引物
值光吸
y=54.353x+0.0018R 2=0.9
994
葡萄糖浓度(mg/ml)
00
.32「
o oO
做的好的时候颜很浅,颜深点也有肯能。
操作的时候有几条你需要注意的,这些对你的检测结果影响极大
1、苯酚需要重蒸,配制的苯酚溶液需要妥善保存。
2、样品检测的时候,向样品中加了苯酚溶液需要迅速摇匀,加入硫酸基本操作:硫酸沿壁加,最好能旋转比管,让硫酸能均匀的沿壁流下。
臭氧除臭3、加完硫酸需要立即摇匀,前提是塞子要配套,不怕烫热、冷水浴,要准

本文发布于:2024-09-23 01:23:54,感谢您对本站的认可!

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