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组织切片操作流程切片法主要步骤 1、取材与固（1）取材：
取材的动物要健康，材料愈新鲜愈好，应在致死后立即取材，防止组织细胞自溶变性；取材的器械要锋利；所取材料力求小而薄（以不超过 0.5cm 为宜），不能挤压和损伤。
（2）固定：
将所取的材料立即投入固定液中，目的是使组织蛋白迅速凝固，使细胞内的结构和成分不再发生变化，保持组织细胞与活体相似的形态结构，固定后的组织块变硬，便于进一步处理。
实验室常用 Bouin 固定液，固定时间为12～24 小时，其固定的组织块不需进行水洗，可直接进行脱水。
2、脱水与透明（1）脱水：
固定后的组织块内含有的大量水分要彻底脱去，以便石蜡的浸入。 常用的脱水剂为乙醇，脱水过程必须循序渐进，从低浓度开始，逐步升高，使组织块中的水分逐渐被乙醇所取代。
具体操作为：
Bouin 固定液固定的组织块可直接进入 70％的乙醇进行脱水，时间 12 小时左右。
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（若材料暂不制片，可保存于 70％乙醇中。
）然后将组织块依次移入 85％乙醇（Ⅰ）、（Ⅱ）各 8-12 小时，95％乙醇（Ⅰ）、（Ⅱ）各 2 小时，100％乙醇（Ⅰ）、（Ⅱ）各 1 小时。
因无水乙醇对组织有脆化作用，故在无水乙醇中时间不能超过 2 小时。
（2）透明：
由于乙醇与石蜡不能相溶，故浸蜡前要对脱水后的组织块进行透明。
常用透明剂有二甲苯、氯仿、苯、香柏油或冬青油等，透明剂能同与乙醇和石蜡相溶，并能增强组织块的折光系数，故透明后的组织块呈半透明状。
使用二甲苯作透明剂的透明过程为：
将脱水后的组织块放入无水乙醇与二甲苯混合液（1:1）中 30 分钟，再移入二甲苯中 15-20 分钟。
3、浸蜡与包埋（1）浸蜡：
将透明后的组织块置于刚过熔点的熔化石蜡中浸渍，使石蜡逐渐渗入并完全置换出透明剂。
过程为：
先将透明的组织块移入二甲苯与石蜡混合液（1:1）中，在60℃温箱中放置 30 分钟，再移入熔化的石蜡（Ⅰ）、（Ⅱ）、（Ⅲ）中，在温箱中每级各 1 小时。
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ （2）包埋：
将浸蜡后的组织块置于盛有熔化石蜡的模具中，并使之凝固成蜡块。
4、切片与贴片（1）切片：
中医可以哪些男科疾病将修整后的蜡块夹在切片机的固定器内，使蜡块的被切面与刀口平行，刀和蜡块成一斜角，以右手摇动摇柄进行切片，切片厚度以 5～8um 为宜，连续操作可形成蜡带，此时左手持毛笔轻轻取下蜡带，放于盒中。
（2）展片：
将切下的蜡片放于温水（约40℃）的表面，使皱褶自然舒展开来。
（3）贴片：
借助分离针或镊子，将蜡片贴在洁净载玻片上。
贴片后，将切片置于切片架上自然干燥或放入温箱（40℃左右）中烘干。
5、染与封固（1）染：
染后可增加细胞和组织中各结构间彩的对比以便于观察。搜索 123
切片的染方法很多，常用的是苏木精（hematoxylin）伊红(eosin)染，简称 HE 染。
染的具体步骤如下：
①脱蜡：
将切片放入二甲苯（Ⅰ）、（Ⅱ）中，各置 5～10 分钟，溶去切片
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2010金鹰节上的石蜡。
②将脱蜡的切片经各级浓度乙醇（由高到低）下行至水：
将从二甲苯（Ⅱ）中取出的切片依次经过：
二甲苯与无水乙醇混合液（1:1）无水乙醇（Ⅰ）无水乙醇（Ⅱ）95%乙醇85％乙醇70％乙醇各 3～5 分钟，最后在蒸馏水中浸 5 分钟，即可进行染。
③切片由蒸馏水中转入苏木精染液染 5～10 分钟，使细胞内的嗜碱性物质着。
④用自来水洗去切片上残余的染液。
⑤0.5～1％盐酸溶液分数十秒钟。
多媒体电教室⑥放入自来水中 15～20 分钟、蓝化。
⑦置入 70％、85％乙醇中各 3～5 分钟。组织切片
⑧置入伊红染液中染 1～2 分钟，使细胞中嗜酸性物质着。
⑨依次进入 95％乙醇（Ⅰ）、（Ⅱ）100％乙醇（Ⅰ）、（Ⅱ），各 5 分钟，以除去切片上水份。
⑩透明：
切片入无水乙醇与二甲苯混合液（1:1）二甲苯（Ⅰ）、（Ⅱ）（Ⅲ），各 5 分钟。
zzz 常用固定液和染液的配制 Bouin 固定液的配制饱和溶液75 份甲醛25 份冰醋酸 5 份由于 Bouin
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 固定液的各种成分一旦混合，若不立即使用将会失效，故Bouin 固定液只能现配现用。
苏木精染液的配制（1）Harris 苏木精染液甲液：
苏木素0.5g 95％乙醇5.0ml 乙液：
硫酸铝钾（钾明矾）10g 蒸馏水100ml 0.25g 冰醋酸几滴先将甲液用玻棒搅拌使苏木精溶解，再将硫酸铝钾溶于蒸馏水中，并加热使之溶解，去火；迅速加入甲液，煮沸后，再去火；立即加入后再煮沸；将此液迅速冷却后用滤纸过滤，加入几滴冰醋酸即可。
此液可保存数月。
阈下效应苏木精染液的配制 Hansen 苏木精染液甲液：
苏木素1g 95％乙醇10ml 乙液：
硫酸铝钾（钾明矾）20g 蒸馏水200ml 丙液：
过锰酸钾1g 蒸馏水16ml 将三液分别溶化，然后将甲液注入乙液，再加入丙液 3ml，时时搅拌，加温至煮沸 0.5～1 分钟，迅速冷却。
0.5％伊红染液的配制将 0.5g 伊红溶于 100 毫升
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