组织学常规制片技术中常见的有石蜡切片和冰冻切 片 两 种其中以石蜡切片最基本最 经 典最 广 泛而目前冰冻切片
因 简 便用时短等特点在临床上也倍受青睐 本 文 结 合 笔 者
多年的实践经验就石蜡切片与冰冻切片的制作技术论述如
下
石 蜡 切 片 制 作
石蜡切片法从取材固 定洗 涤 和 脱 水透 明浸 蜡包 埋
切 片 与 粘 片脱 蜡染 脱 水透 明封片等步骤一般需要
周 的 时 间但标本可以长期保存使用为永久性显微玻片标
本
固 定 固 定 液 的 种 类 很 多 甲醛是病理切片常规使
用 的 固 定 液不仅适用于常规 染 还可以用于组织学其
他 技 术 的 切 片 染 组织块一般不宜过大固定液的用量通
常 为 组 织 块 的 倍 左 右固定时间通常为数小时至
脱 水 为了减少组织材料 的 急 剧 收 缩应 进 行 从 低 浓 度
到高浓度递增的顺序进行梯度 脱 水常 从
直 至 纯 酒 精无 水 乙 醇 每次时间根据组织块 的 大 小 来
定常 为 数 小 时如不能及时进行各级脱水材 料 可 以 放 在水之镜
酒 精
透 明 二甲苯是石蜡的 溶 剂常 用 的 透 明 剂 通 常 将 组
织块置于纯酒精和二甲苯的混合液浸 再 转 入 纯 二 甲
苯 中 浸 浸时间则要根据组织材料块大小及 性 质 而 定 如 果
透 明 时 间 过 短则 透 明 不 彻 底石 蜡 难 于 浸 入 组 织透 明 时 间
过 长则组织硬化变脆就不易切出完整切片最 长 为
浸 蜡 蜡的温度不能太高比 蜡 的 熔 点 高 即 可蜡 熔
化后应在蜡箱内过滤掉杂质后使用浸蜡的时间由组织 块 大
小油 脂 性 确 定块小没有油脂的时间短些 块 大 有 油组织切片
脂 的 时 间 长 些
切 片 切片刀的锐利与否蜡块硬度适当都 直 接 影 响 切
片 质 量可用热水或冷水等方法适当改变蜡 块 硬 度 通 常 切
片 厚 度 为 可 切 连 续 薄 片
粘 片 将组织石蜡切片在温水中展 片水 温 要 适 中温
度过 高切 片 熔 化温 度 过 低则切片不能展开一 般 在 左
右用甲醛明胶处理过的载玻片 捞 片粘 片 的 时 候 注 意 不 要 产
生 气 泡
脱 蜡 切片经下行梯度脱蜡后方可进行染
冰 冻 切 片 制 作
冰冻切片是免疫组织化学染中最常用的一种切片方
法其最突出的优点是能够较完好地保存多种抗原的免 疫 活
心理健康教育模式
性
固 定 新鲜组织取材后 甲 醛 固 定 固 定 后 入
蔗糖溶液浸泡至组织块沉底
温 度 恒冷箱切片机应长期处于待机备用 状 态箱 内 温
度 维 持 在 左 右 组织块在箱内冰冻时间不易过
长否 则 组 织 易 碎 每 种 组 织 都 有 自 己 的 合 适 切 片 温 度细 胞
较 丰 富 组 织如 肝肾淋 巴 结 等切 片 温 度 应 在
左 右软 组 织脂 肪 类 组 织切 片 温 度 应 在 左 右
含大量脂肪的组织应 调 至
切 片 切片时进刀的速度应均匀平 稳速 度 过 慢切 片
增 厚容 易 脱 片 速 度 过 快组 织 易 磕 掉 贴片时要依靠载玻
片的热量将组织吸附上来尽量保证切片时组织的完整性
讨 论
花儿为什么这样香
噪声与振动控制两种方法中石蜡切片能切成连续薄 片组织细胞结构清
晰保 存 良 好在病理和回顾性研究中有较大 的 实 用 价 值 但
石蜡切片步骤繁多在制片过程中要经过酒精二 甲 苯 等 有 机
溶 剂 处 理组织内抗原活性失 去 较 多 冰 冻 切 片 手 续 简 便时
间 短制片过程中抗原活性丢失少组 织 变 化 不 大能 够 比 较
完好地保存各种抗原活性及酶类特别是对于那些对有 机 溶
剂或热的温度耐受能力较差酶保存较好但 冰 冻 切 片 不 容 易
做 切取的组织块不能过大组织过大不容易冻结或者组织
冻 结 不 均影响切片及染效果不 容 易 制 作 较 薄 的 切 片组
织块在冻结过程中容易产生水的结晶而影响细胞的形态 结 构
及 抗 原 物 质 的 定 位并且组织结构也不如石蜡切片清晰
在 实 验 过 程 中如何恰当使用各种切片技术还需不断摸索
参 考 文 献
高 艳 冰冻切片的制作方法探讨 云 南 医 药
章 克 萍周 莹龙 飞 不同组织冰冻切片的制作方法 江 西 医
学 院 学 报
胥 维 勇杨 影响冷冻切片质量的因素 中国组织化学与
细 胞 化 学 杂 志
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