ABO正反定型不符的问题分析及解决办法
第一篇：ABO正反定型不符的问题分析及解决办法
ABO正反定型不符的问题分析及解决办法
ABO反定型是用已知的标准红细胞检测血清中未知的抗体 一．引起ABO正反定型不一致的原因分析 1.技术因素例如
(1)试剂贮存不当
(2)使用技术错误
(3)使用错误的试剂
(4)使用污染或失效的试剂
周易论文(5)离心速度不当 2.存在IgM性质的自身冷抗体
由于自身冷抗体(冷凝集病,CHD)而导致自身溶血的病人，在低于37℃时血细胞自发凝集，影响正反定型。
3.抗原表达弱或缺失例如 a.白血病 b.双胞胎 c.H基因变异 4.高水平可溶性血型物质的病人。5.混合视野：例如 (1)来自近期输注非ABO同型红细胞病人的血样
gamma分布(2)骨髓移植后不久
(3)Tn或A3型红细胞 6.缺失或弱抗-A、抗-B例如
近海风荷载(1)新生儿血清
(2)免疫缺陷、紊乱病人
(3)老年人 7.前带现象
当抗-A或抗-B的效价（如35000）IgG太高时, 立即离心法与A 或B细胞不反应。8.多凝集：多凝集红细胞，具有不正常的膜结构，可被正常成人血清凝集。9.不正常血清蛋白：
白蛋白/球蛋白比例失调的血清引起红细胞产生缗钱状假凝集。
10.血样血清中存在抗试剂成分的抗体：例如抗防腐剂的抗体、抗EDTA的抗体等，此种抗体可以通过将红细胞洗涤而解除。
二、ABO正反定型不符的解决方法有以下几个
（一）出现弱反应或缺失抗原的解决方法有
1.洗涤RBC且延长孵育时间进行试验，如果使用洗涤红细胞后反应加强，则考虑是血型物质的抑制
2.酶处理红细胞再次试验 3.吸收放散确定是否是亚型。
4.了解输血史(尤其是O型红细胞输注)来分析混合视野 5.了解病情诊断（尤其是白血病）6.了解是否是骨髓移植受者 7.了解是否是双胞胎
8.是否使用从前未使用过的单克隆抗体血清进行了血型鉴定 9.分泌型型物质检查
10.进行玫瑰花试验来确定是否混入其它红细胞，或进行细胞分离
（二）出现弱反应或缺失抗体例如 1.年龄：新生儿及老人。
2.低球蛋白血症：如白血病人、使用免疫抑止药物、低球蛋白的恶性淋巴瘤病人、骨髓移植后病人。
3.丙球缺乏血症：如免疫缺陷病人 4.双胞胎嵌合体 解决方法有 1.延长反应时间
2.放在室温检查血清中的抗体。用A、B、O及自身红细胞进行检查，用酶处理的A、B、O及自身细胞进行检查。可能需要在试验前进行冷抗体的自身吸收 3.确定病人年龄以及临床诊断（例如新生儿还有免疫病）有关新生儿血型，这是资格证经常考试的题目
例如，6个月大新生儿正定性型是O型，反定型是B型，请问新生儿是什么血型？答案应该是O型，因为婴儿尚未产生自己的抗体或有从母亲获得的血型抗体，所以新生儿不适合用血清做反定型。
4.确定输血史（例如非ABO同型的血浆输注）
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（三）出现多余抗原（额外抗原）可能情况有 1.抗原发生改变：
（1）获得性B：肠道疾病患者，细菌作用导致
（2）多凝集现象：红细胞被掘大多数人的正常血清凝集
2.红细胞已经被抗体包被：例如自家免疫溶血性贫血、输血反应及HDN。
3.非抗－A及抗－B的抗体与相应抗原形成复合体吸附在红细胞表面，引起正定型非特异性凝集。
4.混合视野：非同型输注，例如O型红细胞给其他型输用，非ABO同型的骨髓移植，A3亚型等。
5.低频率抗原抗体反应：定型血清中的存在低频抗原的抗体，与对应的低频抗原产生阳性反应。解决方法有
1.将红细胞洗涤再进行试验，确定是否是病人或献血员的血清中存在针对ABO定型试剂成分的抗体
2.用O型及自身红细胞于室温检查病人血清，确定血清中是否有冷自身抗体，如果有，则
用2ME或DTT处理。
3.用不同厂家的试剂检查洗涤的红细胞 4.了解病人的临床诊断
5.如果怀疑是获得性B，则用酸化的抗-B检查 6.进行ABH分泌型型物质检查
7.如果用多克隆抗-A检查结果是混合视野，则用蛋白酶处理RBC试验，考虑是否是多凝集
产生未知抗体反应的可能情况有
1.蛋白或血浆不正常引起的缗钱状凝集：
血清蛋白浓度异常，球蛋白浓度由于疾病而升高（例如多发性骨髓瘤），原发性巨球蛋白血症，纤维蛋白原浓度升高，血浆扩容剂的使用以及何杰金氏淋巴瘤，新生儿脐血中的华通氏胶。
2.冷反应性自身抗体：
