一、准备:
流动相:按方法要求配制流动相,经0.45undefinedm微孔滤膜过滤,并超声波脱气。 将清洗管路(不透明管)和洗针管路(绿管)分别放入适当的溶剂中。
洗针液(Needle Wash):溶解样品的良好溶剂(不要使用缓冲盐或酸、碱作为洗针液)。 柱塞杆密封清洗溶液(Seal Wash):5%-10%甲醇的超纯水
二:开机及平衡系统:
拉索
打开计算机登录windows后,依次打开2695、检测器的电源,等到仪器自检完毕后,进入Empower3软件。
2695面板Diag键,选择Prime SealWash,清洗泵头约1分钟;再选择Prime NdlWash,清洗进样针1-2次;
将配制好的流动相放入2695顶部左侧槽中,按2695面板Menu/Status键进入手动控制模式;按2695面板Direct Function键,将需要使用的A/B/C/D管路分别进行WetPrime,流速7.5mL/min,时间3-5分钟 ;设置A/B/C/D管路的流动相比例,按2695面板Direct Function键,进行WetPrime,流速7.5mL/min,时间3-5分钟
按2695面板Direct Function键,选择Purge Injector,冲洗进样器;
打开Empower3软件,点击运行样品,选择存放数据文件的项目和采集数据的系统,确定,建立仪器方法(设置2695的单次输送体积、流速、流动相比例、柱温;2489的模式、波长、采样速率;2475的模式3D或2D、激发(发射)波长、采样速率)和方法组;点击监视,观察基线,待基线平稳,可准备进样。
王安石百科
三、进样:
将样品放入2695样品盘中,记录每一样品对应的管号;
先在单进样状态进样一次,若条件适合,确定运行时间;
在样品状态编辑样品表,开始自动进样。
浏览项目→选择项目→通道→选择标准样→查看t→按钮进入向导→选择新方法→处理类型为LC→设置峰宽、阈值、积分区域、最小面积、峰命名→保存处理方法。
通道→选择标准样→右键改变样品→量→从处理方法复制→依次输入标准样品组分含量、单位→确定→保存
通道→先选择标准样再选择未知→处理→使用指定的处理方法(选择已保存的处理方法、清除校正)→确定。
VBR 结果(更新)→选择未知→查看→校正曲线图标(检查校正曲线)。
结果(更新)→选择未知→右键预览出版→使用下面的报告方法→打印(通过选择图标,可以将报告保存为PDF文件)。
五、关机:
按2695面板Diag键,选择Prime SealWash,清洗泵头约1分钟;再选择Prime NdlWash,不良供给
清洗进样针1-2次;按Menu/Status键进入手动控制模式,按Direct Function键,选择Purge Injector,冲洗进样器;
用含5%乙腈的超纯水置换缓冲盐流动相,清洗谱柱及系统(20倍柱体积),待系统中缓冲盐冲洗干净,用乙腈(甲醇)/水冲洗系统,用纯有机溶剂(乙腈或甲醇)充满系统,缓慢降低流速至零,关闭仪器电源,退出Empower软件,关计算机。