杨明荣
【摘 要】本文综述了近些年来中药制剂中盐酸小檗碱的含量测定方法,主要有:分光光度法、薄层扫描法、高效液相谱法、高效毛细管电泳法. 【期刊名称】《北方药学》
【年(卷),期】2010(007)002
【总页数】4页(P62-64,54)
东北农业大学学报【关键词】盐酸小檗碱;中药制剂;定量分析方法
【作 者】杨明荣
【作者单位】内蒙古医学院第一附属医院药局
【正文语种】中 文
【中图分类】R284.2
盐酸小檗碱又称盐酸黄连素(BBH),是黄连、黄柏、功劳木、三颗针等中药材中的主要有效成分,具有清热解毒、抗菌消炎的功效。在多数含以上药味中药制剂的质量标准中,盐酸小檗碱常被选作含量控制指标,其含量测定对于控制制剂质量、开发药源、合理用药等均具有重要意义。近年来,随着现代分析理论的迅速发展,新的测定方法不断出现,本文就近些年来国内常用且准确度较高的含量测定方法进行总结,以供参考。
1.1 紫外分光光度法
BBH属于芳香族六元环吡啶类化合物,具有强的紫外吸收功能,因此紫外分光光度法常用作BBH的定量分析。
陈友鸿等[1]在345 nm处测定BBH吸光度,并按吸收系数法计算香连胶丸中BBH含量。张玉娥等[2]利用分光光度法测定双黄少腹贴中BBH含量,经相同前处理,在344 nm处检测,用标准曲线工作法进行定量分析；本法简便,所用仪器及试剂都较普遍,但制剂前处理较麻烦,测定组分单一。
1.2 二阶导数光谱法
导数光谱法具有分辨率高,可消除低阶曲线干扰的特点,不经分离即可以直接消除阴性对照液的干扰。 徐英瑜等[3]用二阶导数光谱法同时测定葛根芩连微丸中BBH和黄芩苷含量,检测波长分别为365、274 nm,以无水乙醇为溶剂测定,平均回收率为100.5%,n=5,RSD为1.65%。本法准确、简便。
1.3 三波长分光光度法
岳淑梅等[4]用0.05 m ol/L的H2S O4溶解连蒲双清片粉末,不经分离直接用三波长分光光度法测定其中BBH含量,选用280、345、390 nm作为检测波长,回收率为99.88%,变异系数为0.05%,本法准确、简便、费用低、耗时短。
王大杰[5]用薄层分离-荧光分光光度法测定盐酸小檗碱片和复方黄连素片中小檗碱含量,荧光检测波长Ex=360 nm,E m=414 nm,工作曲线线性范围0.832～3.328 m g/m L。本法测定结果准确、灵敏度较高。
2.1 单波长扫描法
虞和永等[6]以366 nm为检测波长测定倍连软膏中BBH含量,用苯∶乙酸乙酯∶甲醇∶异丙醇∶水(6∶3∶1.5∶1.5∶0.3)上行展开,结果准确。
赵倩等 [7]采用T LC S测定通络解毒搽剂中BBH含量,用正丁醇∶冰乙酸∶水(14∶2∶4)展开,测定波长为344 nm。
2.2 双波长扫描法
王珍等[8]采用薄层扫描法测定了葛根芩连冲剂中BBH的含量,以正丁醇∶冰醋酸∶水(7∶1∶2)为展开剂,在λS=440 nm,λR=640 nm波长处测定含量,加样回收率为96.03%,精密度和重复性良好。
何咏梅等 [9]采用双波长反射锯齿扫描法(λS=345 nm,λR=370 nm)对肠康片中盐酸小檗碱的含量进行测定,线性范围0.19～0.97μg,回收率为99.4%,RSD=1.6%。
马丽颖等[10]又用同法测定了益智颗粒中BBH的含量。
2.3 荧光扫描法
荧光法灵敏,线性关系好,适于微量成分测定。邬国庆等 [11]用荧光扫描法测定导赤丸中BBH的含量,激发波长366 nm。
张斌等[12]采用荧光扫描法测定利咽胶囊中BBH含量,激发波长345 nm,发射波长550 nm四神瓦当
