第四节抗凝系统检测抗凝系统检测包括临床上常用的病理性抗凝物质检测和生理性抗凝因子检测两部分，后者也是凝血系统的调节因子。 【原理】
凝血酶时间（thrombin time，TT）是在受检血浆中加入“标准化”凝血酶溶液，测定开始出现纤维蛋白丝所需的时间。
【参考值】
美女特工传奇手工法：16～18s；也可用血液凝固分析仪检测。必须指出本实验需设正常对照值。受检TT值延长超过正常对照值3s 以上为延长。
【临床意义】
TT延长见于低（无）纤维蛋白原血症[hypo（a）fmrinogenemia]和异常纤维蛋白原血症（dysfibrinogen 中华全国台湾同胞联谊会emia）；血中纤维蛋白（原）降解产物（FDPs）增高；血中有肝素或类肝素物质存在（如肝素中、sLE和肝脏疾病等）。TT缩短无临床意义。
（二）甲苯胺蓝纠正试验或血浆游离肝素时间
【原理】
甲苯胺蓝呈碱性，有中和肝素的作用。在凝血酶时间（TT）延长的受检血浆中加入少量甲苯胺蓝，再测定TT。若延长的
TT恢复至正常或明显缩短，则表示受检血浆中有类肝素物质存在或肝素增多；若不缩短，则表示受检血浆中存在其他抗凝血酶类物质或缺乏纤维蛋白原。
【参考值】
TT延长的受检血浆中加入甲苯胺蓝后，TT缩短5s以上，提示受检血浆中有类肝素或肝素物质增多；如果TT不缩短，提示延长的TT不是由肝素类物质所致。
【临床意义】
血中类肝素物质增多见于严重肝病、DIC、过敏性休克、使用氮芥类药物、放疗后、肝叶切除后、肝移植后等。临床应用肝素时，延长的TT也被甲苯胺蓝纠正。
（三）APTT交叉试验
【原理】
本试验是用于鉴别凝血因子缺乏或有抗凝物质存在。延长的APTT，若能被1／2量的正常新鲜血浆所纠正，表示受检
血浆中可能缺乏凝血因子；若不能纠正则表示受检血浆中可能存在抗凝物质（图4-3-2）。
二、病理性抗凝物质的诊断试验
（一）狼疮抗凝物质测定
【原理】
是一种改良Russell蝰蛇毒稀释试验包括①Lupo试验Ⅱ：即当蝰蛇毒试验延长时，加入正常血浆后，蝰蛇毒时间仍延长，提示被检血浆中存在狼疮抗凝物质；②Lucol。试验：内含过量脑磷脂以中和狼疮抗凝物质，从而使凝固时间缩短或正常。
【参考值】
凝固法：lupo试验Ⅱ为31～44 s；lucor试验为30～38 s；Lupo试验Ⅱ／lupo试验比值为1.0～1．2。
【临床意义】
本试验阳性见于有狼疮抗凝物质存在的患者，如SLE、自发性流产、某些血栓性疾病以及抗磷脂抗体综合征等。
（二）抗心磷脂抗体测定
【原理】
抗心磷脂抗体（anti-cardiolipin antibodies，ACA）是抗磷脂抗体（anti-phospholipid antibody，APA）中的一种主要抗体，它的靶抗原主要是血浆中的磷脂结合蛋白（phospholipid binding protein），如β2一糖蛋白I（β2一GPI）和凝血酶原广告的种类
（pro-thrombin）等。从而导致APA与内皮细胞、血小板膜磷脂结合，引起血管壁受损和血小板活化等，促进血栓形成。
【检测结果】
阴性。
【临床意义】
原发性抗磷脂抗体综合征（anti-phospholipid antibody syndrome，APS），如动／静脉血栓、自发性流产、免疫性溶血等。继发性APS，如SLE（本试验阳性率70％～80％）、类风湿关节炎（阳性率33％～49％）、脑血管意外、免疫性血小板减少和特发性血小板减少性紫癜等。
三、生理性抗凝因子检测
（一）血浆抗凝血酶活性测定
【原理】
受检血浆中加入过量凝血酶，使抗凝血酶（antithrombin，AT）与凝血酶形成1：1复合物，剩余的凝血酶作用于发底物S-2238，释出显基团对硝基苯胺（PNA）。显的深浅与剩余凝血酶呈正相关，而与AT呈负相关，根据受检者吸光度（A值）从标准曲线中计算出AT：A的含量。
【参考值】
发底物法：108．5％±5．3％。
【临床意义】
1．增高见于血友病、白血病和再生障碍性贫血等的急
性出血期；也见于口服抗凝药过程中。
2．减低见于先天性和获得性AT缺陷症，后者见于血栓前状态、血栓性疾病、DIC和肝脏疾病等。
（二）血浆蛋白C活性测定
达扎活佛
【原理】
从蛇毒液中提取的protac为蛋白c（protein C，PC）特异性的激活剂，被激活后的PC（即活化蛋白C，APC）作用与特异的发底物Chromozym PCA，释放出对硝基苯胺（PNA）而显，显深浅与Pc：A呈线性关系。
【参考值】
100.24％±13．18％。
【临床意义】
PC：A是检测Pc活性的方法之一。PC是一种依赖维生素K的天然抗凝因子。在凝血酶（T）与凝血酶调节蛋白（TM）复合物（T-TM）的作用下，PC转变为活化蛋白c（APc），后者灭活因子Ⅷa、V a和促进纤溶活性，起到抗凝血作用。减低：遗传性者见于遗传性或先天性PC缺陷症；获得性见于：DIC、肝病、手术后、口服抗凝剂、急性呼吸窘迫综合征和DIC 等。
（三）血浆游离蛋白S抗原和总蛋白S抗原测定
【原理】
总蛋白s（total protein S，TPS）抗原包括游离蛋白s（free
protein S，FPS）抗原和与补体C4．结合的PS（C4bp-PS）。火箭电泳法是在琼脂板上同时测定TPS和FPs，即在待测血浆中加入一定量的聚乙二醇6000，则c4bp-PS会沉淀下来，上清部分即为FPS。
【参考值】
免疫火箭电泳法：FPS为100.9％±29．1％；TPs为96．6％±9．8％。
【临床意义】
FPS减低：见于先天性和获得性。PS缺陷症，后者见于肝病、口服抗凝剂和DIC等。
混凝土（四）血浆凝血酶一抗凝血酶复合物测定
【原理】
用兔抗人凝血酶抗体包被酶标板，加入受检者血浆后再加入辣根过氧化酶标记的鼠抗人AT抗体，后者使OPD显，显的深浅与受检血浆中所含的凝血酶一抗凝血酶复合物（thrombin-antithrombin cornplex，TAT）呈正相关。
【参考值】
酶标法：（1．45±0.4）μg／L。
【临床意义】seer2.61
本试验是反映凝血酶活性的试验。增高见于急性心肌梗死、不稳定型心绞痛、DIC、深静脉血栓形成、脑梗死、急性白血病等。
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