enrique iglesias
一、 PBS配方
配1L 25倍PBS
NaCl 200g
Na2HPO4-2H2O 36g 最难溶 最后加 或 Na2HPO4-12H2O 72.4g
NaH2PO4-2H2O 6.5g 或 NaH2PO4 5g
搅拌,1000ml定容,调PH值至7.2—7.4
(细胞培养)1倍PBS配方
NaCl 8.0g
KCl 0.2g
Na2HPO4 1.44g 或者Na2HPO4-12H2O 3.57g
许鲜网KH2PO4 0.24g
加水定容至1L,调PH值 7.2-7.4
(细胞培养)10倍PBS配方
NaCl 80g
王志 面对面
KCl 2g
Na2HPO4 14.4g 或者Na2HPO4-12H2O 35.7g
KH2PO4 2.4g
(组化用)PBS配方
配1L 10 倍PBS
NaHPO4 10.9g 或 Na2HPO4-12H2O 27.50g
NaCl 90g
NaH2PO4 3.2g 或NaH2PO4-2H2O 4.16g
搅拌,1000ml定容,调PH至7.2,分装,常温保存 配1倍PBS(0.01PBS)
1. 取50ml 10倍PBS,倒入容量瓶
2. 定容至500ml,摇匀,分装
二、 胰酶的配制:
0.25%胰酶
1倍PBS 1000ml
胰酶粉(trypsin)2.5g
EDTA 0.4g
搅拌后4摄氏度过夜,然后用NaOH调PH值至7.2-7.4;用0.22um滤器(绿滤器)过滤分装保存。
三、 培养基配制
L-DMEM配制
1L培养液:
L-DMEM 10g
NaHCO3 2.2g
双抗 1%(11ml)
胎牛血清 110ml
注:国产胎牛血清需要56℃,30min灭活
加完混合后,用0.22um的滤器过滤除菌,4摄氏度保存。
低糖冻存液的保存
冻存液:
L—DMEM:血清:DMSO=6:3:1
注:(DMSO要缓慢加入,以防散热不均,下面要垫上冰块,助散热。 配好后用0.22微米滤器过滤,分装,4℃保存
1640培养液配制
1L体系:
1640干粉 10.3g/L
NaHCO3 2g
双抗 1%
100倍 谷氨酰胺 10ml
β-巯基乙醇 3.5 uL
胎牛血清 10%(灭活)
0.22微米滤器过滤,4℃保存。
3%配制:
取3g于100g空瓶,加70%乙醇30ml左右,溶解,最后加水(蒸馏水)到我和qq的故事100ml,溶解
组织脱水液配方
20%蔗糖+40%甘油溶液配制
称取蔗糖40g放入适量的dH2O溶解,加入87%甘油 9.2ml, 最后定容至200ml。
冻存液配方:
DMSO:噻吩磺隆70ul
FBS:38当爱已成负担0ul
培养基:250ul
共700ul体积。