常用培养基及添加剂的配制

1.牛心脑浸汁-辅助琼脂:(BHI-S)
BHI 琼脂100mL
氯化血红素-维生素K1 1mL
脱纤维蛋白血(兔血)5-10mL 2.胰蛋白水解物-大豆琼脂(TS)
胰蛋白水解物(或胰蛋白胨)  1.5g
大豆胨0.5g
Nacl 0.5g
酵母提取物0.5g
盐酸半胱氨酸液0.4mL
琼脂  2.0g
蒸馏水加至100mL 3.Gifu厌氧培养基:(GAM)
胰蛋白胨  1.0g
大豆胨0.3g
多价蛋白胨  1.0g
酵母提取物0.5g
肝浸汁10mL VPI盐溶液0.2g
牛肉浸膏5mL
盐酸半胱氨酸0.4mL 旈基乙醇酸钠0.03g 葡萄糖  1.0g 琼脂  1.8-2.0g 刃天青(0.1%)0.5g 蒸馏水加至100mL 4.Rogosa 乳杆菌选择培养基(LS)
高压变压器胰蛋白水解物(或胰蛋白胨)  2.0g
酵母提取物  1.0g
琼脂4g别笑 我是高考零分作文
葡萄糖  4.0g (储存液)
磷酸二氢钾  1.2g 12g
枸橼酸三铵0.4g 4g
硫酸镁(MgSo4 7H2O)  1.0g 10g
硫酸锰(MnSo4 4H2O)0.4g 4g
硫酸亚铁(FeSo4 7H2O)0.08g 0.8g
醋酸钠(CH3COONa 3H2O)(乙酸钠) 5g 50g
冰乙酸(99.5%)0.264mL    2.64mL
聚山梨酯-80 0.2g 2g
DH2O 200mL 200mL(每100mL培养基加10mL)
5.TPY培养基
胰蛋白胨  3.0g
酵母提取物0.8g
葡萄糖  2.0g
磷酸二氢钾  1.2g
K2HPO4 3H2O 0.4g
NaCO30.4g
NaCl 0.4g
DH2O 200mL
琼脂  2.5g /200mL
6.普通血琼脂培养基(BA)
牛肉浸膏(0.5-1.0)g
蛋白胨  1.0g
NaCl 0.5g
K2HPO4  2.0g
酵母提取物0.5g
葡萄糖  1.0g
琼脂  1.8g
蒸馏水加至100mL
7.轻唾培养基(MS)
胰蛋白胨  1.0g
示胨0.5g
蔗糖3-5g(可根据需要将蔗糖量增至20g)葡萄糖0.1g
K2HPO4 3H2O 0.53g
琼脂  2.0g
0.1%曲利本蓝7.5mL哈尔滨 雾霾
0.1%结晶紫0.8mL
蒸馏水加至100mL
8.轻唾-杆菌肽琼脂(MSB)
MS琼脂(蔗糖含量为20%)100mL
杆菌肽溶液(200U/mL)0.1mL
灭菌MS琼脂50℃左右时加入杆菌肽溶液,混匀倒板
9.轻唾-磺胺二甲嘧啶琼脂(MS磺胺琼脂)
嘧霉胺MS琼脂100mL
*磺胺二甲嘧啶(5%)  1.0mL
*1%的亚碲酸钾溶液0.28mL
灭菌MS琼脂冷却至25℃时加入*
10.TYCSB琼脂
胰蛋白酶水解物  1.0g
酵母提取物0.5g
盐酸半胱氨酸溶液0.4g
K2HPO4 3H2O 0.53g
蔗糖20g
琼脂2g
DH2O 100mL
灭菌后冷却至50-55℃时加入杆菌肽溶液(200U/mL)0.1mL,混匀倒板11.Rogosa 乳杆菌选择培养基(LS)
胰蛋白水解物(或胰蛋白胨)  1.0g
酵母提取物0.5g
磷酸二氢钾0.6g
枸橼酸三铵0.2g
正二十面体
葡萄糖  2.0g
硫酸镁(MgSo4 7H2O)0.5g
硫酸锰(MnSo4 4H2O)0.2g
硫酸亚铁(FeSo4 7H2O)0.04g
醋酸钠(CH3COONa 3H2O)(乙酸钠)    2.5g
冰乙酸(99.5%)0.132mL
聚山梨酯-80 0.1g
琼脂  1.8g
DH2O 100mL
LS盐溶液的组成:
MgSo4 7H2O    5.57g
MnSo4 2H2O    1.20g
FeSo4 7H2O 0.34g
DH2O 50 mL
混合上述成分并加热使之溶解。高压(121℃)灭菌15分钟备用。100mL乳杆菌选择培养集中加入0.5mL LS盐溶液即可
12.放线菌分离和富集培养基:
1)Beigheor-CoIman 培养基:(FC)
BHI 基础培养基100mL
聚乙烯吡咯烷酮  1.0g
盐酸半胱氨酸0.4mL
琼脂  1.8g
灭菌冷却至50℃左右加入无菌氟化钠溶液(25g/L)1mL,硫酸粘菌素溶液(1g/L)0.5mL,无菌马血清5mL,混匀倒板
2)明胶-甲硝唑-硫酸铬选择培养基(GMS)
营养明胶琼脂100mL
刃天青
硫酸铬(CdSO4 8H2O)溶液(2g/l)  1.0mL
甲硝唑(1g/l)1.0mL
将上述成分(除甲硝唑外)混合并加热使之溶解,高压(121℃)灭菌15min,待冷却至50℃左右加入无菌甲硝唑溶液1mL,混合均匀后倾注于平板。
3)Tarozzi肉汤培养基
牛肉浸汁50mL
蛋白胨  1.2g
NacL 0.3g
K2HPO40.2g
混合上述成分并补充蒸馏水(加热至80℃左右)至100mL,煮沸10min,冷却后校正PH值为7.5,用罗素暗管(15mm*150mm分装,每管8mL,然后加入0.1%的硫基乙醇酸钠溶液2mL 和新鲜的豚鼠或牛肝切割片(2cm1cm 1cm 大小并经盐水洗净)。最后将装有上述物质的螺旋管高压(121℃)灭菌15min后备用
13.韦荣球菌选择琼脂:(VS)
胰蛋白酶水解物0.5g
酵母提取物0.1g
硫基乙醇酸钠0.075g
50%的乳酸钠溶液(2.0-2.5)mL
聚山梨酯-80 0.1g
琼脂  2.0g
DH2O 100mL
混合上述成分并加热使之溶解,待冷却后调PH为7.8,115℃20min或121℃ 15min 高压灭菌。待冷却至50-55℃时,加入万古霉素溶液(7.5mg/L)1mL和脱纤维兔血或马血5mL混合均匀并倾注平板备用
说明:
1)不含万古霉素和琼脂的乳酸盐培养基可作为韦荣球菌的富集培养基
2)用新霉素(100mg/l)代替万古霉素加入乳酸盐琼脂中,组成韦荣球菌-新霉素琼脂,可

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