油液分析内容摘要：梅毒的实验室检测分病原学检测、过筛试验和确诊试验。因检测方法较多，很多医护人员、甚至实验室人员也不能完全掌握。为方便理解，以表格的形式总结了4种过筛试验和7种确诊试验的区别；以表格的形式总结了过筛试验与确诊试验不同结果的4种组合模式所对应的临床意义。WHO推荐用VDRL和RPR方法（现临床常用TRUST方法代替）对血清进行过筛试验，出现阳性者用TPPA、TPHA （现临床常用TP-ELISA代替）等方法做确证试验，本文对这些试验作了重点介绍。 人体感染梅毒螺旋体3～6周后，可在患者血清中检出2种抗体，一种是针对螺旋体抗原的抗体，另一种是针对非螺旋体抗原（心磷脂）的抗体。抗体又称为反应素。 梅毒的实验室检测分病原学检测、过筛试验和确诊试验。
一、病原学检测：
材料：1.暗视野显微镜。 2.钝刀、无菌盐水、载玻片、盖玻片、注射器等。
方法： 1.取材：①皮肤粘膜损害部位取材：先在玻片上加无菌盐水1滴，用棉拭子擦去皮损部位污物，如有痂皮，可用钝刀除去，嘱患者用手挤压皮损周围，使组织液渗出，用钝刀轻轻地刮取组织液(避免出血)，将组织渗出液与玻片上无菌盐水混合，加盖玻片后镜检。②淋巴结取材：消毒淋巴结表面皮肤，用
1m1注射器配12号针头，吸取0.25-0.5ml无菌盐水，以无菌操作穿刺淋巴结并注入盐水，再吸入注射器内，如此反复二三次，取少量淋巴液直接滴加于玻片上加盖片后镜检。③羊膜穿刺术：梅毒孕妇的羊膜穿刺术应由专业人员操作，获得羊水直接滴加于玻片，加盖片后镜检。 2.显微镜检查：①打开暗视野显微镜，在聚光器上加一滴蒸馏水(湿式)。②将玻片置于载物台上。③上升聚光器使蒸馏水接触玻片的底部，先用 10倍物镜调焦，再用40倍物镜观察。
【结果】在暗视野显微镜下，如有发光的典型螺旋状梅毒螺旋体及特征性运动方式(旋转运动、伸缩移行、弯曲前行)为阳性结果。2012年中央1号文件
无线电能传输二过筛试验（非梅毒螺旋体抗原试验）：检测针对心磷脂的抗体。用心磷脂作为抗原测定患者血清中的反应素。主要有性病研究实验室（venereal disease research laboratory，VDRL）试验、不加热血清反应素试验(USR)、快速血浆反应素环状卡片试验（rapid plasma reagin circle card test，RPR）、甲苯胺红不加热血清试验（tolulized red unheated serum test，TRUST）。目前国内多使用RPR和TRUST，两者都可以用于梅毒初筛，但结果呈现颜不同。RPR以黑碳粉颗粒为载体，阳性结果会呈现黑凝集颗粒；TRUST以甲苯胺红染的颗粒为载体，检测结果会呈现红凝集颗粒，结果更易于观察。RPR和TRUST两项试验主
要用于梅毒筛选和疗效观察，当结果呈阳性，即滴度升高时，可以进行螺旋体抗原血清学试验，或进
国际有机农业运动联盟
行病原学检测查梅毒螺旋体或核酸。血清素滴度升高，呈特异性抗体阳性或病原检测阳性时，可以确诊梅毒。
表2 四种反应素试验敏感性与特异性
【正常值】(1)定性试验：阴性反应。 (2)定量试验：试验效价：1：4以下。
供热系数
台标适合用于前两方法测定阳性后的确诊试验。
梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA）：采用双抗原夹心ELISA法检测梅毒螺旋体特异性IgM和IgG抗体。梅毒IgG抗体治愈后相当长的时间内仍然存在较高的阳性率，甚至终身阳性，因此，TP-ELISA 阳性只说明正在感染或曾经感染过，不能判断梅毒疾病活动与否，所以不能作为疗效监测手段。将高纯度的特异抗原(通常含相对分子质量为5500、17000、44500、47000的蛋白质)包被于微孔反应板(条)，待测血清中如存在抗TP抗体，即可与之结合。再加人酶标记的高纯度抗原，在固相上形成抗原抗体复合物与酶标记物结合，待加人酶底物/原(过氧化服ITMB)液时即产生呈反应，用酶联检测仪判定试验阳性反应，呈强度与抗体水平成正比。本法可用于大样本血清检测，适用于自动化检测系统，是目前梅毒筛查的较好方法。
近年出现采用基因工程重组表达的特异性梅毒螺旋体抗原包被固相板，使试验更具有敏感性和特异性，具有简单、快速和高通量的优点，应是梅毒血清学诊断试验的首选方法，但在工作中常出现假阳性的问题，而大多数是由于弱阳性反应引起的。
化学发光免疫分析法（CLIA）：原来与ELISA相同，是在ELISA技术基础上发展而来，以多种梅毒螺旋体特异性蛋白(TpN15、TpN17和TpN47)为固相抗原，并用辣根过氧化物酶(HRP)标记同种蛋白为标记抗原，与患者血清中的梅毒螺旋体抗体形成双抗原夹心复合物，经洗涤，加入底物(发光剂)，根据发
光强度(RLU)来判断患者血清中是否含有梅毒螺旋体特异性抗体。近年来推出的全自动化学发光法，具有简便、准确、经济的特点，且敏感性、特异性与其他常用方法结果相符合。
是放射免疫分析（Radioimmunoassay，RIA）与酶联免疫分析（Enzymeimmunoassay，EIA）的结合，采用双抗夹心法的原理，使用化学发光底物取代传统的显底物，增加了检测的灵敏度。
梅毒免疫层析法-梅毒快速检测(RT)：一般常用的多是胶体金免疫层析(GICA)，是20世纪90年代初建立的一种简易快速稳定的免疫学检测技术，是使用胶体金作为标记物的一种固相膜免疫测定方法。采用纯化重组基因的梅毒抗原包被膜条测试区，加入待测血清后，血清中的抗体与膜条上金标记抗人IgG或抗IgM反应，然后通过毛细管效应层折至测试区与包被的特异抗原结合，在测试区出现紫红条带为阳性。该法简便、快速，不需要特殊的仪器，适合于单人份操作，也适用于较紧急的场合。有全血和血清、血浆法全血法：
血清、血浆法：
荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）：方法是将梅毒螺旋体Nichols株抗原直接涂在载玻片上，然后将密螺旋体无毒株（Reiter株）制成吸收剂加至待测血清标本中反应30分钟，以去除同属抗原的交叉反应。再将吸收后的血清加到玻片的抗原膜上，37℃温育30分钟，用PBS缓冲液冲洗晾干，再加荧光素标记的抗人IgG，37℃温育后冲洗，晾干，最后在荧光显微镜下观察结果。
本试验由于吸收试剂的使用，提高了测定的特异性，可达92%。由于使用的是梅毒螺旋体Nichols株抗原，密螺旋体各种抗原分子均存在，提高了试验的敏感性，对一期梅毒的敏感80%，二期为99-100%，三期为95-100%。阳性结果图如下：
梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB）：将梅毒螺旋体Nichols株菌体细胞破碎，使用凝胶电泳将梅毒螺旋体各种抗原成分转印到膜条上作为固相，膜条与待测血清和酶标抗体孵育，底物显后，当血清中存在梅毒特异性抗体时，则在印迹膜上相应的特异性多肽抗原位置出现显条带。
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