免疫比浊法与免疫荧光定量分析法测量血清降钙素原比较

免疫浊法与免疫荧光定量分析法测量血清降钙素原比较
目的:比较免疫比浊法和免疫荧光定量分析法在测量血清降钙素原时的结果。方法:选取把在笔者所在医院进行降钙素检测的202例浓度不同的血清降钙素,分别用浙江兰森生物科技有限公司生产的乳胶增强免疫比浊法和广州万孚生物公司生产的免疫荧光定量分析法同时进行监测,并对结果和数据进行统计学的分析。结果:经比较,这两种方法在轻度升高组、低风险组、阴性组的浓度值方面比较,差异无统计学意义(P>0.05);在高度和中度升高组的浓度值方面比较,差异有统计学意义(P<0.05),免疫比浊法结果稍高于免疫荧光定量分析法的结果;总阳性率的比较方面,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:免疫比浊法和免疫荧光定量分析法均可用于临床血清降钙素原的检测,且免疫荧光法操作比较简便。
[Abstract] Objective:To compare the results of the immune turbidimetric method and immunofluorescence quantitative analysis method in the measurement of serum calcitonin original.Method:202 cases of different concentrations of serum calcitonin were selected,they were all checked by zhejiang ransom biotechnology co.,LTD.Production of latex enhanced immune turbidimetry and guangzhou Wan Fu biological immunofluorescence qua
ntitative analysis production company at the same time,the results and data statistics were analyzed.Result:the concentration values of the two methods in elevated group,the low risk group,negative group had no statistically significant(P>0.05);the concentration values of the two methods in highly group and moderately elevated group concentration had significant difference(P<0.05),immune turbidimetry results were slightly higher than the analysis results of immunofluorescence quantitative.The total positive rate of two methods had no significant difference(P>0.05).Conclusion:Immune turbidimetry and immunofluorescence quantitative analysis can be used for clinical serum calcitonin original detection,and immunofluorescence operation is more simple.
[Key words] Immune turbidimetry; Immune fluorescence quantitative analysis; Serum calcitonin original
降钙素原(PCT)就是降钙素的前体,是116个氨基酸所组合成的糖蛋白[1],主要是神经内分泌细胞(主要包括肺、甲状腺、胰腺组织里面的C细胞)来表达,正常生理的情况下,
在血液中是检侧不到的,属于一种脓毒的诱导蛋白,可以作为炎症新的指标,在感染性疾病的鉴别、诊断、抗生素临床应用指导、病情的检测中广泛的应用。随着医学科学技术的发展,降钙素原的检测方法越来越多,主要有电化学的发光免疫法、免疫比浊法和免疫荧光定量分析法等[2],本文就免疫比浊法和免疫荧光定量分析法分别测量血清降钙素原的结果进行比较分析,现报道如下。
李盛才
1 资料与方法
1.1 一般资料
标本来源于笔者所在医院儿科、ICU病房、呼吸内科、外科、骨科、心内科等临床科室的患者202例浓度不同的降钙素原。
陈柳钦1.2 检测仪器和试剂
使用的是广州万孚生物有限公司所生产免疫荧光定量分析法使用的仪器和其配套的试剂;浙江兰森生物科技有限公司生产的乳胶增强免疫比浊法使用的仪器和其配套试剂。
1.3 方法
将202例患者浓度不同的降钙素原标本做离心沉淀,并将每份标本分成等量的两份,其中一份采用浙江兰森生物科技有限公司生产的乳胶增强免疫比浊法仪器作PCT检测,另一份采用广州萬孚生物有限公司所生产免疫荧光定量分析法使用的仪器作PCT检测,对两种方法检测的结果进行统计学分析。1.4 统计学处理
采用SPSS 18.0软件系统对所得数据进行统计学的分析,计量资料以(x±s)表示,采用t检验,计数资料采用字2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 免疫比浊法和免疫荧光定量分析法检测比较
阳性标准:PCT>0.1 ng/ml。免疫比浊法检测的总阳性率为50.50%;免疫荧光定量分析法检测总阳性率为52.47%,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05),见表1。
2.2 免疫比浊法和免疫荧光定量分析法不同浓度值例数的比较
在5个组中,3组、4组和5组低浓度时的例数,免疫比浊法检测例数分别为42例、33例、10
0例;免疫荧光法检测例数分别为48例、31例、96例;两组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。在1组、2组的高浓度时,免疫比浊法检测例数为3例、24例;免疫荧光检测例数为13例、14例,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05),见表2。
3 讨论
免疫比浊法(Asssys)是抗原和抗体结合进行动态检测的一种方法。原理是:在特殊的稀释液系统中,抗原和抗体反应并且在适宜的比例(规定是抗体过量时)时,产生可溶性的免疫复合物在促聚剂(主要是聚乙二醇)的作用下,从稀释系统的液相中析出,并形成微粒,反应液里出现浊度。如果抗体的浓度固定时,则形成免疫复合物的量就随着检验样品中抗原的量的增加而不断增加,在反应液中出现的浊度也增加[3-4]。然后通过检测反应液的浊度,并和一系列的标准品进行对照,计算出检验样品中的抗原的含量[5]。免疫比浊法在临床试验中总结出以下注意事项:(1)抗原和抗体比例要适合,如果抗原或者抗体的量过大很多时,就可以出现可溶性的复合物,从而造成误差;(2)在进行检测的过程中,要始终保持反应管中的抗体过剩;(3)此种检测方法容易受血脂的影响,而导致结果有偏差[6]。
在免疫比浊法的检测中,主要分为免疫投射比浊法、免疫散射比浊法和免疫乳胶比浊法[7],在本次的研究中,使用的是乳胶比浊法,就是将需要测量的标本相应的抗体用胶乳颗粒(直径15~60 nm常见用聚苯乙烯)包被,致使抗原和抗体的结合物体积增大,通过光之后,散射光或透射光的变化强度更大,从而使检测的敏感性提高。
免疫层析法的原理是根据高特异性抗原和抗体的反应,预先在聚酯膜上包被的有金标记降钙素原的单克隆抗体和标本中降钙素原结合,在毛细的效应下,结合物向上层析,然后,用免疫定量的分析仪对检测区进行扫描,取得相应光学的信号,信号通过标准曲线转变为降钙素原的浓度[8]。此种方法操作方便、线性范围宽、精密度高、重复性也好,被广泛应用于实验室[9]。但也有一定的局限性,有时会出现假阴性和假阳性的结果,和国外的先进仪器比较,免疫荧光定量分析法还需要大量的相关性的研究。
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在本次研究中,免疫比浊法和免疫荧光定量分析法检测降钙素原的相关性比较好,和文献[10]的报道基本一致。两种方法的总阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05);但在中、高浓度的比较上,两种方法还存在差异,差异有统计学意义(P<0.05),还需要进一步的研究来证实。
综上所述,免疫比浊法和免疫荧光定量分析法各有特点,两种方法的在临床上均可使用,在PCT高浓度检测时,建议最好采用免疫比浊法做校正。
参考文献
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