常用溶液的配制
一、常规溶液
(一)1/15mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution，PBS)
甲液：1/15mol/L Na2HPO4溶液
Na2HPO4 9.465g
蒸馏水 加至1000ml
乙液：l/15mol/L KH2PO4溶液
KH2P04 9.07g
蒸馏水 加至1000m1
分装在棕瓶内，于4℃冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需pH的缓冲液,见下表: pH | 甲液ml | 乙液mI | pH | 甲液ml | 乙液mI |
5.29 5.59 5.91 6.24 6.47 6.64 | 2.5 5.0 10.0 20.0 30.0 40.0 | 97.5 95.0 90.0 80.0 70.0 60.0 | 6.81 6.98 7.17 7.38 7.73 8.04 | 50.0 60.0 70.0 80.0 90.0 95.0 | 50.0 40.0 30.0 20.0 10.0 5.0 |
| | | | | |
(二)0.3％台盼兰染液
称取台盼兰(Trypan blue)粉0.3克，溶于100ml生理盐水中，加热使之完全溶解，用滤纸过滤除渣，装入瓶内室温保存。 (三)0.5％酚红指示剂
酚红 0.5g
0.1N(0.4％)NaOH 15ml
双蒸水 85ml
将0.5克酚红置研钵中，缓漫滴加0.1NNaOH溶液边加边磨，并不断吸出已溶解的酚红液，直至全部溶解，然后加入85ml双蒸水，颜为深红，经粗滤纸过滤后使用，室温保存。 (四)5.6％NaHCO3溶液
称NaHCO35.6克，溶于100ml蒸馏水中，室温保存即可(如需要也可10磅15分钟高压灭菌，4℃冰箱保存)
(五)10μg／ml秋水仙素
秋水仙素 lOmg
生理盐水 100ml
装入茶瓶中，为贮备液，4℃冰箱中保存。甩时取贮备液1ml加生理盐水9ml即可。
(六)0.4％KCl-0.4％柠檬酸钠低渗液
将0.4％KCl和0.4％柠檬酸钠两液等量混合即可，室温保存。
(七)2％柠檬酸钠
称取柠檬酸钠2克，加100ml双蒸水即可，室温保存。
（八）0.2％次甲基兰染液
称次甲基兰(Methylene blue)0.2克，加蒸馏水100ml，室温保存。
(九)0.5％醋酸洋红(Aceio Carmine)染液
洋红 lg
醋酸 90ml
蒸馏水 110ml
将90ml醋酸加入110ml蒸馏水煮沸，然后将火焰移去，立即加入1克洋红，使之迅速冷却过滤，加饱和氢氧化铁(媒染剂)水溶液数滴，直到呈葡萄酒。室温保存。加铁使洋红沉淀于组织而着。此染液室温存放时间越长效果越好，室温保存。
(十)1％甲苯胺兰(Toluidine blue)
称取甲苯胺兰1克，加蒸馏水lOOml。
(十一)1/3000中性红染液
取中性红(Neutral red)0.1克，加蒸馏水300ml。室温保存。
(十二)Giemsa染液
1．贮备液
Giemsa粉 1g
纯甘油 66ml
甲醇 66ml
先将Giemsa粉置于研钵中加少量甘油，充分研磨，呈无颗粒的糊状。再将全部甘油加入，放入56℃温箱中2小时，然后加入甲醇，保存于茶瓶中。一般两周后使用为好。
2．工作液
临用时将贮备液与pH6.8的磷酸缓冲液按照1:20混合。
(十三)埃利希(Ehrlich)苏木精染液
苏木精 1.0g
乙醇 50ml
醋酸 5ml
甘油 50ml
硫酸铝钾 5g
蒸馏水 50ml
将苏木精溶于少量的乙醇中，再加醋酸并搅拌，以加速其溶解。当苏木精溶解后将甘油加入并摇动容器，同时加入其余的乙醇；硫酸铝钾需研磨并加热，然后溶解于蒸馏水中，将其一滴滴地加入上边的溶液，并不断摇动，此液配好后，将瓶口用纱布盖好，置通风处，经常摇动以加速其成熟，成熟约需4周左右，成熟的染液为深红。
二、细胞化学和细胞组分分离溶液
(一)M一缓冲液
眯唑(Imidazole) 3.404g
KCI 3.7g
MgCl2·6H2O 101.65mg
ECTA 380.35mg
EDTA 29.224mg
巯基乙醇 0.07ml
甘油 297ml
蒸馏水 加至1000ml
用lNHCl调pH至7.2室温保存。
(二)2％Triton X一100溶液
量取2mlTriton X一100(聚乙二醇辛基苯基醚)液，加M缓冲液98ml即可。
（三）0.2％考马斯亮兰R-250染液
甲醇 46.5ml
醋酸 7.0ml
考马斯亮兰 0.2g
蒸馏水 加至100ml
(四)A．0.1％碱性固绿染液(pH8.0～8.5)
1．0.1％固绿水溶液
固绿(Fast green) 0.1g
蒸馏水 100ml
2．0.05％Na2C03溶液
Na2C03 50mg
蒸馏水 100ml
用时按1:1体积混合即可。
B．0.1％酸性固绿染液(pH2.2)
1．0.1％固绿水溶液。
2．mol／L×75盐酸液
盐酸(比重1.19)0.109ml加蒸馏水至100ml
用时按l:1混合。
(五)甲基绿一哌咯宁染液
1.1mol／L醋酸缓冲液(pH4.8)：
(1)醋酸 17ml
蒸馏水 加至200ml
(2)醋酸水 13.5g
蒸馏水 加至lOOml
用时分别取两液40ml、60ml混匀即可。
2．甲基绿一哌咯宁(methyl green—Pyrcnln)
5％哌咯宁水溶液 6ml
2％甲基绿水溶液 6ml
蒸馏水 16ml
lmol/L醋酸缓冲液 16ml
lmol/L醋酸缓冲液临用时才可加入染液中。
(六)Schiff试剂
将碱性品红0.5克加入lOOml沸水，持续煮沸5分钟，并随时搅拌，待冷却到50℃时过滤到棕瓶中，加1N HC11O毫升，冷却至25℃时加入1克NaHSO3，此时需很好的振荡，避光过夜。次日取出(呈淡黄)加0.25克活性炭剧烈振荡1分钟。过滤后即得Schiff试剂。避光低温保存。
(七)联苯胺混合液
联苯胺(4.4 Diamino benzidine) 0.2g
95％乙醇 lOOml
3％过氧化氢 2滴
此液临用时配制。
(八)l％番红水溶液
番红(Safranin) 1.0g
蒸馏水 100ml
(九)1％SDS(十二烷基硫酸钠Sodium dodecyl sulfate,SDS)
SDS 10g
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