2040Chin J Lab Diagn,December»2020,Vol 24,No. 12文章编号：1007 — 4287(2020)12 — 2040 — 02
王晶莹ia，刘洋2，刘启迪ib*
雅园玉道
(1.吉林大学中日联谊医院a.检验科；b.呼吸内科，吉林长春130033;2.吉林大学第二临床医院放射线科)
全球每年的新增肺癌数量高达180万，其中一 半以上死于该病[1]。流行病学对肺癌的15年生存 率调查结果显示，不同地区不同疾病进展阶段的患者的生存率从4%到17%不等[2]。而较为常规的治 疗手段是手术切除[3]，此外，肺癌的5年生存率也基 于不同的病理分区，呈现出较大的差异[4]。因此发 现可以用于早期诊断的肿瘤标志物对于改善患者的 预后是十分有意义的。
紫苏脂素2(Pl i n2)是一种与细胞内脂滴（LDs)代谢有关的蛋白质。然而，对其表达的调控会影响多种代谢和年龄相关疾病的严重程度，如脂肪肝、胰 岛素抵抗和2型糖尿病（T2D)、心血管疾病、动脉粥 样硬化、肌萎缩和癌症[5’6]，研究显示该蛋白可能在这些病理状态中起作用。本研究目的在于寻肺癌 的差异表达蛋白，探索其作为肿瘤标志物的意义。 1材料与方法
1.1研究对象收集手术中切取的新鲜肿瘤组织、正常组织，置于无菌容器内，P B S冲洗，液氮速冻。1.2方法通过生物信息数据库T C G A检索，初 步确认P l i n2的表达情况，免疫印迹进一步观察其在肺癌组织及癌旁组织中的差异表达情况.免疫组 化染，探讨P l i n2的表达意义。 1.3主要试剂 N，N’_亚甲双丙烯酰胺，蛋白定量 试剂盒，甘氨酸，无水乙醇，蛋白抽提试剂盒，丙烯酰 胺，D A B试剂盒，Tris-base，二甲苯。
1.4统计学处理数据采用卡方检验，用SPSS1
2.0 软件分析，P<〇. 05定义为有统计学意义。
2结果
2. 1TCGA数据库检索差异表达基因Plin2
通过在线检索T C G A数据库，搜索肺癌中的差 异表达基因，发现P l i n2基因在肺癌组织中的转录水平显著低于癌旁组织。如图1所示。
2.2 Plin2在肺癌组织与癌旁组织表达水平的比较
通过免疫印迹法，观察肺癌以及癌旁组织中P l i n2的表达水平，P l i n2在肺癌的肿瘤组织的表达水平显著低于配对的癌旁组织，见图2。
E xp ression o f PLIN2 in LU A D based on Sample typ es
250 n
200-
Normal Primary tumor
(n=59) (n=515)
T C G A samples
图1差异表达基因PIin2在T C G A数据库检索检索结果P lin2
0-a c t in
图2 P h n2在肺癌及癌旁组织中的表达
A：肺癌组织；B：肺癌癌旁组织
imsi2.3 PHn2在结肠腺癌组织与癌旁组织的表达意义
山西太原重型机器厂经免疫组化染，我们直观地看到P l i n2的表 达，如图3。分析本研究收集的60例组织样本，发 现B i n2蛋白在71.2%(43/60)肺癌组织中低表达，仅在46. 7%(28/60)肺癌旁组织中低表达（详见表 1)。结果说明：Pl i n2蛋白在肺癌组织中低表达，具 有统计学差异（P<〇. 05)，见表1。
阴性对照
’慧
S i:：暮又^
癌组织
*通讯作者图3 Plin2在肺癌及癌旁正常组织中的表达（
X200)
中国实验诊断学2020年12月第24卷第12期2041
表1肺癌与癌旁组织中Piin2蛋白表达情况对比
Plin2蛋白表扶
病例分类样本数U)-
低高
- P值癌组织604317<0. 05交通安全与智能控制
癌旁组织602832
3讨论
最近的研究表明，在某些类型的癌症中，循环系 统[7]和体液（如尿液[8]和癌症组织）中的P l i n2水平 都会增加。与健康受试者相比，结直肠癌m、伯基特 淋巴瘤[9]、肺腺癌[w]、透明细胞癌和乳头状肾癌[8]患者的P l i n2水平表现出较为明显的差异。血液或 体液中P l i n2水平的增加预示着其可能成为早期
检测特定癌症的潜在有意义的生物标志物[11]。虽然 这一研究领域还处于初级阶段，但至少对于某些类型的癌症，Plin2过表达在肿瘤发生或发展中的作用 是可以进行探索的。有人提出因为Plm2的表达是 由HIF-1诱导的，进而推断Pl i n2可以通过对缺氧的适应在肿瘤发生中起作用。本研究以生物信息分 析，对肺癌中的差异表达基因进行筛查，发现P l i n2 在肺癌中低表达，经免疫印迹技术，我们进一步验证 了蛋白P l i n2在肺癌中低表达的状态。基于前期的 组织标本收集，我们分析了 P l i n2的表达情况，结果 显示，P l i n2在78%的肺癌中低表达，在24 %的肺癌 癌旁组织中低表达，进而我们认为P l i n2可能是肺 癌的潜在的肿瘤标志物。
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(收稿日期：2020 —04 —15)
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