存在ABO系统的意外抗体：例如A2或A2B个体血清中可能存在天然抗－A1，顺式AB人中弱的抗-B,导致反定型试验多出抗体。
3.被检者血清中存在ABO系统以外的特异性冷同种抗体，反定型时出现假阳性反应。解决方法有
1.在室温及4℃检查，确定是否存在自身抗体或冷同种抗体
2.洗涤红细胞再次进行试验，防止血清中有针对试剂红细胞保存液成分的抗体 在37℃定型，去除冷自生抗体干扰后定型，血型物质检测
（五）混合视野凝集的解决方法有 1.确定是否近期怀孕或输血 2.确定临床诊断（尤其是白血病）3.是否是骨髓移植受者 4.是否是双胞胎
5.用细胞分离术将两细胞分开，分别定型 6.ABH型物质检查 7.了解输血史
第二篇：ABO血型正反鉴定结果不符的原因分析
大连医科大学2012届本科毕业论文
ABO血型系统是人类发现的第一个血型系统，也是最重要的血型系统，对临床输血意义重大。ABO血型系统上有A、B、O、AB四种表型，也存在A亚型、B亚型、AB亚型。ABO系
统抗原则有A、B、AB、A1抗原，在胎儿的第9周就可以检测出来，这些抗原随着个体基因变异或疾病的影响而改变。ABO血型系统有两个特点：
一、人红细胞上缺少某个抗原，血清中就存在针对该抗原的抗体，而且是高效价的；
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二、不仅红细胞上有ABO抗原，分泌型者得分泌液中也存在某抗原[1]。根据这一特性来判断ABO血型。
临床上，当输入ABO血型不相合的血液时，会引起溶血性输血反应[2]，严重时会危及生命。为了保障临床输血的安全，对ABO血型定型规定做正反定型。当正反定型一致时，方可准确确定ABO血型。但实验中，往往会出现ABO正反定型不一致的情况。导致ABO正反定型不符的原因有很多，有试剂、方法、技术等因素的影响，更重要的是血液免疫因素的影响。本文就血液免疫因素方面对ABO正反定型的影响进行研究。现将武汉血液中心2011年1~4月份健康献血者ABO正反定型不一致及1~4月份医院送检的正反定型不符的患者标本进行研究，报告如下。
一． 材料与方法
1.1标本来源
武汉血液中心1~4月份健康献血者ABO正反定型不符标本及1~4月份各医院送检的正反定型不符而进行疑难血型鉴定的标本。其中健康献血者80例，患者标本35例。
1.2主要试剂与器材
试剂：抗-A、抗-B标准血清、抗-A1、抗-AB、谱细胞、O型试剂红细胞均为上海血液生物医药有限责任公司，人源性抗-A、抗-B，A、B型试剂红细胞为本输血研究室自制。
器材：离心机（日本久保田KA2200）；恒温水浴箱（HH60）；显微镜（CKTV-2）。穿过骨头抚摩你
1.3实验方法 1.3.1 ABO正定型实验
取两支试管，分别加入两滴抗-A、抗-B试剂，在各加一滴3-5％受检者红细胞悬液，混匀，3500r/min离心15秒，观察结果。怀疑为亚型时，再加做抗-AB、抗-H试验。
1.3.2 ABO反定型实验
取四支试管，先各加入两滴受检者血清，再分别加入一滴A、B、O型试剂红细胞和受检者红细胞悬液，混匀，3500r/min离心15秒，观察结果。
1.3.3 吸收放散及唾液血型物质检测
吸收放散：用生理盐水将3ml受检者压积红细胞洗涤三次，取洗后的压积红细胞2ml，加入对应的人源性抗血清，4℃下吸收1小时，吸收后用4℃生理盐水洗涤5次，再放于56℃放散10min，数次振荡，3500r/min离心1min，取2滴放散液，加入对应的1滴A、B、O试剂红细胞，混匀，3500r/min离心15秒，观察结果。
唾液血型物质检测：受检者唾液离心去杂质后，煮沸10min，3500r/min离心5min，以2+凝集强度为标准将抗-A、抗-B标准血清和抗-H标化，取1滴上清液与标化后的1滴抗-A、抗-B标准血清和抗-H中和，然后加入1滴对应的A、B、O试剂红细胞，混匀，大连医科大学2012届本科毕业论文
AB O AB 1 抗-JKb B AB AB 1 AmB亚型：A3B AB B AB 1 A2B有抗-A1 O A A 1 A亚型：Ael O B B 1 B亚型：Bel AB A AB 2 缗钱状凝集 A AB AB 3 缗钱状凝集 A O A 1 缗钱状凝集 B O B 2 缗钱状凝集 O A O 1 缗钱状凝集 A O A 2 ABO以外抗体
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