向志钢
周卫华
李先辉张永康
1
（吉首大学医学院，湖南吉首416000）
〔摘
要〕目的
研究杜仲粕对四氯化碳致（CCl 4）小鼠肝损伤的影响。方法50只昆明小鼠随机分为对照组、模型组和杜仲粕高、中、低剂量 组，杜仲粕组小鼠分别给予0.25、0.5、1g /kg 的杜仲粕灌胃，对照组和模型组小鼠给予相同剂量的生理盐水灌胃，连续10d ，末次给药后，除对照组外其他各组小鼠均给予腹腔注射10%CCl 4橄榄油溶液
0.2ml /20g ，16h 后处死全部小鼠，比较各组小鼠间血清和肝脏生化指标以及肝脏组织病理学特征的差异。结果 杜仲粕高、中、低剂量组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT ）和门冬氨酸转氨酶（AST ）活性明显低于模型组（均P ＜0.01）；肝组
织中超氧化物歧化酶（SOD ）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px ）活性较模型组升高（均P ＜0.01）；丙二醛（MDA ）含量下降（P ＜0.01）；病理学检查显示模型组小鼠肝细胞变性明显，同时伴有大量炎细胞浸润，杜仲粕各剂量组小鼠肝细胞水肿程度及炎细胞浸润程度减轻。结论杜仲粕对CCl 4所致
的小鼠急性肝损伤具有保护作用。
〔关键词〕杜仲粕；肝损伤；四氯化碳；小鼠〔中图分类号〕R285.5
〔文献标识码〕A
〔文章编号〕1005-9202（2012）10-2089-02；doi ：10.3969/j.issn.1005-9202.2012.10.043
基金项目：植物资源与利用湖南省高校重点实验室开放基金课题
（JSK201114）
1
吉首大学植物资源保护与利用湖南省高校重点实验室
第一作者：向志钢（1969-），男，副教授，硕士，主要从事临床肝胆胰疾病
研究。
杜仲是我国特有的经济林树种和名贵的中药材，其具有的补肝肾、壮筋骨、降血压、抗衰老等功效在《神农本草经》中就有记载
〔1〕
。桃叶珊瑚苷（aucubin ，C 15H 22O 9）属环烯醚萜苷类，主
要存在于杜仲、车前草等多种植物中，是杜仲的主要活性成分之一，具有护肝解毒、抗炎、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、抗骨质疏松及营养神经元细胞等众多药理活性
〔2 5〕
。杜仲粕是杜仲籽
经超临界萃取α-亚麻酸油后的产物，其桃叶珊瑚苷的含量约为8%，并且富含大量其他生物活性物质和营养成分，如京尼平苷、黄酮类物质、杜仲多糖等
〔6，7〕北大校长跪母
。本研究以四氯化碳（CCl 4）诱河南妇女毛深深的沟WCD
导建立小鼠急性肝损伤模型，通过检测肝功能的主要指标和肝脏的病理学检查，观察杜仲粕对小鼠急性肝损伤的保护作用。1材料与方法1.1实验动物50只健康昆明小鼠，清洁级，雄性，体重（20ʃ2）g ，湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供。
大功率开关电源设计
1.2
实验试剂
杜仲粕为杜仲籽经超临界萃取α-亚麻酸后
的剩余物（由湘西和益生物科技有限公司提供）；CCl 4分析纯（国药集团化学试剂公司）；丙氨酸氨
基转移酶（ALT ）试剂盒（批号：20100827）；门冬氨酸转氨酶（AST ）试剂盒（批号：20100828）；丙二醛（MDA ）试剂盒（批号：20110616）；超氧化物歧化酶（SOD ）试剂盒（批号：20110616）；谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px ）试剂盒（批号：20110615）；BCA 蛋白浓度测定试剂盒（批号：20110905），均购自南京建成生物工程研究所。1.3
实验仪器
2011福建理综
TGL-16G 冷冻离心机（上海安亭科学仪器厂
生产）；723可见分光光度计（上海光谱仪器有限公司）；莱卡切片机（RM2126）；全自动生物组织脱水机（YD-12G ）；生物组织包埋机（YD-游园记
6L ）；紫外分光光度计（UV-3100）。 1.4方法
1.4.1
实验分组与给药
健康雄性昆明小鼠50只，适应性喂
养7d 后，随机分为对照组、模型组和杜仲粕高﹑中﹑低剂量组五组，每组各10只，杜仲粕高、中、低剂量组分别按1、0.5、0.25g /kg 的剂量给予杜仲粕灌胃，1次/d ，对照组和模型组均给予等体积的生理盐水灌胃，
连续10d 。实验期间各组小鼠均喂饲普通饲料，均饮自来水，小鼠可自由进食和饮水。末次灌胃给药1h 后，除对照组小鼠外，其余各组均制备CCl 4所致实验性肝损伤模型
〔8〕
，将CCl 4与橄榄油按1ʒ9配制，腹腔注射
CCl 4橄榄油溶液0.2ml /20g ；对照组腹腔注射橄榄油0.2ml /20g 。18h 后，小鼠摘眼球取血，分离血清待测；然后断头处死，剖取出各组小鼠肝脏，进行各项指标的检测。1.4.2
血清ALT 和AST 的活性测定
摘眼球法取血，室温静
置片刻后，3500r /min 离心10min ，取上清液4ħ储存备用，按试剂盒说明书，测定血清AST 和ALT 活性。1.4.3
肝组织中MDA 、
SOD 、GSH-Px 含量及活性的测定剖
取小鼠相同部位肝组织冰浴研磨10min ，然后玻璃匀浆器研磨10min ，用冷生理盐水配制成10%肝匀浆液，4000r /min 离心10min ，取上清液，按试剂盒说明书，测定肝组织MDA 含量和SOD 、GSH-Px 活性。1.4.4
肝组织病理学检查
取小鼠肝右中叶，
10%甲醛溶液固定24h ，常规脱水透明，石蜡包埋，连续切片，厚度约7μm ，常规HE 染，光学显微镜下观察肝脏的病理组织学改变。1.5
实验数据分析
采用SPSS16.0统计软件，计量资料采用
x ʃs 表达，多个样本均数总体差异比较用方差分析，样本均数间的两两比较用q 检验。2
结
果
2.1
杜仲粕对小鼠血清ALT 和AST 的影响
模型组小鼠血
清AST 和ALT 活性显著高于对照组组（P ＜0.01），杜仲粕不同剂量组血清AST 和ALT 明显低于模型组（P ＜0.01）。见表1。2.2杜仲粕小鼠肝组织SOD 、
kapGSH-Px 活性和MDA 含量的影响
与对照组比，模型组小鼠肝组织SOD 和GSH-
Px 活性显著
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