徐重;黄勇
【摘 要】综述了海洋自由生活线虫研究的意义和我国海域自由生活线虫的研究现状和研究进展,分别报道了我国四大海区自由生活线虫的丰度和多样性情况,列出了各海区所发表的新种名录.目前,我国海域共鉴定报道了自由生活海洋线虫260余种,隶属于118属,36科,4目,其中包括3个新属和76个新种.
【期刊名称】《聊城大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2014(027)001
【总页数】6页(P55-60)
【关键词】自由生活线虫;分类;多样性;研究进展;中国海
【作 者】徐重;黄勇
【作者单位】聊城大学生命科学学院,山东聊城252059;聊城大学生命科学学院,山东聊城252059
【正文语种】中 文
【中图分类】O959
0 引言
我国拥有1.8万km的海岸线和300万km2的海洋国土面积，包括渤海、黄海、东海和南海的领海及专属经济区，属于海洋大国.随着海洋战略地位的凸显，海洋权益的争夺也日趋激烈.加强海洋科学研究，查清海洋生物资源底数，提高控制和开发利用海洋的能力，对建设海洋强国具有重大的战略意义和现实意义.
自由生活海洋线虫属于线虫动物门（Nematoda）的无尾感器纲（Aphasmida）或称泄腺纲（Adenophorea），全世界已记录的种类约4 000种，但尚有大量种类未被鉴定，估计有2万种之多[1］.海洋线虫是海洋小型底栖生物中最优势的类，分布广泛，数量众多.在大多数生境，其丰度可占后生动物数量的70%－90%，在某些生境中，如有机质丰富的沉积物
中可达到90%以上[2］.通常每平方米的海底泥沙中含有上百万条左右的线虫，有时高达上千万条，如河口或沼泽地带.它们可以占据不同的营养级，在底栖生态系统能量流动和物质循环中发挥着重要作用，其理论价值和研究意义很大，是国际底栖生态学家重点研究的对象之一.
海洋线虫和其他小型底栖生物类还是海洋底栖环境质量的重要指示者，它们野外取样简便，需要样本量少，极大的丰度和物种多样性，稳定的生活周期，活动范围小等特征，使其成为了海洋生态监测评估体系的一个重要指标，作为指示生物已被应用于海洋环境监测.目前的研究表明线虫的密度、种类组成、落结构变化可以用来诊断底栖环境的健康状况.各国学者根据线虫落的营养功能类、生活策略和系统分类等级等特征而建立的营养多样性指数、成熟度指数和等级多样性指数在评价沉积环境污染程度方面取得了一定的成果[3］.但是所有这些研究得以深入开展的基础是海洋线虫的分类学研究.因为物种是生物多样性的度量，是基因多样性的载体和生态系统多样性的基础，所以加强海洋线虫分类学研究是当前海洋生物多样性研究重要的基础工作，也是我国海洋生物学研究和海洋生物资源开发利用的迫切需要.
1 研究方法
海洋线虫主要分布在海洋沉积物表层0－8cm的范围内（一般90%以上个体集中分布在0－2cm的表层），附植线虫主要附着在大型藻类的固着器上.获取不受扰动的表层沉积物样品是确保研究结果准确的前提.根据研究目的不同，样品采集可分定性样品和定量样品采集。定性样品在采样点随机刮取软底沉积物表层一定量，装入密闭的样品瓶中，加入等量的10% 海水福尔马林溶液固定。定量样品的采集要求严格，潮间带采样选择泥沙软底处，待潮水退去后用由注射器改造的内径2.6－2.9cm的小采样管采样；潮下带采样，利用0.1m2 Gray－O’Hara箱式采泥器采集未受扰动的沉积物样品1－2箱，用小采样管取8cm分样4个，每个分样为一个重复，每个按0－2cm，2－5和5－8cm分层，分别装入125mL的塑料瓶中，加入等量10% 海水福尔马林溶液固定. 室内分选：实验室用0.1%虎红染24h，然后用过滤后的自来水冲洗，使样品通过500μm和42μm或31μm的两层网筛，500μm网筛上的截留有机体为大型底栖动物，另做研究；对截留在42μm或31μm网筛上的沉积物样品，用比重为1.15的Ludox悬浮液转移到离心管中，搅拌均匀，以1 800转／min的转速离心10min.将上清液倒入50mL小烧杯中，再向离心管中加入与样品等量的Ludox悬浮液，重复离心三次，将所得的上清液集中后通过42μm或31μm的网筛，过滤掉Ludox，然后用蒸馏水冲洗干净后把样品转移到带网格的培养皿中.
类记数：在解剖镜下将分离出的小型底栖动物样品按类划分、计数并做详细记录，用吸管将每条线虫小心转移到青霉素小瓶中，用5%的福尔马林溶液保存备用.其他类置于另外的青霉素小瓶中，用5%的福尔马林溶液保存.
线虫制片：分类和测量需要将线虫制成装片在显微镜下观察.首先将分选出的线虫全部转移至胚胎培养皿中，将固定液尽量吸出，加入适量的透明液（纯甘油∶50%酒精1∶9混合），放入干燥器中透明.两周后，酒精和水挥发，甘油渗入虫体，便于保存和透明观察。在备好的干净载玻片上，滴甘油一滴，挑选直径大小一致的线虫10－20条，放至甘油中，均匀分开并沉于载玻片上.选取直径与虫体直径大致相同的石英砂3粒，均匀放于甘油滴的边缘，然后加盖盖玻片，周边用加拿大树胶或中性树胶密封或用融化的石蜡封片，贴标签做标记后置于干燥箱中，2－3天树胶干固后即可观察.
