当代化工研究
Modem Chemical Research139 2021・03科研开发
中的吗口非
*赵岳锋朱景雅
（国药集团工业有限公司廊坊分公司河北065001）
摘耍：以提取液为原料，基于高效液相谱法，开发了餉分离纯化工艺.实验对比了两种弱保留反相填料H1与H2的分离效果，前者具有明显的选择性优势.在H1上，乙醇/0.5%甲酸体系下，上样量可达3.5%，通过调节乙醇比例可实现、可待因、蒂巴因的分离.其中在0.5%甲酸下便可洗脱，最终产晶纯度可达99%以上.该分离在800DAC柱上得到了成功放大.该纯化工艺具有效率高、收率高、废水少、产晶质量好等优势. 关键词：；；生物碱；分离纯化；液相谱
中国方类号：069文献标识码：A
Separation and Purification of Morphine from Poppy Extract by Preparative High-
performance Liquid Chromatography
Zhao Yuefeng,Zhu Jingya
(Langfaug Branch of Sinopharm Group Industry Co.,Ltd.,Hebei,065001)
Abstract:This paper develops the separation and p urification process of m orphine based on high-performance liquid chromatography with poppy extract as raw material.The experiment compares the separation effects of t wo kinds of w eakly retained reversed-phase p acking H l and H2,and the f ormer has obvious selectivity advantage.On Hl,the loading amount of m orphine can reach3.5%in ethanol/0.5%f ormic acid system.Morphine, codeine and Tibaine can be separated by adjusting the ratio of e thanol.Morphine can be eluted with0.5%f ormic acid,and the purity of t he f inal product can reach over99%.The separation was successfully amplified on800DAC column.The purification process has the advantages of h igh efficiency,high yield,less waste water and good p roduct quality.
Key words：poppy；morphine\alkaloids\separating and p urifying^liquid chromatogram
引言
在中的含量为9%-17%，在杆浓缩物（CPS）中含量为10%左右〔円。由于全合成成本太高，现一般仍从植物中提取获得。现有技术中，的提取分离方法主要有溶剂萃取法，大孔吸附树脂分离法以及阳离子交换树脂纯化法⑷。溶剂萃取的方法需要使用大量有毒有害溶剂（如丁醇、苯、氯仿等）并在生产过程中产生大量含残余溶剂的废水，不利于环保和生产的安全。大孔吸附树脂同样涉及有机溶剂的使用（丙酮、甲醇等），且树脂选择性不高，提取纯度低。阳离子交换树脂纯化则产生的废水较多，效率偏低，产品纯度同样不高。
本研究基于高效液相谱法，开发了的分离纯化工艺，旨在提高生产效率，减少环保压力，改进产品质量。
1.实验部分
⑴仪器、试剂与材料
弯曲刚度S6000液相谱系统（华谱科仪（北京）科技有限公司），DAC50-HB与DAC800-HB纯化系统（江苏汉邦科技有限公司）。
分析方法所用的谱柱C18HCE（4.6X250mm,i.d. 10um），以及分离用的谱填料Hl与H2（60pm）均购买于浙江华谱新创科技有限公司。
分析水平所用乙JW和甲酸为谱纯，购于Sigma-Aldr-i ch公司。水为超纯水。
孵化器
制备水平所用乙醇、甲酸为工业级，水为纯化水。
提取液来自国药集团工业有限公司廊坊分公司。
⑵谱条件
①样品分析方法
