病理质硬组织的处理方式和制片技巧

2020年1月第27卷第1期
病理质硬组织的处理方式和制片技巧
鲁波李美平张鹏任丽芳沈寅钱洁芳包磊
病理制片技术是病理工作中的重要环节,制片质量直接影响诊断结果的准确性,一张好的切片与取材、固定及制片都有密切的关系。实际工作中,常遇到质地过硬、富含纤维成分多的病理标本,如玻璃样变的平滑肌瘤、纤维-卵泡膜细胞瘤等,制片难度较大。我科通过不断摸索,总结和改进了一些制片处理方式,效果良好,现报道如下:1 材料与方法
1.1 材料来源我科2018年1—5月接收的病理标本30例,其中玻璃样变的平滑肌瘤、纤维-卵泡膜细胞瘤、子宫全切的宫颈标本各10例(各33.3%);患者年龄40~60岁,平均49岁。
1.2 制片方法
1.2.1 所用器材Leica ASP300S全封闭组织脱水机,塑料包埋盒,Leica RM2235切片机,赛默飞组织包埋机,冰水混合物,羽毛刀片(A35型)。报刊征订
1.2.2 标本处理30例标本均经4%中性甲醛固定,进行流水冲洗至脱水程序开始前0.5小时,最后入脱水机
按设定程序脱水。为达到充分脱水的目的,将脱水机出厂程序中加入一缸50%乙醇。脱水程序:4%中性甲醛固定4.0小时→流水冲洗0.5小时→50%乙醇1.0小时→75%乙醇1.0小时→85%乙醇2.0小时→95%乙醇2.0小时→95%乙醇1.5小时→100%乙醇1.5小时→100%乙醇1.5小时→二甲苯Ⅰ0.5小时→二甲苯Ⅱ
0.5小时→石蜡Ⅰ1.0小时→石蜡Ⅱ1.5小时→石蜡Ⅲ2.0小时。
1.2.3 蜡块包埋及切片分组30例标本均按受力最小的面置于包埋盒最底端进行包埋,包埋完成后放入冰箱冷藏,随后进行粗切,最后将修完整的蜡块分别置于冷冻盘和冰水混合物盘中进行对照切片。
2结果(表1)
作者单位:312000 浙江绍兴市妇幼保健院病理科
通信作者:包磊,Email:BL8265@163
经过对脱水机原有程序的改进及包埋方式的改变,运用冰水混合物预处理蜡块后标本处理效果明显改观,切片质量显著提高。
3 讨论
高中英语写作教学玻璃样变的子宫肌瘤、纤维-卵泡膜细胞瘤、子宫全切的宫颈标本在制片质量上难度较大,原因主要与脱水不足有关。多数技术人员只重视高浓度乙醇,认为只要增加高浓度的脱水时间或直接用95%乙醇进行脱水,可又快又好地把组织处理好,结果却正好相反,这样处理会导致脱水不彻底、细胞收缩严重、切片质量差[1]。低浓度乙醇穿透力强,比高浓度乙醇更易渗透到组织块内部将水分置换出来;且收缩性小,不致使组织质地发生改变而在切片时感到组织发脆。笔者运用50%乙醇作为第一道脱水程序的开始,虽然延长了脱水时间,但取得了不错的制片效果。
在包埋时,将组织与刀接触的最小面放置在包埋盒最底端,纵向包埋也利于切片。切片开始前将蜡块进行冷处理是最常见的方法,一般是将蜡块放置于冰箱冷冻格或直接放置于冰盘上。但富含纤维成分的组织或质硬组织在冰箱冷冻格时间过长,会导致蜡块在粗修时发生切崩现象,且切出来的片子厚薄不均、有震颤。冰盘表面凹凸不平很难将整个蜡块切面充分冻均匀,影响预处理的效果,切片时也会发生跳片、切片不连片等情况。运用冰水混合物进行预处理蜡块正好解决了以上难题,既能保持蜡块的硬度适宜,又能使蜡块整个切面受冻均匀,切片省时不费力,切出来的病理切片厚薄均匀、完整、无震颤、无褶皱、染新鲜。但对于脱水效果不好的组织运用冰水混合物处理,效果会适得其反,这类组织在冰水混合物上面放置时间过长,会导致在蜡块表面形成白糊状物,影响切片。
参考文献
[1]丁伟,王德田,董建强,等. 简明病理学技术[M]. 杭州:浙
江科学技术出版社,2014:12.
(收稿:2019-03-08)
(发稿编辑:张戈薇)
表 1 改进脱水后冷冻组与冰水混合物预处理蜡块比较
瓢虫科组别肉眼观镜下观2001年南充案
冷冻组预处理少有蜡块内陷,较少出现组织发白,切片较薄,硬组织可见厚薄不均,
但切片时会出现跳片及蜡块切崩情况部分不完整,有颤痕,有褶皱
冰水混合物预处理少有蜡块内陷,较少出现组织发白,切片菲薄,厚薄均匀,完整,
背包问题论文
切片柔顺,不会出现跳片及蜡块切崩情况无颤痕,无皱褶,染鲜艳
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