摘要： 本文综述了从新鲜胡萝卜中提取分离β-胡萝卜素和番茄红素的原理及方法，并且介绍了β-胡萝卜素和番茄红素的理化性质、化学结构以及生理功能。同时就该实验做了一定的分析。
关键词：番茄红素，β—胡萝卜素，提取，分离，测定
一．文献综述
多种研究表明：摄入富含类胡萝卜素的果蔬能降低人某些癌症的发病率。番茄红素是人类血浆和组织中重要的类胡萝卜素，是类胡萝卜素中最有效的单线态氧淬灭剂，在体内具有抗氧化、防备和抑制癌症、抑制诱变、保护心血管、防治白内障、调理机体免疫力等功能。番茄红素的抗氧化作用包括猝灭单线态氧、消除自由基以及与其它氧化剂协同抗氧化作用等。其猝灭单线态氧的能力最强，是目前抗氧化剂β-胡萝卜素的2～3倍，维生素E的100倍，番茄红素可以通过猝灭单线态氧预防脂类过氧化反应，保护细胞免受自由基的损伤。
1、番茄红素的国内外研究历史
1873年，Hartsen最早从Tamus communis L.中分离得到深红的番茄红素结晶。1875年，Millardat从番茄中获得一种含有番茄红素的粗提物，当时命名为Solanorubin。1913年，Dugger根据它对生长条件的影响，又把它命名为lycoperison。而Schunck（1930年）的“lycopene”名称（中文即番茄红素）一直沿用至今。
1.1国外对番茄红素的研究现状
1989年，Masic发现番茄红素在所有类胡萝卜素中对单线态氧的猝灭速度最高；1991年，Campbell发现肝癌患者的肝脏中番茄红素含量较低；1994年，Franceschi发现消化道癌的发生与番茄红素的摄入有关。随后，对番茄红素的功能的研究成为一大热点。1995年～2003年与番茄红素有关的报道达800多篇，内容涉及番茄红素的吸收、运输及新陈代谢的动力学；番茄红素与癌症、心脏病及其他多种疾病的关系；番茄红素的提取、测定及番茄产品的开发研究等。
1.2国内对番茄红素的研究现状
对番茄红素的研究在2000年以前鲜有报道，近三年骤然升温，出现了大量综述类文章，内
容包括：番茄红素的性质和提取方法；番茄红素及其研究进展；番茄红素的保健功能的研究现状；番茄红素生理活性的研究进展；番茄红素及其生产应用研究；番茄红素的生产工艺研究进展；番茄红素分离与分析的研究进展等。
2类胡萝卜素提取分离的国内外研究进展
β—胡萝卜素是类胡萝卜素之一，也是橘黄脂溶性化合物，它是自然界中最普遍存在也是最稳定的天然素。自1831年Wachenroder从胡萝卜根中分离结出晶状碳水化合物类的素并以“胡萝卜素”命名至今，已有不少国内外学者对类胡萝卜素进行了研究。邓宇等对番茄中番茄红素的提取进行了初步研究，认为用氯仿作提取溶剂、当料液质量比为1∶5浸提时间为7ｈ浸提温度为35℃时浸取效果最好。适当增加浸提次数及搅拌速度有利于提高番茄红素的提取量。吉宏武等人以活化的硅镁型吸附剂与赛力特硅藻土(1:1)作填料以已烷-丙酮-甲醇不同组成与比例的流动相洗脱柱温20℃为条件采用混合溶剂提取和自动柱层析分离方法和正已烷-丙酮-乙醇-甲苯(10:7:6:7)与40%甲醇氢氧化钾浸提皂化12h的制备方法制备了4种类胡萝卜素——β-胡萝卜素、叶黄质、堇黄质、新黄质。类胡萝卜素在硅胶G薄层上分离时由于不同类胡萝卜素的末端基团的不同因此具有不同的谱行为。彭光华等人用薄层
普法对枸杞中的类胡萝卜素进行了分离获得了玉米黄素、β-隐黄素和β-胡萝卜素。胡晓丹等人对金盏菊花类胡萝卜素的最佳提取工艺进行了研究，结果表明，用石油醚：丙酮（１：１、Ｖ／Ｖ）、料液比为１：２５（ｇ／ｍｌ）、４５℃提取１小时，反复４次，效果最佳。从所报道的文献分析得出，类胡萝卜素的提取多采用有机溶剂法。随着谱法的发展，国外科技工作者开始采用HPLC技术来分析类胡萝卜素，但是对其定量测定未做深入研究，分离制备方面的报道也较少。
二．仪器和试剂
仪器三角瓶（50ml）、分液漏斗（150ml）、蒸馏瓶（50ml）、普通蒸馏装置（或减压蒸馏装置）、漏斗、谱柱、硅胶薄层板、量筒、烧杯、层析缸。试剂胡萝卜、丙酮、石油醚（bp30~60℃）、硅胶（层析用，200~300 目）、无水硫酸钠、石油醚（bp60~90℃）、丙酮：石油醚（1：9）（V/V）。
三．实验方案
1、含类胡萝卜素石油醚溶液的制备
将新鲜胡萝卜洗净、擦干,切去尾部，切碎。称取碎鲜胡萝卜【1】10g 于小研钵中,研碎。碎胡萝卜移至50mL 三角烧瓶中，每次用丙酮10mL 萃取2 次，再用石油醚（bp30~60℃）萃取固体两次，每次10mL。把石油醚溶液加到丙酮液中。在分液漏斗中将混合液与50mL饱和氯化钠溶液【2】振荡，分去下层，用蒸馏水洗涤上层液两次，每次50mL，分去水，用无水硫酸钠干燥石油醚液（约1h）,把混合液倒入50mL 圆底烧瓶中，热水浴加热蒸馏，除去溶剂，得固体。在制得的固体物加入3mL 石油醚（bp60~90℃）拌硅胶1g，在通风橱内抽干，得黄硅胶颗粒，待上柱。
2、装柱和分离
取20cm*1cm 谱柱一根，垂直装置，以50ml 三角烧瓶作洗脱液的接受器。用镊子取少许脱脂棉【3】放于干净的谱柱底部，轻轻塞紧，再在脱脂绵上盖一层厚0.5cm 的海石砂（或用一张比柱内径略小的滤纸代替），关闭活塞，向柱内倒入石油醚（bp60－90℃）至约为柱高的3／4 处，打开活塞，控制流出速度为1 滴/s。通过一干燥的玻璃漏斗慢慢加入层析硅胶。用洗耳球轻轻敲打柱身，使填装紧密。当装填到3/4 时，再在上面加一层0.5cm 厚的海石砂，操作时一直保持上述流速，注意不能使液面低于砂子的上层。当液面流至离
海石砂面1cm 时，立即从玻璃漏斗加入已制备好的含胡萝卜素的黄硅胶，随后用0.5ml 石油醚洗下管壁的硅胶，如此连续2—3 次，直至洗净为止，然后在谱柱上装上滴液漏斗，用石油醚（bp60－90℃）作洗脱剂进行洗脱，洗1 滴/s。当有一黄的谱带分出，待黄组分绝大部分洗出时，把洗脱剂换成1：9 丙酮一石油醚（bp60－90℃）混液作洗脱剂进行洗脱，控制流出速度如前（这混液洗脱剂有助于混合物中极性较大的组分移动），又可分出两个黄组分。在45—90min 内，柱中物料将全部洗脱出来。观察这些物料通过柱子的移动情况。在三角烧瓶中收集3 份洗出液。用纸谱、薄层谱对各段洗出液进行谱分析。
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