视网膜Müller细胞体外培养研究作者：张海涛 李燕 唐志萍来源：《医学信息》2014年第09期 摘要：Müller细胞是视网膜中有着重要作用的神经胶质细胞，针对该细胞的体外培养国内外也做了大量的工作，本文就目前视网膜Müller细胞的体外培养、分离、鉴定、纯化等方法的研究进展进行综述。大河茶馆
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Müller细胞是视网膜神经胶质细胞中最主要和最重要的胶质细胞，参与了视网膜神经节细胞的代谢、内环境稳态以及神经递质的运输、摄取和代谢[1]。因而Müller细胞在视网膜神经节细胞的生长、损伤、修复和再生中起到重要的作用，是引起多种眼底疾病甚至导致失明的原因之一[2，3]。现今对视网膜Müller细胞的研究也经越来越受到重视，努力探寻一种最有效的体外培养视网膜Müller细胞的方法，以便更好的研究视网膜Müller细胞的功能及作用成为热点之一。
视网膜Müller细胞在体外能更好的培养生长，常常需要对培养板、培养皿进行包被预处理，这样有利于视网膜胶质细胞的贴壁生长，常用的包被物有鼠尾胶原、层黏连蛋白、多聚氨基酸等[4，5]。
1.1鼠尾胶原包被法 参照我国学者任海涛等[6]的方法，通过对SD大鼠鼠尾进行剥离取得鼠尾腱，用Tris-HCl 缓冲液、胃蛋白酶处理后获得鼠尾胶原蛋白原液、然后反复进行分级盐析、复溶得到鼠尾胶原蛋白。使用时用高纯度蒸馏水稀释成0.1mg/ml的质量浓度，再以50ul/cm2的量均匀涂抹覆盖于培养板、培养皿的全部底层表面，然后再室温静置放30min左右。吸除多余的的液体，予少量的灭菌蒸馏水洗涤，然后将水吸净即可。致幻
1.2阴离子表面活性剂层黏连蛋白和多聚氨基酸包被法 用1ug/ml的层黏连蛋白或者0.1mg/ml的多聚氨基酸直接加入培养板、培养皿盖过内底板于37℃过夜[7]。或者先用多聚氨基酸包被2h，37℃，然后再吸净，然后加入层粘连蛋白覆盖全部底层表面，然后37℃跨越百年的美丽主要内容过夜。吸净液体即可。中星1a
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