粪大肠菌检测

一、室所用设备、器皿

1、中国地方志指导小组湖南大学移动图书馆无菌区工作台

2、恒温培养箱

3、高压蒸汽灭菌器

4、冰箱

5、酒精灯

6、天平

7、电炉

8、采样广口瓶

9、 t10钢烧杯、玻璃棒

10 、玻璃发酵管

11、试管架

12、移液管

13、锥形瓶

泰晤士报高等教育副刊

二、药品：乳糖胆盐培养基

三、前期准备

1、玻璃器皿灭菌（高压蒸汽灭菌）

所用采集水样的广口瓶、玻璃试管、移液管、玻璃棒、锥形瓶等玻璃器皿均需放入高压锅灭菌。

广口瓶：将清洗干净的采样瓶盖好瓶盖，用牛皮纸、报纸等防潮纸将瓶盖、瓶顶和瓶颈处包裹好，用绳子绑好，置于121℃的高压蒸汽灭菌器灭菌15分钟。

溶液的形成

玻璃试管、移液管、玻璃棒：用牛皮纸、报纸等防潮纸将其包裹好，置于121℃的高压蒸汽灭菌器灭菌15分钟。

2、采样

采取水样时，可握住瓶子下部直接将已灭菌的带盖采样瓶插入水中，约距水面10~15cm处，拔瓶盖，瓶口朝水流方向，使水样灌入瓶内然后盖上瓶盖，将采样瓶从水中取出。如果没有水流，可握住瓶子水平前推，直到充满水样为止。采好水样后，迅速盖上瓶盖和包装纸。

采好的水样，应迅速运往实验室，进行检验，一般从取样到检验不宜超过2h，否则应使用10℃以下的冷藏设备保存样品，但不得超过6h。

四、实验步骤（多管发酵法）

1、配制乳糖胆盐培养基试制

（注：做15管的话，10ml的要配双料的，如：30g配1000ml，就应称取60g配1000ml，其他1ml、0.1ml的配制成单料的）,配制试剂时不用定容，只需大概体积即可。

2、称取12g乳糖胆盐培养基溶于200ml蒸馏水中，置于电炉上加热至溶解完全为止，冷却至室温后，分装于玻璃发酵管里。（5管10ml）

3、称取6g乳糖胆盐培养基溶于100ml蒸馏水中，置于电炉上加热至溶解完全为止，冷却至室温后，分装于玻璃发酵管里。（10管10ml）

5、所有发酵管盖好盖子，包裹好置于高压锅灭菌15 分钟（第一次曝气开始计时）理论热点面对面2011

6、分别加入5管10ml、5管1ml、5管0.1ml的水样于已冷却至室温的发酵管中，并置于恒温培养箱里培养24小时（温度为44.5℃）

五、结果

根据不同接种量的发酵管所出现阳性结果的数目，从MPN表中查得相应的MPN指数，按总大肠菌的计算方法计算每升水中粪大肠菌细菌的MPN值。

本文发布于:2024-09-21 03:15:24，感谢您对本站的认可！

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