脂褐素染

胶原纤维
一、胶原纤维的分布和组成成分
胶原纤维是结缔组织中的三种纤维之一,    分布最为广泛, 含量最多。 主要分
布于真皮、腱、韧带、骨、透明软骨、动脉、肠壁 、子宫和基底膜等。胶原纤维具有韧性大,抗拉力强的特点。胶原纤维单位主要由纤维母细胞合成。二、胶原纤维染的应用
胶原纤维染在病理诊断上主要用于鉴定梭形、纤维形细胞肿瘤的组织来
源;常常要在纤维、平滑肌和神经三者之中作出选择。 还能使用于其他的情况下,如观察动脉硬化的心脏, 在 HE切片中,心肌内散在的小疤痕灶和心肌均被染作红,而作胶原纤维染可将胶原组织和上肌明显地区分开来。 早期肝硬化用胶原纤维染,也可使小叶之间少量增生的胶原纤维突出地显示出来。三、胶原纤维染的方法
1.Van Gieson酸性复红法
2.成长第一课堂Siriured 染法
3.Lillie 改良 Van Gieson
4.Clark 改良 Van Gieson
5.Biebric 猩红染法
6.显示胶原纤维、细胞和肌肉的新染法
四、胶原纤维的常用染:
胶原纤维在 HE 染法被染成粉红,除此之外,它还可以用一些阴离子的
染料来进行染, 如用淡绿可把它们染为绿,    用甲苯胺蓝可将其染为蓝,    在
网状纤维染中,如不加以处理,它又可被染为棕黄。常用的特殊染法有
Van Gieson.Masson Mallary 等方法。在免疫细胞化学染中, 胶原纤维由于含的负电荷过多,常导致某些非特异性的染,应特别注意。
Van GiesonV.G )染法
I.试剂的配制: weigert 氏苏木素
A 液: 苏木素    1g haematoxylin
无水酒精    100ml
B 液:  30%三氯化铁    4ml ferric chloride

蒸馏水    95ml
盐酸  1ml
II Van Gieson 氏液
A 液: 酸性品红    1gacid fuchsin
蒸馏水    100ml
B 液: 饱和水溶液,(  1.22%)( picric acid
注意事项:
1Weigert 氏苏木素临用前取 A 液和 B 液等份混合,几个小时内用完,最长不得超过一天。
2、苏木素配后经二十多天才能成熟,必须提前配制。
3、该液能抵抗弱酸性染液,对已着染的细胞核在酸性染液的作用,不易被脱去颜,如果不特别深染,则无须分化。
4Van Gieson氏液取 B 志愿者返乡被骂哭液 9ml,加入 A 1ml,即可使用。
操作方法:(后面的各种方法,如没特别说明,都在室温下进行)
1、切片脱蜡至水,
2、用 Weigert 氏苏木素染  20min
3、水洗,必要时可分化,
4、流水冲洗 10min
5、染 Van Gieson 氏液 1min
6、用 95%酒精快速分化,
7、无水酒精脱水,二甲苯透明,封固。
结果:
胶原纤维:鲜红,肌纤维: 黄* ,红细胞: 黄* ,细胞核: 蓝黑或灰。
注意事项:
1、该法染完的切片,较易褪如需照相,应尽早完成。
2、苏木素染液如为棕或沉淀,应将其抛弃。
3、分化用的酒精, 应使用 95%以上的酒精,低浓度的酒精褪能力强,容易
将着染的红脱去。
4、切片也可以用天青兰苏木素替代    Weigert 氏苏木素,染核效果基本一样。

网状纤维染
一、定义
网状纤维( reticular fiber )是一种纤细的纤维。它穿行于网状细胞体和突起分支,并互相交织成网,因而被称为网状纤维,又因这种纤维对银的浸染着特别显著。故又称为嗜银纤维。
二、形成
它的形成主要是在纤维母细胞的粗面内浆网中,合成可溶性胶原。在醛糖、类脂的作用下,形成可溶性胶原,随后它被分泌到细胞外,在基质中(或在细胞的表面)通过原胶原蛋白分子间的交联, 聚合成为不溶性的胶原原纤维即网状纤维。
三、特点
网状纤维纤细,直径    0.2-1μm,没有弹性,而有韧性,能抵抗胃液的消化和
弱酸的腐蚀。它的主要成分也是胶原蛋白, 在电镜下也有胶原原纤维特有的周期
性横带。因此,网状纤维在分子结构上可能和胶原纤维相似,    只不过胶原原纤维
补蛋白质和多糖的基质粘聚成束,    形成胶原纤维后, 从而失去嗜银性。 所以胶原
纤维银染呈阴性而网状纤维则呈阳性,网状纤维的原纤维上包有一层糖蛋白,
湖南大学综合管理系统据称这是导致它有嗜银性的原因。
四、分布
网状纤维的分布很广泛,常以两种形式存在。一种是以网状结缔组织形式
分布,即有网状纤维和网状细胞同时存在。多分布于造血器官和淋巴网状器官 , 如红骨髓、脾、淋巴结、肝、扁桃体和胸腺 ,消化管和呼吸道管壁的淋巴组织内 , 并成为这些器官的网状支架。另一种是以网状纤维单独存在 ,没有网状细胞伴随 , 见于上皮的基底膜 ,还有
平滑肌无用师卷 ,脂肪细胞 ,毛细血管和神经纤维都有网状纤维包裹。我们日常所称的网状纤维染 ,主要是显示淋巴网状组织的网状纤维 ,因为这些组织网状纤维的增多或减少 ,崩解成断裂海淀走读大学 ,都有助于病理组织上的诊断。五、染原理
银浸染法:
组织经过氧化剂的氧化使网状纤维对银离子具有选择性的亲和力, 并在媒染剂的作用下,氨银液被组织吸咐与组织中的蛋白结合, 经甲醛还原成黑的金属

银沉积于组织内及表面。 用氯化金调后,再用硫代硫酸钠液洗去未还原的银盐,从而将组织内的网状纤维清晰地显示出来。六、染步骤
Gomori's
1、试剂的配制:
10%硝酸银jcr 3 份,加入 10%的氢氧化钾 1 份,混合后产生大量的黑沉淀物,倒去表
面的液体, 保留下沉淀物, 加入 10-20 倍或更多的蒸馏水进行冲洗,连续冲洗 3 次。待沉淀物清晰则可。 用浓氨水逐滴加到溶液中。 使沉淀物逐步溶解。待见沉淀物剩少数几颗时, 再取 10%的硝酸银液加入数滴, 至溶液再现浑浊为止。再用氨水将其溶解,然后稀释 10-15 倍。即可使用。平时保存于 4℃冰箱中。
2、操作步骤:
(1)、切片脱蜡至水,蒸馏水洗,
(2)、用 0.5%高锰酸钾氧化    5min
(3)、自来水洗,继用蒸馏水洗,
(4)、用 2%草酸漂白切片  2min
(5)、自来水洗,蒸馏水洗,
(6)2%硫酸铁铵媒染  5min
(7)、水洗,蒸馏水洗,
(8)、滴入氨性银溶液浸染    3-5min
(9)、蒸馏水洗数次,
(10) 10%甲醛液还原  5-10min
(11)、水洗 2min
(12)、用核固红染    10-15min
(13)、水洗 10min,各级酒精脱水,
(14)、常规透明,中性树胶封固。

结果:网状纤维黑,核红,胶原纤维黄棕。

本文发布于:2024-09-21 17:42:00,感谢您对本站的认可!

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