谱柱为C18HCE（4.6X250mm,10um）。流动相A为0.1%甲酸，B为乙睛。梯度洗脱条件为0-10min,0%B；10-15min,0%-5%B；15-40min,5%-20%B；40-50min, 20%-95%Bo流速为1.OmL/mino柱温为30°C。检测波长为275nm o
②填料对比
谱柱Hl、H2的规格为4.6X250nmi（装约3g填料）。
流动相A为0.5%甲酸，B为乙醇，洗脱条件为：0-15min, 0%B；15-30min,9%B；30-50min,25%B；50-70min, 70%B…流速为0.6mL/min；波长：275nm。上样量0.5%。
③上样量考察
谱柱为Hl（50X430mm，装500g填料）。流动相A为0.5%甲酸，B为乙醇，洗脱条件为：0-15min,0%B；15-30min,9%B；30-50min,25%B；50-70min,70%B。流速为lOOmL/min；波长：275nm…上样量分别为2.5%、
3.5%、
4.5%o
④生产制备分离
谱纯
谱柱为H1（800X775mm，装222kg填料）。上样后0.5%甲酸洗脱1320L，之后0.5%甲酸/乙醇（91/9）洗脱880L,0.5%甲酸/乙醇（75/25）洗脱1760L,0.5%甲酸/乙醇（30/70）洗脱880L。流速37L/min；波长275nm，上样量3.5%。
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科研开发
2021 ・ 03
2.结果与讨论
⑴料液质量
疏血通待分离的料液由生经CPS 提取、离心、硅藻土助滤、 陶瓷膜过滤、H1预柱过滤得到。其中浓度约14mg/mL 。纯 化要求：、可待因、蒂巴因等生物碱无交叉，所收集的
憾分经浓缩、结晶可达到99%以上纯度。
⑵分离工艺优化
在分离工艺开发过程中，流动相的选择需要考虑样品的
溶解度、各生物碱的分离选择性，溶剂毒副作用，经济效益 以及环保要求等因素。考虑到生物碱在中性条件下易与填料 表面的硅醇基发生离子作用从而影响峰型，并且生物碱在酸 性条件下具有良好的水溶性⑸，因此选择了0. 5%甲酸/乙醇 体系作为洗脱剂。其中，乙醇是为了调节洗脱强度，实现不
同生物碱的分离，并且乙醇的毒副作用较小。
为减少乙醇的使用量，同时减少料液中强保留物质的死
吸附，选用了弱保留的反相填料H1与H2作为研究对象。图1 为0.5%上样量时，两填料的分离谱图。
图1 H1 (上)与H2 (下)的分离谱图
在H1与H2上，可待因的洗脱时间基本一致，但在H1上吗
啡的洗脱更早，表明H1对与可待因的选择性更好。
⑶上样量考察
上样量关系到生产效率和成本控制。为了获取合格憾分 的同时保证足够的收率，从而提高效率，降低生产成本。实
验考察了不同上样量与可待因的交叉情况，结果如表1
所示。当上样量为3. 5%时，与可待因的分离适宜，收率 也比较高。当上样量为4. 5%时，原本9%乙醇才能洗脱的可待
因，部分在0. 5%甲酸段便洗脱，并与有严重交叉。
表1不同上样量的回收率
上样量
回收率％
交叉段回收率％
2. 596. 2 2. 5
3. 5%
94. 5 3. 64. 5%
75. 7
21. 1
柱上进行了生产放大。制备谱图如图2所示。收集25-48min
憾分，主峰纯度85.3%，憾分经纳滤浓缩⑹、结晶后可得到 纯度大于99%的产品。
重庆pm2.5
图2 800DAC 制备谱图
3.结论
基于高效液相谱法，开发了的分离纯化工艺。通
过比较，确定了选择性较好的H1作为分离填料。经过优化， 在乙醇/0. 5%甲酸体系下，上样量达到了3. 5%，实现了
与可待因等杂质的良好分离。该工艺最终于800DAC 柱上进行 了生产放大，结合浓缩、结晶等后处理手段得到了纯度大于 99%的高品质产品。相比于萃取、树脂纯化工艺，高效谱 分离工艺具有效率高、收率高、废水少、产品质量好等优
势。
【参考文献】
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【作者简介】
赵岳锋( 1982-)，男，陕西合阳人，本科，工程师，注册安 全工程师，国药集团工业有限公司廊坊分公司；研究方向：植物提 取及化学合成。
朱景雅( 1993-)，女，河北廊坊人，本科，助理工程师，国 药集团工业有限公司廊坊分公司；研究方向：植物提取及药物分 析。
⑷生产制备分离
亚当 斯密
经过条件优化与中试验证，最终在内径为800mm
的制备
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