微生物检验中常用的生化反应
各种细菌所具有的酶系统各不相同，对养分物质的利用力量各异，因而在代谢过程中所产生的合成或分解产物也不同。应用生物化学方法检测细菌的代谢产物，有助于细菌的种、属鉴定。这种利用生化方法来鉴别细菌的试验，统称为细菌的生化试验或生化反应，是识别细菌的重要方法之一。微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物，生化反应常用来鉴别一些在形态和其他方面不易区分的微生物。因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一。 炉温控制系统 微生物检验中常用的生化反应有：
(一)糖酵解试验
各种微生物因含有不同的分解糖(醇、苷)类的酶，所以分解糖类的力量各不相同，而且分解相应糖类后形成的终末产物亦随细菌种类而异，有的产酸，有的还可以产生气体，因此可作为鉴别细菌的依据，对肠道杆菌的鉴别尤为常见。可用指示剂及发酵管检验。
试验方法：以无菌操作，用接种针或环移取纯培育物少许，接种于发酵液体培育基鲁，若取代度
为半固体培育基，则用接种针作穿刺接种。接种后，置36℃ 1.0 ℃培育，每天观看结果，检视培育基颜有无转变（产酸），小倒管中有无气泡，微小气泡亦为产气阳性，若为半固体培育基，则检视沿穿刺线和管壁及管底有无微小气泡，有时还可看出接种菌有无动力，若有动力，培育物可呈弥散生长。
本试验主要是检查细菌对各种糖、醇和糖苷等的发酵力量，从而进行各种细菌的鉴别，因而每次试验，常需同时接种多管。一般常用的指示剂为酚红、溴甲酚紫、溴百里蓝和An-drade指示剂。
prenticehall (二)淀粉水解试验
某些细菌可以产生分解淀粉的酶，把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。淀粉水解后，遇碘不再变蓝。
试验方法：以18h~24h的纯培育物，涂布接种于淀粉琼脂斜面或平板（一个平板可分区接种，试验数种培育物）或直接移种于淀粉肉汤中，于36℃ 1 ℃培育24 h ~48 h,或于20℃培育5d。然后将碘试剂直接滴浸于培育基表面，若为液体培育物，则加数滴碘试剂于试管中。马上检视结果，阳性反应（淀粉被分解）为琼脂培育基呈深蓝、菌落或培育物四周消失无透亮 环、或肉汤颜无变化。阴性反应则无透亮 环或肉汤呈深蓝。
淀粉水解系逐步进行的过程，因而试验结果与菌种产生淀粉酶的力量、培育时间、培育基含有淀粉量和pH等均有肯定关系。培育基pH必需为中性或微酸性，以pH7. 2最适。淀粉琼脂平板不宜保存于冰箱，因而以临用时制备为妥。
(三) V-P试验
某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培育基中能分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸缩合，脱羧成乙酰甲基甲醇，后者在强碱环境下，被空气中的氧氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白胨中的胍基生
成红化合物，称V-P（+）反应。
郑百岗
1.O'Meara氏法
将试验菌接种于通用培育基，于36 ℃ 1 ℃培育48 h,培育液1 mL加OMeara试剂（加油0.3%肌酸或肌酸酐的40%氢氧化钠水溶液)1mL，摇动试管1min~2min，静置于室温或36 ℃ 1 ℃恒温箱，若4h内不呈现伊红即判定为阴性。亦有主见在48 ℃-50 ℃水浴放置2h后判定结果者。
上海人民电机厂
2. Barritt氏法
将试验菌接种于通用培育基，于36℃1℃培育4d,取培育液2.5 mL先加入5%-萘酚纯酒精溶液0.6%mL，再加40%氢氧化钾水溶液0.2mL，摇动2min~5min，阳性菌常马上呈现红，若无红消失，静置于室温或36℃1℃恒温箱，如2h内仍不显现红可判定为阴性。
3.快速法
将0.5%肌酸溶液2滴放于小试管中，挑取产酸反应的三糖铁琼脂斜面培育物一接种环，乳化接种于其中，加入5% a-萘酚3滴， 40%氢氧化钠水溶液2滴，振动后放置5min,判定结果。不产酸的培育物不能使用。
本试验一般用于肠杆菌科各菌属的鉴别。在用于芽孢杆菌和葡萄球菌等其他细菌时，通用培育基中的磷酸盐可阻碍乙酰甲基甲醇的产生，故应省去或以氯化钠代替。本试验常与甲基红试验一起使用。本试验阳性，甲基红试验阴性，反之亦然。
(四) 甲基红试验
大肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖，在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸，进一步分解中，由
于糖代谢的途径不同，可产生乳酸、琥珀酸、乙酸和甲酸等大量酸性产物，可使培育基pH下降至4.5以下，使甲基红指示剂变红。
心灵的微光
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