1个脱氧核糖核酸碱基的平均分子量为333 Daltons 1个核糖核酸碱基的平均分子量为340 Daltons
2、DNA碱基对分子量
一个DNA碱基对(钠盐)的平均分子量=650道尔顿
双链DNA分子的分子量(道尔顿)=碱基对数目×650
1 OD260 dsDNA=50μg/ml=0、15 mmol/L
1 OD260 ssDNA=33μg/ml=0、10 mmol/L
1 OD260 ssRNA=40μg/ml=0、12 mmol/L
4、浓度与光吸收值
水晶报表1 mmol/L dsDNA=6、7 OD260
1 mmol/L ssDNA=10、0 OD260
1 mmol/L ssRNA=8、3 OD260
5、质量与摩尔数
对于dsDNA分子
每对碱基的平均分子量(MW)是660 pg/pmol
μg×(106pg/1μg)×(pmol/660pg)×(1/N)=pmol N是核酸碱基对数
1μg 1,000bpDNA=1、52 pmol
1μg pUC18/19DNA(2,688bp)=0、57 pmol
1μg pBR322 DNA(4,361bp)=0、36 pmol
1μg SV40 DNA(5,243bp)=0、29 pmol
1μg FX174 DNA(5,386bp)=0、28 pmol
1μg M13mp18/19DNA(7、250bp)=0、21 pmol
1μg l phageDNA(48,502bp)=0、03 pmol
对于ssDNA分子军品论坛
每个碱基的平均分子量(MW)是330 pg/pmol
μg×(106pg/1μg)×(pmol/330pg)×(1/N)=pmol
6、摩尔数与质量
对于dsDNA分子
每对碱基的平均分子量(MW)是660 pg/pmol山东威海大学
pmol×N×(660pg/pmol)×(1μg/106pg)=μg
nbp
1 pmol 1,000bpDNA=0、66μg
1 pmol pUC18/19DNA(2,688bp)=1、77μg
1 pmol pBR322DNA(4,361bp)=2、88μg
1 pmol SV40 DNA(5,243bp)=3、46μg
1 pmol FX174DNA(5,386bp)=3、54μg
1 pmol M13mp18/19 DNA(7、250bp)=4、78μg
佳能s45
1 pmol l phageDNA(48,502bp)=32、01μg
对于ssDNA分子
每个碱基的平均分子量(MW)是330 pg/pmol
pmol×N×(330pg/pmol×(1μg/106pg)=μg
车有利7、浓度
C(mmol/L orpmol/ml)=OD260/(0、01*N
C(ng/ml)=OD260*MW/(0、01*N)
MW—molecularweight;
N—number ofbases;
OD260—absorbance at 260 nm
8、质量浓度与摩尔浓度
1ng/μl Nbp DNA
9、核酸末端浓度
双链DNA分子的末端摩尔数=2×DNA质量(克)/DNA分子量(道尔顿)
限制性内切酶酶切后的DNA末端摩尔数:
环状DNA分子:2×DNA摩尔数×位点数
pmol ends=pmol DNA*number of cuts*2
线性DNA分子:2×DNA摩尔数×位点数+2×DNA摩尔数
pmol ends=pmol DNA*(number of cuts*2+2)
1μg 1,000bp DNA=3、04 pmol ends
1μg pUC18/19 DNA(2,688bp)=1、14 pmol ends
1μg pBR322 DNA(4,361bp)=0、7 pmol ends
1μg SV40 DNA(5,243bp)=0、58 pmol ends
1μg FX174 DNA(5,386bp)=0、56 pmol ends
1μg M13mp18/19 DNA(7、250bp)=0、42 pmol ends
1μg l phage DNA(48,502bp)=0、06 pmol ends
10、双链DNA与寡核苷酸的熔
短于25bp的双链寡核苷酸:
Tm=2(A+T)+4(G+C)
长于25bp的双链寡核苷酸:
Tm=81、5+16、6(lg[J+])+0、41(%GC)–(600/N)–0、63(%Formamide)
N——引物的长度(以碱基数计算)
J+——单价阳离子浓度
9 amino acid≈1k Da Protein
1 kb DNA=333 amino acid≈37k DaProtein
10,000 Da Protein≈270 bp DNA
30,000 Da Protein≈810 bp DNA
50,000 Da Protein≈2701 bp DNA
100,000 Da Protein≈27 kb DNA
12、蛋白质质量与摩尔数的转换
100pmol的100kDa蛋白分子=10μg
100pmol的50kDa蛋白分子=5μg
100pmol的10kDa蛋白分子=1μg
100pmol的1kDa蛋白分子=100ng