我国HIV常用检测方法和流程

我国HIV常用检测方法和流程
初筛抗体+WB法确认
目前国内实验室多采用「初筛抗体+WB 法确认」等两步法进行HIV检测及确诊。初筛实验室初筛阳性,不能出具阳性报告,必须进入复检试验。对初筛有反应的样品,用原有试剂双份或双孔进行复检试验(或者两种试剂复检),如均无反应,报告「HIV 抗体阴性」;如均有反应或一个有反应一个无反应,需要送检做确证实验,报告HIV 感染待确定。目前大部分临床实验室为艾滋病初筛实验室,开展常规初筛实验,发现阳性结果初步复检后送省市CDC 或当地其他确认实验室做确认实验。
1、条带
条带是HIV确认实验——免疫印迹试验(WB)实验所呈现出的结果,如上图。原理是WB 采用间接法检测样品中的抗HIV-1/HIV-2 特异性抗体。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳把分子量大小不等的HIV 蛋白分离开来,经过一系列处理后,硝酸纤维素膜显示与特异抗原的结合的抗体条带,从而确诊抗体的存在。
HIV-1抗体特异带包括
env带:gp160/gp120、gp41;gag带:p55、p24、p17(或p18);pol带:p66(或p65)、p51、p31。
HIV-2抗体特异条带包括
env带:gp140/gp105、gp36;gag带:p56、p26、p16;pol带:p68、p53、p34。(由于使用的毒株不同,HIV-2 env带也可为gp125/gp80、gp36)。
2、根据条带判断是否感染HIV
HIV-1抗体阳性
同时符合以下2条标准可判为HIV-1抗体阳性:
半导体集成电路①至少有2条env带(gp41和gp160/gp120)出现,或至少1条env带和p24带同时出现;②符合试剂盒提供的阳性判定标准。
沛县电视台(目前实验室判定阳性一般是gp41和gp160/gp120+p24)
HIV-2抗体阳性
出现HIV-2型特异性指示带的样品:如果同时呈HIV-1抗体阳性反应,报告HIV-1抗体阳性,不推荐进一步做HIV-2抗体确证试验;如果同时呈HIV-1抗体不确定或阴性反应,需用HIV-2型确证试剂再做HIV-2的抗体确证试验。
同时符合以下二条标准,即出现至少2条env带(gp36和gp140/ gp105),和试剂盒提供的阳性判定标准,可判为HIV-2抗体阳性。数学最高奖女得主
HIV抗体阴性
无HIV抗体特异带出现。
HIV抗体不确定
丁pv病毒出现HIV抗体特异带,但不足以判定阳性。
第一个问题,出现gp160+p24,可能是不符合试剂盒要求,该检测试剂要求必须有gp41才能确证。gp160+p24同时出现,最终确诊阳性的接近100%。
第二个问题,是出现HIV抗体特异带,但不足以判定阳性。这种情况在孕妇、免疫缺陷疾病患者较为常见,也有身体很好,不知什么原因,身体中存在某种特殊的干扰物质,如果
此人没有相应的高危行为,绝大部分都会被排除。出现这样的问题,是否发生过高危行为,是推测最终是否能够排除的最有利的证据,接诊的大夫一定要做好解释工作,缓解由假阳性结果引起的焦虑。
出现HIV抗体不确定,建议检测者4周后复查,4周后的检查结果可能出现下面4种情况。
张之香
▲条带不进展,排除。
▲条带进展,符合HIV确诊,出确证报告(证明上次检测在窗口期)。
▲条带变化,依然不符合HIV确诊,建议4周后复查,或者做HIV核酸定量或者定性检测,核酸检测检测不到病毒,排除。
▲条带依然不符合HIV确诊,但有典型的艾滋病症状,建议做核酸检测。两次不同时间的核酸检测,病载大于1000,可以结合WB结果,由确证实验室推断是否确证感染HIV。(证明患者是艾滋病感染末期,出现条带缺失)。第一次确证实验不确定,有艾滋病相关临床症状,也建议做核酸检测作为补充实验。
初筛实验假阳是什么情况
假阳性主要是由于某些人血清中存在某种干扰物质(不影响健康),还有其它如测定前对血清加热灭活、慢性血液透析患者、急性疟疾、麻疯分枝杆菌感染患者、系统性红斑狼疮等亦可致假阳性,孕妇孕产妇在HIV抗体筛查中存在较高的假阳性率,应根据实验结果并结合流行病学史等相关资料作出HIV感染判断,如果孕期检测HIV,出现阳性,尽快用另一种方法初筛方法进行复检,如果两种检测方法,只有一种阳性,你就可以认为没有感染HIV,即便是两种检测方法阳性,最后被排除的可能是93.
4%。(广州市梁彩云、高凯等人就广州市808例孕产妇HIV抗体筛查阳性的复核和确证结果进行分析)
为什么不能直接做WB确证实验呢?
神奇的书签
主要是因为直接做WB,很多人都是“不确定”!有研究表明,初筛阴性的同性或双性恋血清做WB,有20~30%使用WB检测可出现一个或更多的条带,哇,如果直接做WB,得吓死一批人。因此,WB只适合抗HIV筛查试验阳性的确认试验。从这个意义上讲,如果没有高危的行为,WB确证实验不确定,真的不必要过度担心。

本文发布于:2024-09-20 21:19:16,感谢您对本站的认可!

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