黄曲霉毒素M1最近算是成大明星了,准备写个黄曲霉毒素M1分析方法
总结,和大家一起探讨(持续更新)!1、结构及理化性质达尔富尔
不管三七二十一,还是先上个图:先开个头,吃个饭回来写……
为什么说黄曲霉毒素M1,都出现在与动物相关的产品中?
黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1在动物组织内的代谢产物,并能够进入乳汁(牛奶?),因此大家看到的检测黄曲霉毒素M1都是检的“动物组织:如肝肾、乳腺”以及乳及其制品等”。
再来一个黄曲霉毒素B1代谢途径图,黄曲霉毒素B1在体内羟化形成黄曲霉毒素M1(左上,相机不好,照的效果不太好,大家见谅,有空补一个好点的图)。新图如下:
2、黄曲霉毒素M1的相关限量标准
食品中的限量标准以GB 2761—2011为准:塘沽二中心小学规定如下:注:上述限量的检测方法
:婴幼儿配方食品按GB 5009.24 规定的方法测定,乳及乳制品
按GB 5413.37(GB 541337-2010 食品安全国家标准
b1乳和乳制品中黄曲霉毒素M1 的测定)规定的方法测定。
3、分析方法
黄曲霉毒素M1的分析方法主要包括:薄层谱法;酶联免疫吸附法,免疫亲和柱净化荧光光度法,液相谱法,液质联用法等。
3.1 薄层谱法:
GB 5009.24-2010 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素M1和B1aeviou的测定(用于替代“GB/T 5009.24-2003 食品中黄曲霉毒素M1与B1的测定”)为薄层谱法:
适用范围:牛乳及其制品、奶油及新鲜猪组织(肝、肾、血及瘦肉)等食品中黄曲霉毒素M1 与B1 的测定。
原理:样品经提取、浓缩、薄层分离后,黄曲霉毒素M1 与B1 在紫外光(波长365nm)下产生蓝紫荧光,根据其在薄层上显示荧光的最低检出量来测定含量。
3.2 酶联免疫吸附法ELISA适用范围:c大调的城ELISA适用于乳,乳粉和乳酪中黄曲霉毒素M1淮北师范大学学报含量的测定。原理:黄曲霉毒素M1偶联物包被在酶标板的小孔中,将含有黄曲霉毒素M1的样品或标准液和抗M1的抗体加入到小孔中,此事固相包被的黄曲霉毒素M1和样品、标准品中游离的黄曲霉毒素M1竞争性地与抗体进行反应。反应完全之后,用稀释过的清洗液洗小孔,将未反应的物质冲掉。再在小孔中加入过氧化物酶,温育后再次清洗,加入底物溶液,温育后产生蓝,加入停止液,终止颜反应,颜变为黄,用酶标仪
在450nm处测定颜的强度,黄曲霉毒素M1的浓度与颜强度成反比关系。3.3 免疫亲和柱净化高效液相谱法适用范围:乳,乳粉,低脂乳,脱脂乳,低脂乳粉,脱脂乳;乳粉中的黄曲霉毒素M1的最 低检测限大约是0.1μg/kg,乳中的最低检测限大约是0.01μg/kg。
原理:亲和柱内含有的黄曲霉毒素M1特异性单克隆抗体交联在固体支持物上,含有黄曲霉毒素M1的样品通过免疫亲和柱时,抗体选择性的与黄曲霉毒素M1(抗原)结合,形成抗原抗体复合体。用水洗柱除去柱内杂质,然后用洗脱剂洗脱吸附在柱上的黄曲霉毒素M1,收集洗脱液。HPLC-FLD测定。
3.4 C18,硅胶柱净化高效液相谱法
AOAC International1986年首次通过了乳液中的AFM1及AFM2采用高效液相谱法作为公认定检测方法。
原理:乳中的黄曲霉毒素M1,M2经过C18小柱提取,用乙醚淋洗至硅胶柱,用二氯甲烷-乙醇溶液淋洗,黄曲霉毒素M1以及三氟乙酸(TFA)衍生。用具有FLD的HPLC检测并与标品(三氟乙酸衍生)进行比较定量。