使⾼效液相⾊谱仪系统良好运⾏的第三个要点是保持系统的清洁。你需要关注流动相流经该系统的所有地⽅,对于这些 地⽅经常性的冲洗,将使你的系统保持在“Ready”状态。
1、流动相储液瓶
⾸先要经常清洗流动相储液瓶,或者每做⼀批新样品更换⼀次流动相。⼀个脏的储液瓶将会污染注⼊的流动相。建议储液瓶中缓冲液使⽤时间不要超过⼀周,⽽有机溶剂使⽤时间不要超过⼀个⽉。也有⼈建议储液瓶中保持⽤溶剂充满,直到更换分析⽅法储液瓶需更换新溶剂(流动相组成发⽣变化)时,将旧溶剂倒掉更换新溶剂,这样胜于将溶剂⽤完。但这对于分析样品量少的实验室⽽⾔似乎有些浪费。仪器公司的⼯程师建议储⽔瓶的⽔要天天换,每周瓶⼦还应该⽤异丙醇清洗⼀次。有的实验室则在⽔⾥加⼊0.1~1 mM的甲酸抑制微⽣物的⽣长。这些做法看起来有些繁琐,但却能起到“磨 ⼑不误砍柴⼯”作⽤。
赛博格2、泵
接下来要冲洗的是泵。千万不要⼀分析完冲⼏分钟后就停泵,特别是当流动相中含有难挥发的缓冲液(如磷酸盐)时。如果仪器不是连续使⽤,当流动相蒸发时,难挥发物就会粘在活塞密封垫的表⾯,难挥发物将形成固形物沉淀。这是泵密封垫磨损和单向阀渗漏的主要原因之⼀。所以,⽆论使⽤长短,在停泵以前⼀定要⽤⾮缓冲液流动相冲洗泵在半个⼩时以上,要是流动相中有难挥发缓冲盐则建议冲洗的时间应该更长些。
三中全会报告3、⾃动进样器
⾃动进样器也要按规定清洗。现在的仪器多配有⾃动进样器的冲洗液瓶,通常只要注意及时更换、补充冲洗液即可。⾃动进样器⽤的洗涤液也要采⽤与流动相相同的⽅式处理,并根据溶剂的有效期和规定,清洗储液瓶或更换洗涤液。现在的⾃动进样器设置、操作都很简单,如果时间允许(特别是利⽤夜间运⾏),每次分析完后设置进1、2针纯溶剂(如甲
醇、⼄腈),也是⼀个好做法。
4、⾊谱柱
基因工程技术对柱⼦的污染是随使⽤时间⽽增加。通常表现是:运⾏⾛基线时在记录的⾊谱图中基线噪⾳增加,泵压也增加。解决这个问题的zui有效⽅法就是在每⼀批样品分析结束后或准备卸下柱⼦时⽤⼤量的流动
是真名士自风流
相冲洗柱⼦(例如,甲醇、⼄腈和⽔)。⽤梯度冲洗效果更好,具体的⽐例要根据柱⼦的说明书和性质⽽定。活熊取胆汁
如果是正常使⽤,检测器将依据其性质并按照说明书规定进⾏洗。例如UV/VIS检测器或FL检测器,在对柱⼦和系统进⾏冲洗时也就⼀同对检测器流通池中污染物进⾏了清洗。但是蒸发光检测器或质谱仪则需要按照说明书进⾏定期清洗。这些检测器在使⽤时会有难挥发污染物沉积,如质谱仪离⼦源的喷针、⽑细管、锥孔板、预四极等部件,因⽽需要定期清洗。⽽且对联有这些检测器的系统冲洗时,最好与这些检测器断开,以减少对检测器的污染。