1. 烘⽚：60℃烘⽚0.5-2⼩时。
2. 脱蜡⽔化：烘⽚结束后，⽯蜡切⽚依次置于以下试剂中：
1）⼆甲苯I：30 min
2）⼆甲苯II：30 min
3）100%⼄醇：10 min
4）95%⼄醇：10 min
5）80%⼄醇：10 min
6）70%⼄醇：10 min
7）⾃来⽔冲洗10 min
3. 抗原修复-微波炉抗原热修复法（可选）：将组织切⽚转移到沸腾的EDTA-Tris 溶液中使其完全浸透。
低⽕加热⼀分钟，停⽌加热并静置于微波炉中10min。然后再低⽕加热3-4分钟，停⽌加热，使EDTA-Tris 溶液在室温⾃然冷却。 4. PBST漂洗3次：去除残留并浸泡在PBST中，在摇床中以40 RPM漂洗5 min，重复3次。 5. 阻断内源过氧化物酶：⽤3%-5% H2O2室温孵育10min。 6. PBST漂洗3次：去除残留并浸泡在PBST中，在摇床中以40 RPM漂洗5 min，重复3次。
7. 封闭：去除残留，⽤5%BSA室温孵育20 min。
8. 孵育⼀抗：去除残留，⽤已稀释⾄⼯作液的⼀抗4℃孵育过夜（推荐使⽤）或37℃孵育60min。
连云港黄海机械厂9. 复温：将切⽚从4℃移⾄室温静置约需20min。
四平师范学院10. PBST漂洗3次：去除残留并浸泡在PBST中，在摇床中以40 RPM漂洗5 min，重复3次。
组织切片
11. 孵育HRP标记的⼆抗：去除残留物，⽤已稀释⾄⼯作液的⼆抗4℃孵育60min。
渝钛白12. PBST漂洗3次：去除残留物并浸泡在PBST中，在摇床中以40 RPM冲洗5 min，重复3次。被妖魔化的沙尘暴
13. 显⾊：使⽤DBA试剂盒（Cat # IS046）进⾏组织切⽚的显⾊。按照说明书混合试剂A和B，在切⽚上滴加适量新鲜配制的DBA溶液，室温孵育0.5~10min，直到出现棕⾊，⽤蒸馏⽔终⽌显⾊并清洗切⽚。
14. 苏⽊精复染，然后将组织切⽚晾⼲，滴上树脂，⽤盖玻⽚盖住组织部分，在显微镜下观察。
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