青岛老人被特勤打
韩桂茹[13]采用荧光锯齿扫描测定大败毒胶囊中BBH含量,发现其最佳激发波长为338 nm。
3.1 正相谱法
刑俊波等[14]采用HPLC正相柱(美国Hypersil分析柱),以乙酸乙酯∶甲酸∶无水乙醇(110∶30∶60)为流动相,在345 nm波长处测定黄地颗粒中BBH含量,结果显示利用正相谱柱分析,样品中BBH和其它杂质峰完全达到基线分离。
3.2 反相谱法
金佩芬等[15]利用HPLC反相柱(C18柱),超声提取戊己丸样品中有效成分,以0.033 m ol/L磷酸二氢钾溶液∶乙腈(90∶40)为流动相,测定波长265 nm。
滑县县志
王晓燕等[16]又用C18反相谱柱,分离并测定妇科止带片中BBH含量,流动相为乙腈∶磷酸盐缓冲液∶甲醇(6∶12∶1),检测波长349 nm。
华青等[17]用十八烷基硅胶为填充剂,0.05 mol·L-1磷酸二氢钠溶液(用磷酸调节p H值至3)∶乙腈(70∶30)为流动相,在波长270 nm处测定了胃得治胶囊中BBH的含量。
李宝明等[18]用HPLC法对制霉灭滴胶囊中的盐酸小檗碱含量作了测定,建立了反高效液相谱测定方法是:谱柱为S k g e l-O DS-80TS,流动相为甲醇∶乙腈∶0.05 mol·L-1N a H2P O4(20∶30∶55),检测波长为346 nm。
3.3 反相离子对谱法
小檗碱为生物碱,在十八烷基硅烷键合硅胶反相HPLC系统容易拖尾,在流动相中加入反离子试剂以形成离子对,能有效抑制拖尾,改善峰形。
袁方杰等[19]采用反相离子对谱测定香连丸中BBH含量,Cromalis C18谱柱,流动相为磷酸盐缓冲溶液 [0.05 m ol·L-1K H2P O4溶液和0.05m ol·L-1庚烷磺酸钠溶液 (1∶1)∶甲醇 (60∶40),含0.2 m ol·L-1三乙胺,并用磷酸调节p H值至3.0];检测波长为265 nm,该法的流动
相中加入0.05 m ol·L-1庚烷磺酸钠作为离子试剂,加入三乙胺作为硅醇基改性剂,极大地改善了分离效果。
陈向阳等[20]又用HPLC法测定了香连丸中盐酸小檗碱的含量,使用C18柱,流动相为乙腈∶磷酸盐缓冲液(p H5.2)∶甲醇∶1.3%十二烷基磺酸钠(SDS)(5∶6∶1∶1),变异系数不大于2.0%，结果分离度良好。
罗懿妮等 [21]通过测定5种中成药中BBH的含量,比较其反相碳十八柱高效液相谱测定条件。结果加入少量离子对试剂十二烷基磺酸钠改变了峰形,流动相的变化基本不影响小檗碱的吸收光谱。
BBH为季铵类生物碱,带有正电荷,因此可用HPC E进行分析,虽然毛细管电泳的分离模式很多,但在中药分析中,毛细管区带电泳(C ZE)和胶束电动毛细管谱(MECC)为目前应用最为广泛的两种分离模式。
4.1 毛细管区带电泳法(C ZE)
C ZE尤其适合分离带正电荷的离子,因为阳离子的迁移方向与电渗流一致,可以缩短分析时
间。
张国华等[22]采用C ZE测定5种成药中小檗、药根碱的含量。缓冲液为60 mm ol·L-1磷酸氢二钠(磷酸p H7.0)∶甲醇(65∶35);检测波长254 nm。
阿尔法女孩
张艺等[23]用C ZE测定金黄散中BBH和盐酸巴马汀的含量,缓冲液为10 mm ol·L-1混合磷酸盐溶液(以盐酸调节至p H=4.8),含30%乙腈,检测波长230 nm,结果BBH在5～100μg·m L-1范围内呈良好的线性关系。
凌宁生等[24]用未涂层毛细管柱,以40 mm ol·L-1磷酸氢二钠∶甲醇(65∶35)为缓冲液,分离分析金芪降糖片中BBH的含量,在缓冲液中加入有机改性剂抑制电渗流,减少毛细管柱对阳离子的吸附,得到良好的分离效果。
