I C S07.080
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G B/T34777 2017
我不是一个坏女孩中国仓鼠卵巢(C H O)细胞表达产品残留D N A检测荧光定量P C R法 D e t e c t i o no f r e s i d u a lD N Ai nb i o l o g i c a l p r o d u c tw h i c h e x p r e s s e d f r o m
C h i n e s e h a m s t e r o v a r y(C H O)c e l l
F l u o r e s c e n t q u a n t i t a t i v e p o l y m e r a s e c h a i n r e a c t i o na s s a y
2017-11-01发布2018-05-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中华人民共和国
国家标准
中国仓鼠卵巢(C H O)细胞表达产品残留D N A检测荧光定量P C R法
G B/T34777 2017
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中国标准出版社出版发行乌灵参
北京市朝阳区和平里西街甲2号(100029)北京市西城区三里河北街16号(100045)网址:w w w.s p c.o r g.c n
:400-168-0010
集里中学2017年11月第一版
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书号:155066㊃1-58352
前言
本标准按照G B/T1.1 2009给出的规则起草㊂声学处理
本标准由全国生化检测标准化技术委员会(S A C/T C387)提出并归口㊂
本标准起草单位：信达生物制药(苏州)有限公司㊁中国测试技术研究院生物研究所㊂本标准主要起草人：孙左宇㊁周李华㊁李雪峰㊁黄晓刚㊁袁志军㊁郭燕红㊂
中国仓鼠卵巢(C H O)细胞表达产品
残留D N A检测荧光定量P C R法
1范围
本标准规定了检测残留宿主D N A的荧光定量P C R法㊂
本标准适用于C HO(中国仓鼠卵巢细胞)宿主细胞系表达的生物制品的残留宿主D N A的检测㊂2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的㊂凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件㊂凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件㊂
G B/T6682分析实验室用水规格和试验方法
马来酸酐3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件㊂
3.1
当飞机飞越彩虹
C t值c y c l e t h r e s h o l d
每个反应管内荧光信号达到设定阈值时所经历的循环数㊂
4缩略语
下列缩略语适用于本文件㊂
C HO：中国仓鼠卵巢(C h i n e s eH a m s t e rO v a r y)
5原理
以真核细胞基因组中具有高拷贝数的16S r R N A为目的基因，设计特异性扩增该基因的P C R引物，包括正向引物:F o r w a r dP r i m e r(5'-C C A G G C A T T G G T G G C A C-3')和反向引物:R e v e r s eP r i m e r (5'-A G A C A G G G T T T C T C T G T-3')㊂
采用S Y B R荧光定量P C R(F Q-P C R)法，采集荧光绘制出的P C R扩增曲线C t值，与扩增体系中起始目的基因模板的对数值呈反比，以起始模板D N A对数值为纵坐标,C t值为横坐标，制作标准曲线㊂根据标准曲线方程计算样品的D N A残留量，从而达到定量检测样品残留D N A的含量目的㊂
6仪器设备
6.1荧光定量P C R仪：含有S Y B R荧光染料检测通道㊂
6.2紫外-可见分光光度计：波长范围:200n m~760n m㊂
6.3微型离心机：转速范围:2000r/m i n~23000r/m i n㊂
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
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