•210•Modern Practical Medicine,February2021,Vol.33,No.2细胞蜡块联合免疫组化技术在肺癌胸水细胞学 检验中的可靠性分析
张艳胜，胡赞
【摘要】目的探讨细胞蜡块联合免疫组化技术在肺癌胸水细胞学检验中的应用价值。方法收集经活检标本病
理确诊的116例肺癌患者及胸水标本，釆用薄层液基细胞学沉降式制片和制备成细胞蜡块后结合免疫组织化学染
进行检查，以活检标本病理诊断为“金标准”，对比两种方法染的效果及诊断准确率。结果薄层液基细胞学 沉降式制片的图像清晰度高，细胞均匀，且细胞形态良好，但是缺少一定的成团结构和腺样结构；而细胞蜡块结合
免疫组化染法的图片染清晰度高，细胞数目多且均匀分布，而且还可以在多数切片中直观地观察到细胞具体
的排列方式和结构。细胞蜡块结合免疫组化染法的诊断准确率为79.31%(92/116)，高于薄层液基细胞学沉降式
制片的62.07%(72/116)(P<0.05)。结论细胞蜡块联合免疫组化技术在肺癌的诊断及分型中具有较高的价值。
【关键词】肺癌；胸水细胞；细胞蜡块；免疫组化技术；分型
doi:10.3969^.issn,1671-0800.2021.02.033
【中图分类号】R365【文献标志码】A【文章编号】1671-0800(2021)02-0210-02
肺癌属于我国发病率最高且临床最常见的一种癌症,15%的肺癌患者在就诊时麗註胸腔积液,50%fe右的患者在嘶发展过程中也会出现胸腔积液3，这时患者已经错过了最佳的手术切除时机，严重影响后期的预后。所以及早发现疾病，及时采取有效的，对控制疾病发展，改善患者预后具有至关重要的作用叫胸水、痰磁支气管灌洗液等细胞学标本为疾病确诊的关键线索3。但是目前传统细胞学制片技术尚不完善，存在诸多的缺点，很难保障诊断的准确性叫为了解决这一问题，本研究以确诊肺癌患者的胸水标本为研究对象，探讨细胞蜡块联合免疫组化技术在临床诊断中的应用价值，顼搬道如下。
1资料与方法
1.1一般资料回顾性分析2016年2月至2019年12月浙江中医药大学附属湖州中医院确诊的肺癌患者116例，并收集患者的胸水标本，男76例，女40例；年龄29〜86岁，平均(54.0±10.6)岁。纳入标准:(1)入院后均接受活检病理诊断确诊为肺癌；(2)签署知情同意书。排除:⑴临床资料不完整;⑵合并严重呼吸系统疾病;(3)合并严重心脑血管疾病者。
作者单位：313000浙江省湖州，浙江中医药大学附属湖州中医院
通信作者：张艳胜，Email：5146666 *********12方法对116例胸水标本分别采用薄
层液基细胞WC降式制制备测
进行检查。
1.2.1薄层液基细胞学沉降式制片选
取100ml的新鲜胸水标本，将其放置在
专用的保存液中，匀速摇晃，确保两种液
体充分混合。之后取50ml混合液，采
用］500r/min的速度离心，时间5min，离
心后去除上清液，直至约剩余2ml，摇晃均
匀。把混匀的标本®A制片器中，接着将
辭混匀标本的制片器枷的飒液基细
胞薄层制片机中，采用1000血iin的速鯛
心，时间3nin，等时间到后取出制片器，拆
取玻片，待玻片稍干后将制好的玻片立即放
入95%的乙醇中固定10min.然后依染
樹，苏林注3min,PBS强水溺
放入伊红染30s，再经由低到高的梯度乙
醇脱水，二甲苯透明冲性树胶封片。
1.2.2细胞蜡块联合免疫组化染将
薄层液基细胞学沉降式制片后剩余的胸
水样本添加到保存溶液中，静置在4°C
冰箱内，直到细胞能够完全被沉淀，之后
将上清液全部除掉，接着加入10ml95%
的乙醇以2000r/min的速度完成离心，
离心时间5min，静置30min，取出沉淀
物用棉纸包好放进包埋盒，在莱卡脱水机
中快速处理3h后进行常规包埋，完成切
片。TTF-l、CK7、CK5/6、Ki-67抗体均购
于福州迈新生物技术有限公司；采用Ma-
xMsion法对细胞蜡块进行免疫组化手工
染。把蜡块切成均匀3pm厚度的蜡片，
防脱玻片裱片，二甲苯完成脱蜡，行常规由
高到低梯度乙醇水化，蒸憾水水溺飒
己煮开的新鲜配置的］:50的EEHA液中,
不锈钢锅盖不要盖紧，最小火加热20min,
钻井泥浆膨润土时间到后，关掉电磁炉，令其自然冷却，接
着蒸憾水水洗3次,3min/次，放入浓度为
3%的中室温下孵育时间10min,PBS
缓冲液冲洗3次,3min/次，除去PBS，切片
上滴加一抗TTF-1,CK7,CK5/6及Ki-67,
室温下孵育时间60mm,PBS缓冲液冲洗
3次,3min/次，除去PBS，切片上滴加Ma-
xMson-HRP，室温下孵育时间15min,PBS
缓冲液冲洗3次,3min/次，除去PBS，切片
上滴加新鲜配置的DAB显试剂显时
间10min，流水冲洗终止显，接着苏木素
染1min,PBS返蓝，由低到高的梯度乙
醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。
1.3观察指标以活检标本病理诊断
为“金标准”，对比两种不同制片方法的
诊断准确率及染效果。
1.4统计方法采用SPSS20.0统计软
件进行分析，计数资料釆用/检验,P<
0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1两种不同方法制片的染效果
薄层液基细胞学沉降式制片的图像清晰
度高，细胞均匀，且细胞形态良好，但是
缺少一定的成团结构和腺样结构(封四