张琦等[25]用C ZE测定清经胶囊中BBH的含量,熔融毛细管柱,0.2 m ol·L-1乙酸钠溶液∶甲醇(8∶2)为缓冲液,265 nm波长处测定,结果平均加样回收率为100.4%,n=5,RSD为1.9%。
4.2 胶束电动毛细管谱法(MECC或MEKC)
MECC的最大特点是使毛细管电泳同时分离离子型化合物和中性物质。在MECC的缓冲液体系中加入表面活性剂以改变其选择性,常用的如十二烷基硫酸钠(SDS)。
华董Sheu等[26]以胆酸盐做表面活性剂,用MECC法分析了三黄泻心汤中的小檗碱、巴马汀及其他中性成分。
Li等[27]用MECC法在30 min内同时测定了黄芩和黄连复方中的4种小檗碱型生物碱和6种黄芩黄酮。
综上所述,谱技术在BBH的定量分析中应用较广泛,其中HPLC已成为一种常规的分析方法,但HPLC实验成本较高,对实验条件及样品处理要求严格,因此与HPLC相比,HPC E除了分离效率高、分析时间短以外,还具有以下优点:(1)样品体积小,有机溶剂用量少；(2)毛细管电泳多采用空管毛细管,容易清洗,不易污染,可减少样品前处理的步骤；(3)毛细管电泳的分离模式多样化；所以在中药制剂分析方面,毛细管电泳将成为一种发展潜力巨大的分析方法。
【相关文献】
[1]陈友鸿,麦里香,代羽.分光光度法测定香连胶丸中盐酸小檗碱的含量[J].中药材,1997,20(5):
245-246.
[2]张玉娥,于萍,欧阳艳华,等.分光光度法测定双黄少腹贴中盐酸小檗碱的含量[J].中成药,2003,25(5):427-428.
[3]徐英瑜,毛书征.二阶导数光谱法同时测定葛根芩连微丸中盐酸小檗碱和黄苓苷含量[J].中国医院药学杂志,2001,21(12):731-733.
[4]岳淑梅,何颖,张启明.三波长分光光度法测定连蒲双清片中盐酸小檗碱的含量[J].中成药,1999,21(2):71-72.
[5]王大杰.荧光分光光度法测定小檗碱的含量[J].成都大学学报(自然科学版),2005,24(4):262-264.
[6]虞和永,汤永玖,王文博,等.薄层扫描法测定倍连软膏中盐酸小檗碱的含量[J].中国中药杂志,2004,29(9):917.
[7]赵倩,敖利,朱祯禄,薄层层析-分光光度法测定通络解毒搽剂中盐酸小檗碱含量[J].儿科药学杂志,2006,12(1):41.
[8]王珍,李矗,李成网,等.葛根芩连冲剂中盐酸小檗碱的含量测定[J].中成药,1998,20(8):19-20.
[9]何咏梅,彭咏梅.薄层扫描法测定肠康片中盐酸小檗碱的含量[J].中国药师,2005,8(12):1002.
[10]马丽颖,张铭,李谦,等.薄层扫描法测定益智颗粒中盐酸小檗碱的含量[J].辽宁中医杂志,2002,29(3):176.
[11]邬国庆,周富荣.薄层扫描法测定导赤丸中盐酸小檗碱的含量[J].中国中药杂志,1999,24(7):412-413.
[12]张斌,钱忠直,王丽娜,等.利咽胶囊中盐酸小檗碱的含量测定[J].中成药,1996,18(8):15-16.
[13]韩桂茹.新荧光扫描法测定大败毒胶囊中小檗碱含量[J].中成药,2004,26(4):附5.
[14]刑俊波,曹红,刘云,等.HPLC法测定黄地颗粒中盐酸小檗碱的含量[J].药物分析杂志,2003,23(5):384-386.
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
关于我们
投诉建议