【摘要】 目的 建立测定维生素E(VitE)含量的高效液相谱法。方法 采用Shimadzu C18谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以甲醇为流动相；检测波长为284 nm，流速1.5 ml・min-1。结果 维生素E在0.125～5.0 mg・ml-1范围内，峰面积与其浓度线性关系良好（r＝0.999 9），高、中、低3种浓度的平均加样回收率为101.4％～102.7%，RSD为0.46％～0.71%，最低检测限为0.4μg・ml-1。结论 本法准确、简便、快速，适用于维生素E片的含量测定。 【关键词】 维生素E；高效液相谱法；含量测定海外卖松花蛋被查
Abstract：Objective To establish a RP-HPLC for determination of Vitamin E.Method Vitamin E was determinated on HPLC instrument fixed a Shimadzu C18 column (4.6mm×250mm，5μm) with UV detection at 284nm， and the mobile phase was MeOH， the flow rate was 1.5ml・min-1.Results The calibration curve was linear(r=0.9999)within the range of 0.125～5.0 mg・ml-1 for Vitamin E， the average recovery rates were from 101.4% to 102.7% for three different levels of the amount of Vit
amin E，RSD was from 0.46％ to 0.71%，and LOD was 0.4μg・mL-1.Conclusion This method was simple，quick，accurate and effective for determination of Vitamin E.It was suitable for the quality control for tabella Vitamin E.
Key words:Vitamin E;HPLC;determination
维生素E又称生育酚，是一种脂溶性物质，在人体内主要参与生育功能、肌肉代谢等过程，具有强大的抗氧化性，是人体必须的微量元素之一。目前VitE的主要分析方法包括化学发光抑制法［1］、UV法［2］、GC法［3］、荧光法［4］和HPLC法［5］等。在这些方法中化学发光法仪器要求特殊，而荧光法、UV法、GC法易受到辅料干扰。本文采用反相HPLC法测定VitE片含量，方法准确，不受其他成分干扰，取得比较满意的效果。
1 仪器及试剂
白鹿原上奏响一支老腔
横山大刀队 SPD-M10A高效液相谱仪（日本岛津）、LC-10AT 紫外检测器（日本岛津）；甲醇（分析纯，山东省禹王实业总公司禹城化工厂）、无水乙醇（分析纯，沈阳正信高科技研究所试剂部）、维生素E醋酸酯对照品（日本信越制药株式会社）、维生素E片（沈阳药科大学药分教研室提供）。
2 谱条件与系统适用性试验
谱柱：Shimadzu C18柱（5 μm，4.6 mm×250 mm）日本岛津公司；流动相：甲醇；流速：1.5 ml/min; 进样体积：20 μl；检测波长：284 nm；柱温：35 ℃；理论塔板数按维生素E峰计算应不低于5 000。
3.1 对照品溶液制备 取VitE对照品适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含VitE 1.5 mg的溶液，作为对照品溶液。
芜湖月中华情 3.2 供试品溶液配制 取VitE片10片，精密称定、研细。精密称取细粉适量加无水乙醇制成每1ml中含VitE 1.5 mg的溶液，摇匀。过滤，弃去初滤液，取续滤液作为含量测定的供试品溶液。
4 方法的专属性考察
在上述谱条件下， 分别取对照品溶液、供试品溶液及流动相20 μl注入液相谱仪，记
录谱图。供试品溶液的主峰与对照品溶液的主峰位置相同（约15 min），空白辅料在VitE峰位置处无谱峰，VitE峰与相邻杂质峰的分离度符合要求。试验表明该方法具有良好的专属性，见图1。
5 方法学考察
5.1 线性关系及检测限
A.blank adfuvant solutionB.ControlC.Sample
图1 维生素E HPLC谱图
Fig.1 HPLC chromatogram of Vitamin E
取VitE对照品适量，精密称定，用无水乙醇制备成含VitE 0.125、0.25、0.50、1.0、2.0、5.0 mg・ml-1的溶液，分别精密吸取20(l注入液相谱仪，记录谱图。以峰面积Y对维生素E浓度X进行线性回归，得回归方程为：y=3 149 247x+4781.6 r=0.999 9(n=6)。 VitE浓度与谱峰面积在0.125～5.0 mg・ml-1范围内线性关系良好（r＝0.999 9），检测限为0.4(g・ml-1（S/N=3）。
5.2 精密度试验
成长与成功 取VitE 对照品适量，精密称定，用流动相制备成含VitE 0.5、1.0、2.0 mg・ml-1的溶液，分别精密吸取20 μl注入液相谱仪，重复进样5次。各浓度峰面积的RSD分别为0.95%、0.55%、0.63%(n=5)。
5.3 重复性试验
取维生素E片10片，按3.2项下方法平行制备6份，分别进样20 μl；同时取对照品溶液20μl进样，按外标法测定标示百分含量。测得VitE标示百分含量的RSD为0.65% (n=6)。
5.4 回收率试验
精密量取VitE 对照品适量，照处方比例分别按高、中、低三个浓度（每个浓度各3份）与处方量的辅料混合均匀。按3项下方法制得供试品溶液，分别进样20 μl进行测定，按外标法分别测得高、中、低3浓度的回收率分别为102.7％，102.2％，101.4％；RSD分别为0.54％，0.46％，0.71％。
5.5 稳定性考察
用供试品溶液（1.5mg·ml-1），在不同时间（1、2、3、4、6、8h）进样20μl，峰面积的RSD为1.2%。供试品溶液在8h内稳定。
5.6 样品测定
分别取VitE片（三批样品分别是690 213、690 219、690 226）及VitE对照品适量，照3项下方法制备。精密量取对照品溶液与供试品溶液各20 μl，分别注入液相谱仪，记录谱图。按外标法以峰面积计算出各处方样品含量，三批VitE片中VitE的标示百分含量分别是99.97%，98.76%，102.09%，RSD分别为0.75%、0.62%、0.38%。
6 讨论
本文比较甲醇/水、甲醇/乙腈、甲醇/冰醋酸
几种流动相，因VitE为脂溶性维生素，在甲醇/水流动相中出峰时间延长（大于25min），峰形较差，故而没被采用。而甲醇/乙腈、甲醇/冰醋酸作为流动相，虽然能够得到较好的峰形和出峰时间，但均因溶液配制复杂，价钱昂贵等原因没被采用。
【
参考文献
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