现代实用医学2021年2月第33卷第2期•211•
彩图3)；而细胞蜡块结合免疫组化染法的图片染清晰度高，细胞数目多且均匀分布，而且还可以在多数切片中直观地观察到细胞具体的排列方式和结构(封四彩图4)。
2.2两种不同方法制片的诊断准确率比较细胞蜡块结合免卿化染法的准确率为79.31%(92/116)，高于薄层液基细胞学沉降式制片的62.07%(72/116)(r=8.32, P<0.05)；在细胞蜡块联合免疫组化诊断中，腺癌64例、鳞癌、腺鳞癌、未分化癌及不确定类型分型中，腺癌的准确率最高(91.43%),8例肺癌无法分型。见表1。
3讨论
本研究结果显示，采用细胞蜡块联合免疫组化染法的诊断准确率高于薄层液基细胞学沉降式制片(P<0.05)，这说明细胞蜡块与免疫组化染法联合诊断能够有效检出细胞的具体结构，解决传统检测技术存在的缺陷和弊端，提高诊断的准确率。两种不同制片方法可以相互补充，提高诊断的准确率，实现组织学活检的目的，为医生对肿瘤组织分型、判断肿瘤的来源及对症提供有力的依据叫对于晚期肺癌患者，体腔积液属于主要的临床表现，采用传统细胞学检查只能为医生诊断恶性肿瘤提供有力依据，无法为医生及时发现原病灶提供数据支撑，但是由于细胞蜡块组织切片能够反复、连续性的操作，而且采用细胞蜡块技术检测不会出现细胞丢失的现象，也能将少数的恶性细胞有效检出，避免出现漏诊和误诊®。
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(上接第203页)
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肝胆病杂志.2019.35(11):2426-2430.组织标本的病理组织进行分型，不利于后
中国实行的社会养老保险基金运行模式是期的诊断和。釆用细胞蜡块联合免
疫组化染可有效解决该难题，提高诊断
的准确率，为后期提供有力依据。所
以在传统诊断技术的基础上联合细胞蜡
往来业务核算块诊断法，可为及时到原发病灶提供重
要的线索；同时也可以对细胞组织进行分
型，加强对分子病理的检测，为后期个性
化提供有力的依据。由此可见，该诊
断方法在临床上具有显著的应用价值。
制作细胞蜡块过程中也有几点需特别注
意:⑴离心时转速应<2500r/min；(2)
离心管要首选漏斗状的，如果有血性的
标本，要首先去除红细胞，取出细胞团块
时最好釆用顶针捅出的方法。
综上所述，对于肺癌胸腔积液患者,
细胞蜡块联合免疫组化染诊断有一定
的临床应用价值，能够为患者的诊断和
癌症分型提供有力的支持，从而可以及
时釆取有效的方法进行。
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表1两种不同方法制片的诊断准确率比较例
分型病理检查结果细胞蜡块联合免疫组化薄层液基细胞学沉降式制片腺癌706448
鳞癌221610
腺鳞癌1442
未分化癌1000
不确定类型0812
合计1169272
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(本文编辑：吴迪汉)
蒋玉燕，郭良堂，项晓觉，等•血浆MCP-hLOX-1及D-二聚体在急性冠状动脉综合征患者诊断、危险分层及预后中的意义（见正文第176页）
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GRACE 评分（分）
图1 ACS 患者血浆MCP-kLOX-l.D-D 水平与GRACE 评分的相关性
李立文•术前D-二聚体、白蛋白与超氧化物歧化酶在脑胶质瘤及脑转移瘤鉴别诊断中的价值（见正文第193页）
1.0
0.8
曲0 6硬
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十六大报告0.2
0.0
0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
D-D «ALB ・-SOD
参考线
1.0
0.80.6 塑
§ 0.4
0.2
0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
1—特异性
-DD+ALB -DD+SOD ■ -ALB+SOD
-DD+ALB+SOD
••参考线
1—特异性
A
B
图2各指标单独及联合检测鉴别诊断胶质瘤与脑转移瘤ROC 曲线
张艳胜，胡赞•细胞蜡块联合免疫组化技术在肺癌胸水细胞学检验中的可靠性分析（见正文第210页）
图3薄层液基细胞学沉降式制片（HE 染,xlO ）
图4细胞蜡块结合免疫组化染制片（免疫组化染,xl0）
李佩如，陈豪.MRI 对膝关节损伤的诊断价值分析（见正文第245页）
软轴
图5鶴骨挫伤、图6胫骨挫伤、图7外侧半月板后角前交叉韧带损伤伴关节腔积液及软纵向水平状撕裂图8内侧半月板体部前 角垂直撕裂
图9外侧半月板环状垂直撕裂倾向桶柄状
图10半月板桶柄样撕 裂“双交叉韧带征”
敝及关节腔积液组织挫伤
林益凯，孙国安，蔡哲锋，等•恶性萎缩性丘疹病致小肠穿孔、脑梗塞伴脑出血一例报告（见正文第268页）
台湾省农会
图11颈胸部皮肤病变图12小肠术中病变情况图13颅脑MRI 影像
国内统一刊号：CN33-1268/R 国内定价：10.00
元
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