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冻融法制备DNA功能化的金纳米颗粒及其在层析试纸条上的应用

第39卷第3期黄冈师范学院学报V o l.39N o.3 2019年6月J o u r n a l o fH u a n g g a n g N o r m a lU n i v e r s i t y J u n e2019

冻融法制备D N A功能化的金纳米颗粒

及其在层析试纸条上的应用

吕思嘉，文为，张修华，王升富

(湖北大学化学化工学院，有机化工新材料湖北省协同创新中心，有机功能分子合成与应用教育部重点实验室，武汉430062)

澳大利亚电影糖果摘要简单㊁高效地制备D N A功能化的金纳米颗粒是构建金标层析试纸条生物传感器的关键㊂本文采

海乐冰箱用冻融法简单㊁快速地制备了D N A功能化的金纳米颗粒，并以此为金标构建了一种快速㊁低成本的能用于龙门山大断裂

乙型肝炎病毒基因检测的层析试纸条生物传感器㊂该层析试纸条的检测原理基于核酸杂交反应，将冻融法制

备的D N A功能化的金纳米颗粒与目标物一起加入到该试纸条上，在溶液流经整个测试条带后，纳米金颗粒

将逐渐在测试区积累，产生肉眼可见的带，然后通过便携式试纸条读条器读取测试线给定区域上的信号强

度进行定量检测㊂该层析试纸条有望用于生物标志物监测和临床即时检测，特别是在设备资源相对贫乏的条

件下，具有较大的应用前景㊂

关键词冻融法；金纳米颗粒；层析试纸条；可视化检测

金山手机卫士塞班中图分类号 O657文献标志码 A 文章编号1003-8078(2019)03-0037-07

收稿日期2019-03-05d o i10.3969/j.i s s n.1003-8078.2019.03.08

作者简介吕思嘉，女，湖北随州人，硕士研究生，主要研究方向为生物层析试纸条㊂

通讯作者王升富，男，湖北黄冈人，教授，博士生导师，主要研究方向为生物电分析㊁电化学传感器㊁层析试纸

核酸杂交

条等快速分析㊂

基金项目国家自然科学基金面上项目(21475032)㊂

NORWALP r e p a r a t i o no fD N Af u n c t i o n a l i z e d g o l dn a n o p a r t i c l e s b y f r e e z e-t h a w m e t h o d

a n d i t s a p p l i c a t i o no n l a t e r a l f l o wt e s t s t r i p s

LÜS i-j i a,W E N W e i,Z H A N GX i u-h u a,W A N GS h e n g-f u

(H u b e i C o l l a b o r a t i v e I n n o v a t i o nC e n t e r f o rA d v a n c e dO r g a n i cC h e m i c a lM a t e r i a l s,M i n i s t r y o fE d u c a t i o nK e y L a b o r a t o r y f o r t h eS y n t h e s i s a n dA p p l i c a t i o no fO r g a n i cF u n c t i o n a lM o l e c u l e s,C o l l e g e o fC h e m i s t r y&C h e m i c a l E n g i n e e r i n g,

H u b e iU n i v e r s i t y,W u h a n430062,C h i n a)

A b s t r a c t S i m p l ea n de f f i c i e n t p r e p a r a t i o no fD N Af u n c t i o n a l i z e d g o l dn a n o p a r t i c l e si st h ek e y t oc o n s t r u c ta g o l d-l a b e l e d l a t e r a l f l o wb i o s e n s o r.I n

t h i s p a p e r,D N Af u n c t i o n a l i z e d g o l dn a n o p a r t i c l e sw e r e p r e p a r e d s i m p l y a n d r a p i d l y b y

f r e e z e-t h a w m e t h o d,t h e nw e r eu s e d t o p r e p a r e da l a t e r a l f l o wn u c l e i c a c i db i o s e n s o r f o r d e t e c t i o no f t h e h e p a t i t i sBv i r u s

g e n e.T h e p r i n c i p l e o f t h i sm e t h o dw a sb a s e do nn u c l e i c a c i dh y b r i d i z a t i o n r e a c t i o n.T h e t h i o l-m o d i f i e dD N A w a s r a p i d l y l i n k e do n t h e s u r f a c e o f t h e g o l dn a n o p a r t i c l e sb y f r e e z e-t h a w m e t h o d,t h e nw a sa d d e dt ot h e t e s t s t r i p s e n s o r t o g e t h e r w i t h t h e t a r g e t.A f t e r t h e s o l u t i o n f l o w s l a t e r a l l y t h r o u g h t h e e n t i r ed e t e c t i o na r e a,t h e g o l dn a n o p a r t i c l e sw i l l g r a d u a l l y a c c u m u l a t e i n t h e t e s t l i n e,p r o d u c e a v i s i b l e c o l o r b a n d,a n d t h e nu s e t h e i n s t r u m e n t t om e a s u r e t h e s i g n a l i n t e n s i t y o n t h e t e s t l i n e o f t h e g i v e na r e a a s t h eb a s i s f o r q u a n t i t a t i v e a n a l y s i s.T h i sm e t h o d i s a p o t e n t i a l l y v a l u a b l e t o o l f o r c l i n i c a l a p p l i c a t i o n s a n db i o m e d i c a l d i a g n o s t i c s,e s p e c i a l l y i n l i m i t e d r e s o u r c e e n v i r o n m e n t s.

K e y w o r d s f r e e z e-t h a w m e t h o d;g o l dn a n o p a r t i c l e s;l a t e r a l f l o wb i o s e n s o r;v i s u a l d e t e c t i o n

即时检验(P O C T)是临床分析㊁食品安全㊁环境监测等领域最常用的诊断方法㊂与传统的集中式实验室相比,P O C T方法成本低廉，能在短时间内提供结果㊂目前，基于层析试纸条生物传感器(L F B)的P O C T已广泛应用于检测设备资源有限条件下或非实验室环境中的定性㊁半定量以及一定程度上的定

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