准备工作
1. 洗净称量瓶，烘干
2. 取适量葡萄糖（粉末状）至称量瓶中，烘干，至恒重（105℃）
3. 紫外可见风光光度计开启，预热20min。
测定
1. 精确称取无水葡萄糖0.5000g，至100ml容量瓶稀释定容至，取出溶液1ml于50ml容量瓶，定容。
2. 50 ml容量瓶中分别取0ml、0.2 ml、广丰县教育局0.4 ml、0.6 ml、加密系统
0.8 ml、异丙基丙烯酰胺
1.0 ml、1.2 ml，至试管，每样需平行三次，分别加蒸馏水至2 ml、6%苯酚1 ml、浓硫酸61850 mms5 ml，振荡，置于沸水浴中加热15min，取出后在流动自来水中迅速冷却。然后紫外可见分光光度计在490nm处测吸光值。 浙江省苍南中学绘制标准曲线
以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制曲线，相关系数R平方值越接近1越好。
PS：
1. 其他样品多糖含量苯酚硫酸法测定，同如上所述的标准曲线测定方法，只需将不同量的葡萄糖溶液改为“加入1 ml亚硝酸盐氮样品（多糖溶液）、1 ml蒸馏水、6%苯酚1 ml、浓硫酸5 ml”，其他操作不变。
2. 使用浓硫酸、苯酚注意安全。
多糖得率(%)=×100
采用硫酸-苯酚法[1]，将干燥的多糖溶于蒸馏水中，定容于100ml容量瓶中，用移液管吸取2ml样品装入大试管中，再往里加入6%苯酚用力冲入大试管中,摇匀，最后吸取5ml浓硫酸用力冲入大试管中，摇匀。另取2ml蒸馏水同上操作。加入苯酚和浓硫酸进行比反应，作为空白对照，30min后，用721型分光光度计于490n处下测吸光度值，并记录数据[8]。
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