分类鉴定：观察在微分干涉显微镜下进行，观察前在解剖镜下在每张线虫封片的背面用红记号笔把线虫用圆圈标注，在显微镜下仔细观察初步鉴定，选择清晰的标本照相并用描图仪绘出线虫的形态结构，特别是头部和生殖器等精细结构，然后利用罗盘仪测量其体长、体宽、尾长等各种指标数据，算出a，b，c等德曼值.采用Lorenzen 1981年修订的分类
系统[4］，依据Platt和 Warwick 1983年至1998年创建的图式检索表[5－7］和有关文献资料进行分类鉴定.
2 结果与讨论
约翰 纳什由于多方面的原因，我国有关海洋线虫方面的研究相对滞后，至今还缺乏我国海洋线虫系统完整的资料.为查清底数，掌握海洋线虫多样性情况，在前人工作的基础上，通过国家自然科学基金委对“黄海自由生活线虫的分类”和“东海自由生活线虫的分类和多样性”两个基金项目以及相关项目的资助支持，对黄海、东海自由生活线虫的分类和多样性进行了比较全面和深入的研究，同时，对渤海和南海的部分区域进行了初步的研究，建立了我国自由生活海洋线虫的分类系统和种名录，鉴定报导了260余种线虫，隶属于118属，36科，4目.其中包括3个新属和76个新种[8，33］，取得了开创性的研究成果，填补了国内研究的空白.至今，国际上已发现的海洋线虫有效种4 000余个，属于453属，45科，4目[4，9］.估计我国海域习见海洋线虫约有500－560种，海洋线虫总种数约1 000种左右，约占世界海洋线虫总数的1／4[10］.我国海洋线虫的研究还任重道远.
渤海是我国开展小型底栖生物和海洋线虫生态学研究的最早海区，不同季节和海域线虫的
sap2000
丰度为558±340－2 151±1 158inds／10cm2[11］，目前已报道的渤海线虫分类实体168种[12］，其中鉴定到种的只有54种[8］，发表的新种12种[13，14］，名录如下
（1）Thaoassironus bohaiensis，Zhang，1990.
（2）Parocomesoma heterosetosum，Zhang，1991.
（3） Parodontophora marina，Zhang，1991.
（4）Dorylaimopsis tuneri，Zhang，1992.
（5）Dorylaimopsis rabalaisis，Zhang，1992.
（6）Cervonema deltensis，Hope ＆Zhang，1995.
（7）Amphimonhyatera circula，Guo ＆ Warwick，2000.
碳世纪
（8）Belbolla zhangi，Guo ＆ Warwick，2000.
（9）Setosabatieria jingjingae Guo ＆ Warwick，2000.济南的冬天笔记
（10）Tershellingia austenae，Guo ＆ Zhang，2001.
（11）Parodontophora deltensis，Zhang，2005.
（12）Paranticoma tricerviseta，Zhang，2005.
黄海是我国开展海洋线虫分类学研究最早的海区，也是目前研究较为详实的海区.不同季节和海域线虫的丰度为954±289－1036±484inds／10cm2[15］.1983年中国海洋大学张志南教授对青岛湾自由生活线虫3个新种的描述与发表开启了我国对海洋线虫分类学的研究的先河，此后，陆续有一批学者投入到该领域的研究，先后取得了一批研究成果.随着国家自然科学基金项目“黄海自由生活线虫分类研究”以及相关研究的实施，已鉴定描述黄海习见线虫240余种，隶属于1纲，4目，35科，116属.其中建立新属3个，发表新种54个，新属和新种的名录如下[17－23］
（1）无管球属Abelbolla，Huang ＆Zhang，2004.
（2）拟玛丽琳恩线虫属Paramarylynnia，Huang ＆Zhang，2007.
林业工人之歌（3）拟双单宫线虫属Paramphimonhystrella，Huang ＆Zhang，2006.
（1）Metoncholaimus meles，Zhang ＆Platt，1983.
（2）Oncholaimus sinensis，Zhang ＆Platt，1983.
（3）Oncholaimus qingdaoensis，Zhang ＆Platt，1983.
（4）Hopperia hexadentata，Hope ＆Zhang，1995.
（5）Abelbolla boucheri，Huang ＆Zhang，2004.
（6）Abelbolla waiwicki，Huang ＆Zhang，2004.
（7）Abelbolla huanghaiensis，Huang ＆Zhang，2004.
（8）Belbolla stenocephalum，Huang ＆Zhang，2005.
（9）Belbolla huanghaiensis，Huang ＆Zhang，2005.
（10）Belbolla warwicki，Huang ＆Zhang，2005.
（11）Terschellingia major，Huang ＆Zhang，2005.
（12）Halalaimus longiamphidus，Huang ＆Zhang，2005.
（13）Curvolaimus filiformis，Zhang ＆ Huang，2005.
（14）Sabatieria stenocephalus，Huang ＆Zhang，2005.
（15）Setosabatieria coomansi，Huang ＆Zhang，2005.
（16）Oncholaimus multisetosus，Huang ＆Zhang，2005.
（17）Parodontophora wuleidaowanens，Zhang，2005.
（18）Paramphimonhystrella elegans，Huang ＆Zhang，2006.
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