一、 目的要求
了解IMVIC与硫化氢反应的原理及其在肠道鉴定的意义。
二、基本原理
IMVIC是吲哚试验（idol test）、甲基红实验（methyl red test）、伏—普试验(Voges—Prokauer test, V.P.试验)和柠檬酸盐试验(citrate test)的缩写。 四个试验主要用来鉴别大肠杆菌与产气杆菌(Eenterobacter aerogenes)，而且主要用于水的细菌学检查，因为大肠杆菌虽非致病菌，但饮水中若大肠杆菌超过一定数量则表示受到粪便污染，而产气肠杆菌则广泛存在于自然界中，因此，检查水时要将二者区分开来。 硫化氢实验也是检验肠道杆菌的生化实验。
吲哚实验。有些细菌含有氨酸酶，能分解蛋白胨中的氨酸产生吲哚。吲哚与对二甲基氨基苯甲醛结合，就会形成红的玫瑰吲哚。
氨酸水解反应：
吲哚与对二甲基氨基苯甲醛反应：
大肠杆菌吲哚反应阳性，产气肠杆菌阴性。
甲基红试验。某些细菌在糖代谢过程中，将培养基中糖先分解成丙酮酸，丙酮酸再分解成甲基、乙酸、乳酸等，因而使培养基变酸，用甲基红指示剂[pH4.2（红）—6.3精神专科（黄）]，可使培养基由原来的桔黄变为红，即甲基红阳性反应。大肠杆菌为阳性反应，产气杆菌为阴性反应。 夯实基础伏—普试验。某些细菌可利用葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸进行缩合，脱羧变成乙酰甲基甲醇，此物在碱性条件下能被空气中的氧气氧化成二乙酰。二乙酰与蛋白胨中的精氨酸的（ ）基作用，生成红化合物，即伏—普反应阳性，没有红化合物产生则为阴性。其反应过程如下：
中档化妆品产气肠杆菌伏—普反应阳性，大肠杆菌伏—普反应阴性。
柠檬酸盐试验。有些细菌能利用柠檬酸钠作为碳源，例如产气肠杆菌；而另一些细菌不能利用柠檬酸钠，例如大肠杆菌。细菌在分解柠檬酸盐及培养基中的磷酸铵后，产碱性化合物，使培养基pH升高，在有１％溴麝香草酚蓝指示剂的情况下，培养基由绿变为深蓝。溴麝香草酚蓝的指示范围为：pＨ小于６.０时呈黄，pＨ在６.０－７.６时为绿，pＨ大于７.６时呈蓝。
硫化氢试验。有些细菌能分解含硫的有机物，如胱氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸等产生硫化氢，硫化氢遇培养基中的铅盐或铁盐等，则形成黑的硫化铅或硫化铁的沉淀物，从而可确定硫化氢的产生。
男医生与女病人 大肠杆菌为阴性，产气杆菌为阳性。
IMViC
具体内容
用来测定菌的生理生化特征的4个实验.
I:吲哚试验
M:甲基红试验
蓝血人作品
V:V.P试验
C:柠檬酸实验
i是为个好读加上去的.
1.吲哚试验
上海市第五十四中学
①试验菌用蛋白胨水培养基37℃培养24小时.
②在培养液中加入乙醚1ml(使呈明显的乙醚层)充分振荡,使吲哚试剂溶于乙醚.静置片刻,待乙醚浮于培养液上面时沿管壁慢慢加入吲哚试剂10滴.呈玫瑰红的为阳性,不变的为阴.
(注:加入吲哚试剂后,不可再摇动,否则红不明显)
2.甲基红试验
①试验菌用葡萄糖蛋白胨培养基37℃培养24小时.
②沿管壁加入M.R.(甲基红)试剂3-4滴.红的为阳性,黄的为阴性.
3.V.P试验
①试验菌用葡萄糖蛋白胨培养基37℃培养24小时.
②加入40%KOH 10-20滴,再加入等量α-茶酚,用力振荡(拔去棉塞)再放入37℃4h后再观察,仍无产生为阴.
4.柠檬酸实验
①将试验菌培养在柠檬酸盐培养基斜面上37℃培养24-28小时.
②观察有无细菌生长与培养基颜变化.如果含有溴麝香草酚蓝的斜面蓝者为阳性反应,呈绿的为阴性反应;含苯酚红的斜面如果呈红为阳性反应,呈黄为阴性反应.
作用
这4个试验主要是用来快速鉴别大肠杆菌和产气肠杆菌，多用于水的细菌检查。大肠杆菌虽非致病菌，但在饮用水中如超过一定数量，则表示水质受粪便污染。产气肠杆菌也广泛存在于自然界中，因此检查水时，要将两者分开。
IMViC试验 IMViC试验 细菌的生化反应用于鉴别细菌，尤其对形态、革兰染反应和培养特性相同或相似的细菌更为重要。吲哚（I）、甲基红（M）、VP（V）、枸橼酸盐利用（C）四种试验常用于鉴定肠道杆菌，合称为IMViC试验。例如大肠埃希菌对这四种试验的结果是“++--”，产气肠杆菌则为“--++”。
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