预先配置20%的DMSO,4度预冷,包括即将使用的冻存管 2 收获PBMC细胞,纯血清重悬PBMC。细胞浓度最好是2×107 苏黎世金融
4 将冻存管放于塑料泡沫盒中(装15ml离心管的那种),外面用保鲜袋扎紧,放于-80度冰箱中,过夜。而后转移至液氮中冻存即可。冻存的PBMC的复苏步骤与普通的细胞有所不同,步骤如下
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1 取出冻存管,37度水浴解冻
2 用移液管将将冻存管中的细胞转移至15ml离心管中
3 逐滴加入5倍于冻存液体积的培养液(预先平衡好),边加边混匀,这一步主要是为防止PBMC的渗透压变化太大,导致细胞破裂或损伤 4 再加入5倍体积的培养液,混匀,离心
5 重悬细胞后,再加入10ml培养基洗涤一次。s2005论坛
丑陋的北京人
中国传媒大学高等职业技术学院6 计数,进行试验。
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