来源：第三军医大学大坪医院病理科
作者：毛成毅，杜娟，肖华亮，李增鹏
冰冻切片原理：组织被冷冻时，组织中的水变成冰，而在这种状态中，组织变坚硬的。冰冻块的硬度可通过改变组织温度来改变。降温会使组织块更加坚硬，提高温度使组织变软。大多数非脂肪不固定组织的切片最好在-20到-25℃制作。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便，多应用于手术中的快速病理诊断。 亲密关系的变革
冰冻切片的制作过程中，常有许多因素影响其质量，并进一步影响结果的观察和分析，甚至会影响诊断，造成无法挽救的后果，对此我们经过比较及总结得出如下经验。
冰冻温度及组织冰冻的时间对冰冻切片质量的影响是至关重要的。
冰冻温度对细胞的影响：
温度太低，细胞容易收缩，温度太高，细胞容易膨胀，结构不清，模糊，影响冰冻诊断。充分利用冷冻台、冰锤及速冻头的功能。
将放有新鲜组织的冻托放在冻台上然后压上压板，等组织冻住后，轻敲压板，冻有组织的冻托就会下来，然后进行切片。
在实际工作中，一般冰冻机温度设定如下：
冻台温度：-18℃；
工作温度：-18℃；
冻头温度：-20℃。
抓狼联盟（一）乳腺组织的冰冻切片
乳腺组织（纤维腺瘤，间质胶原化）含纤维组织较多，冰冻切片染时容易脱片。
1、使用免疫组化防脱载玻片进行贴片，冰冻切片脱片率明显下降。
2、乳腺含脂肪组织比较丰富，在冰冻切片时不容易成片或展片。
3、乳腺组织在取材时，取材医生应尽量将病变周围的脂肪组织剔除。
4、当遇到脂肪组织较多，又无法剔除时，建议使用液氮。
5、充分利用冰冻切片机（速冻台）的功能。
（二）子宫肌瘤的冰冻切片
1、温度的控制：
冷冻温度是冰冻切片的关键；
冷冻室温度设定-17~-22度；
控制肌瘤组织冷冻时间，4/5组织冻好就可以；
冷冻过头时拿出冷冻室解冻软化一下。
中国学习网
2、包埋剂(OCT)的使用：
冻头中心滴好OCT粘好组织块，再在周围加固一圈；
虽然有可能加长了冷冻时间，但可以将组织牢牢固定住；
组织切片修片时不能太厚，要用慢进；
防止修片和切片时产生的抖动。
3、刀片和切片：
刀片的锋利程度会影响肌瘤的制片；
与常规石蜡切片一样，先用旧刀口粗修，再用新刀口摇片；
大荒神舞修片时只要组织完整就可以，因为越离冻头近组织块越硬；
修片要慢避免控制推头不稳造成组织擦板；
组织块进刀的方向减少阻力。
（三）脑组织冰冻切片
1、切片中的两大问题
在制片过程中，很多因素均可影响冰冻制片质量和正确诊断，冰晶的形成就是主要因素之一。当冰晶溶解形成空泡时，会使细胞内结构移位而造成误诊。冰晶也可以引起细胞间针状裂隙，以及空泡挤压组织，导致组织正常结构改变。特别是冰晶小而多时，对组织结构损害更大，可以导致医生们无法及时地为临床提供准确的病理诊断依据。
（2）冰晶的形成
生物体是由细胞构成的，细胞中水分约占80%～90%，水在各种组织中含量最多。因为水在结冰时因氢键的交联而膨胀，所以待检的标本在冷冻过程中，水份很容易形成冰晶，使切片出现大量冰晶孔隙以及大小空泡，造成冷冻假象。在含水量较多的组织中更易发生。
2、冰晶产生的冷冻假象
一些含水量特别多的组织像脑组织、肾脏组织等冷冻时很容易产生冰晶。当组织中的水分凝固时形成球形的冰晶，挤压纤维组织条而产生泡沫样的形状，使切片出现大量冰晶孔隙以及大小空泡的冷冻假象。在有些冰冻切片中的细胞胞浆和细胞核里含有较多的空泡、空洞，也是冰晶造成的一种冷冻假象。
3、冰晶的生长速率对组织结构的影响
冰晶的大小与其生长速率成正比，而与形成速率（成核率）成反比，也就是冰晶形成的数量愈多则愈小，对组织结构影响也愈严重。有文章认为冰冻开始时，冰晶形成速率较慢，以后逐渐增加，其临界温度为-3.3℃。从-3.0℃降至-4.3℃之间，形成速率急剧增加，然后再减慢。因此，在制片时首先必须做到组织在极短的时间内骤冷速冻，才能保证镜下观察时没有冰晶干扰，组织结构才能清晰，细胞形态才能完好。
4、怎样防止与减少冰晶形成？
相关系数矩阵怎样才能做到组织在极短的时间内骤冷速冻呢？基于上述理论，骤冷速冻的关键在于：取
材的厚度、组织冷冻时的温度和时间、以及取材外部环境等。据此，可以采取以下措施，减少冰晶的形成。
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
关于我们
投诉建议