SMART cDNA Library Construction Kit

SMART cDNA Library Construction Kit是用来从少量RNA样本中构建高质量的cDNA文库试剂盒中包括有SMART cDNA合成和文库构建到 TriplEx2或者Creator供体载体pDNR-LIB所需的试剂。因为该试剂盒是特别针对文库构建来设计的,所以它与Clontech™ PCR-Select™ cDNA差减杂交试剂盒不能配合使用。
steerorear>水凝胶SMART PCR cDNA Synthesis Kit可以用来与Clontech™ PCR-Select™ cDNA差减技术一起使用。总RNA不能直接用来做差减实验,但可以通过SMART PCR cDNA Synthesis Kit来扩增出高质量的cDNA,从而可以用作杂交实验。同样,少量的Poly A+ RNA也可以用SMART PCR cDNA Synthesis Kit来扩增。SMART cDNA也可以在你仅有有限的RNA样本时从来做虚拟的Northern杂交,用来代替标准的Northern杂交。SMART PCR cDNA Synthesis Kit含有SMARTⅡ寡苷酸和cDNA合成引物,两段序列都具有用来做Clontech™ PCR-Select差减所需的RsaⅠ位点。该试剂盒也可以从来构建SMART cDNA文库于其它自选载体中。
SMART RACE cDNA Amplification Kit结合了SMART cDNA合成技术和RACE的方法。该试剂盒优点在于可以构建全长cDNA,无需接头连接,灵敏度强,方法简单。
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SMART cDNA文库富集了全长的cDNA。插入片段的平均大小是1.5-2 Kb。我们曾经从SMART文库中克隆到的最大插入片段是大于6kb的β-肌球蛋白cDNA。即使起初材料用的是总RNA,也几乎不会筛选到核糖体RNA。实验结果表明,来自于SMART cDNA文库的50个克隆分析
w890i表明没有核糖体RNA克隆。以50 ng总RNA或者25 ng poly A+ RNA构建的SMART cDNA文库的基因保真度,与用标准的Gubler and Hoffman方法以5 ug poly A+ RNA构建的文库相似。
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虽然在SMART第一链cDNA合成过程中rRNA可以被反转录,但这些序列在接下来的PCR过程中不会被扩增。这是因为多数情况下,rRNA序列是通过自身引导来反转录的,所以最终得到的cDNA片段不具备5'和3'SMART特异性序列,不能够进行指数PCR扩增。
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本文发布于:2024-09-20 17:49:30,感谢您对本站的认可!

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